【摘要】：目的汞作為一種具有神經(jīng)毒性和發(fā)育毒性的環(huán)境污染物,其不僅能夠通過胎盤屏障直接影響胚胎正常的生長發(fā)育,且能夠透過血睪屏障抑制精子生成、降低精子產(chǎn)能。近期研究提示,父源性汞暴露能誘發(fā)不良的出生結(jié)局。然而,汞的致畸毒性相關的機制目前尚不明確。基因印記是一個獨特的表觀遺傳學調(diào)節(jié)方式,在胎兒以及出生后的生長發(fā)育方面起著重要作用。而印記基因DNA甲基化對環(huán)境致畸物十分敏感,有研究指出煙草、酒精和苯并芘等能使印記基因DNA甲基化水平發(fā)生改變。而父源性汞暴露與精子DNA印記基因甲基化水平關系的人群研究尚無報道。本課題擬通過流行病學現(xiàn)場調(diào)查和分子生物學實驗室分析相結(jié)合,研究男性環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露狀況及與精子DNA印記基因H19、Peg3和Meg3甲基化水平之間的相關關系,探討出生缺陷的父源性環(huán)境暴露相關的表觀遺傳學機制,進而為出生缺陷的一級預防提供理論依據(jù)。方法1.現(xiàn)場流行病學調(diào)查從2015年4月和2016年3~4月來山西省婦幼保健院生殖中心和山西大醫(yī)院男科門診中進行婚前檢查或孕前檢查的男性作為調(diào)查對象。采用橫斷面調(diào)查的方法,對調(diào)查對象進行問卷調(diào)查。了解調(diào)查對象的年齡、受教育水平、個人或家族出生缺陷史和遺傳病史、吸煙飲酒情況、飲食習慣(如水產(chǎn)品攝入狀況)等。最終,納入研究的共618人。2.生物樣品收集和檢測2.1收集男性中段尿樣,采用全自動雙通道的氫化物發(fā)生原子熒光光度計AFS-9700測定尿中總汞含量。2.2收集男性精液,采用異硫氰酸胍法提取精子基因組DNA。進一步采用焦磷酸測序法分別檢測精子DNA印記基因H19、Peg3和Meg3甲基化水平。3.統(tǒng)計分析采用Epi Data3.1軟件進行平行雙錄入建立數(shù)據(jù)庫,運用SPSS19.0軟件對資料進行統(tǒng)計分析。采用非參數(shù)檢驗比較不同人口學特征組間尿汞水平分布;采用單因素Spearman秩相關分析和多重線性回歸方法分析尿汞水平與精子DNA印記基因H19、Peg3、Meg3甲基化之間相關性。結(jié)果1.調(diào)查對象環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露狀況調(diào)查對象尿汞水平中位數(shù)為9.14μg/l(四分位數(shù)間距:5.56~12.52μg/l;濃度范圍:0.16~71.35μg/l)。按照美國CDC指南中非職業(yè)汞暴露人群的尿汞水平正常范圍(小于10μg/l),本調(diào)查對象中共有42.7%的男性尿汞水平超過此范圍。非參數(shù)檢驗分析結(jié)果顯示,不同人口學特征(包括年齡、是否吸煙、是否飲酒、是否食用水產(chǎn)品及受教育水平)組間男性尿汞水平分布比較未發(fā)現(xiàn)差異。2.調(diào)查對象尿汞水平與精子DNA印記基因甲基化水平的關系2.1單因素Spearmen秩相關分析發(fā)現(xiàn),尿汞水平與精子DNA印記基因H19甲基化水平呈負相關,即尿汞水平增加與H19去甲基化相關聯(lián)。然而未觀察到尿汞水平與精子DNA印記基因Peg3和Meg3甲基化水平有關。2.2多重線性回歸分析發(fā)現(xiàn),在排除年齡、是否吸煙、是否飲酒、是否食用水產(chǎn)品及受教育水平混雜因素的干擾后,尿汞水平僅對精子DNA印記基因H19甲基化有影響,兩者之間呈負相關。這提示尿汞水平增加和精子DNA印記基因H19去甲基化的獨立地相關。結(jié)論1.本研究中的調(diào)查對象環(huán)境重金屬汞非職業(yè)暴露處于較高水平;2.尿汞水平與精子DNA印記基因H19甲基化之間呈負相關,即尿汞水平增加與精子印記基因H19去甲基化相關聯(lián),提示精子DNA表觀遺傳修飾對環(huán)境污染物極為敏感。
【學位授予單位】：山西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R114
【圖文】：

精子DNAH19、Peg3和Meg3甲基化平均水平（均值±標準差）

【參考文獻】

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1 魏炎;李鍇男;畢經(jīng)旺;;表觀遺傳學在結(jié)直腸癌中的應用進展[J];臨床腫瘤學雜志;2016年08期

2 李建波;李博;梁新新;王s

本文編號：2753039