本文關(guān)鍵詞：基于納米磁珠的水體中蒽快速檢測方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：多環(huán)芳烴（PAHs）主要來源于有機(jī)物熱解或不完全燃燒，是一類廣泛存在于自然環(huán)境中，具有致癌性和致突變性的持久性有機(jī)污染物，近年來，PAHs在河流、湖泊、海域等水體中被相繼檢出，引發(fā)嚴(yán)重的生態(tài)風(fēng)險。目前，PAHs的檢測主要依賴于儀器檢測、細(xì)胞檢測和免疫學(xué)檢測等手段。其中，免疫分析技術(shù)以其高效快速、靈敏準(zhǔn)確、操作簡便等諸多優(yōu)點(diǎn)，被越來越多地應(yīng)用到水體中PAHs的檢測中。 本文以環(huán)境中優(yōu)先控制PAHs中的蒽（ANT）為目標(biāo)，將小分子ANT分別與牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶聯(lián)制備完全抗原ANT-BSA和ANT-OVA。使用ANT-BSA免疫Balb/c小鼠，取免疫后小鼠的乆淋巴結(jié)細(xì)胞或脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞融合后，篩選到2株雜交瘤細(xì)胞D3和H8。體內(nèi)誘生腹水法大量生產(chǎn)腹水后，使用親和層析法純化得到抗蒽單克隆抗體。用純化后的單抗建立了酶標(biāo)板間接競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ic-ELISA）和磁珠（IBM）ic-ELISA兩種檢測方法，并對兩種檢測方法的檢測條件進(jìn)行了優(yōu)化。 酶標(biāo)板-ic-ELISA檢測蒽的線性回歸方程是Y=0.4253x-0.1883，R2=0.9901，線性檢測范圍為4.76ng/mL~362.16ng/mL，最低檢測限為3.65ng/mL。蒽的半數(shù)抑制濃度為41.53ng/mL，與芘交叉反應(yīng)率為5.80%，與其他14種PAHs的交叉反應(yīng)率皆小于1%。平均板內(nèi)變異系數(shù)為5.95%，平均板間變異系數(shù)為12.86%。模擬樣本檢測，回收率在100.07%～111.08%之間。分別從長春、大慶、錦州、北京四地采集了一份水樣進(jìn)行檢測，，樣品中蒽的含量分別為5.63ng/mL、13.78ng/mL、4.42ng/mL和4.65ng/mL，自來水中未檢出。 IBM-ic-ELISA檢測蒽的線性回歸方程是Y=0.3128x+0.0383，R2=0.9761，線性檢測范圍為1.575~568.585ng/mL，最低檢測線為2.431ng/mL。平均板內(nèi)變異系數(shù)為8.28%，平均板間變異系數(shù)為13.44%。模擬樣本檢測，回收率在101.59%~106.77%之間。對上述4個樣本進(jìn)行檢測，樣品中蒽的含量依次為4.28ng/mL、12.42ng/mL、4.17ng/mL和5.13ng/mL。
【關(guān)鍵詞】：蒽 單克隆抗體 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 納米磁珠
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R123.1
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 目錄8-9
• 英文縮寫詞表9-10
• 引言10-11
• 第一篇 文獻(xiàn)綜述11-21
• 第1章 多環(huán)芳烴概述11-17
• 1.1 多環(huán)芳烴簡介11-12
• 1.2 PAHs 的危害12-13
• 1.3 我國水環(huán)境中 PAH s 的污染現(xiàn)狀簡介13-14
• 1.4 PAHs 的檢測方法14-17
• 第2章 免疫磁珠在免疫分析中的應(yīng)用17-21
• 2.1 納米材料在免疫分析中的應(yīng)用17-18
• 2.2 免疫磁珠（immunomagnetic bead, IMB）的簡介18-21
• 2.2.1 免疫磁珠的結(jié)構(gòu)18-19
• 2.2.2 免疫磁珠的性質(zhì)19
• 2.2.3 免疫磁珠技術(shù)的原理19-21
• 第二篇 研究內(nèi)容21-64
• 實(shí)驗(yàn)1 蒽單克隆抗體的制備與鑒定21-37
• 1.1 材料21-24
• 1.2 方法24-30
• 1.3 結(jié)果30-34
• 1.4 討論34-36
• 1.5 小結(jié)36-37
• 實(shí)驗(yàn)2 酶標(biāo)板 IC ELISA 方法的建立及初步應(yīng)用37-52
• 2.1 材料37
• 2.2 方法37-41
• 2.3 結(jié)果41-50
• 2.4 討論50-51
• 2.5 小結(jié)51-52
• 實(shí)驗(yàn)3 IBM ic ELISA 方法的建立及初步應(yīng)用52-64
• 3.1 材料52
• 3.2 試驗(yàn)方法52-55
• 3.3 結(jié)果55-62
• 3.4 討論62-63
• 3.5 小結(jié)63-64
• 參考文獻(xiàn)64-71
• 導(dǎo)師簡介71-72
• 作者簡介及科研成果72-73
• 致謝73

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：273721