本文關(guān)鍵詞：抗氧化劑對鈾礦塵致人巨噬細胞功能損傷的保護作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探究鈾礦塵對人巨噬細胞功能影響的研究以及四種抗氧化劑(NAC、SOD、CAT、甘露醇)對鈾礦塵介導(dǎo)的巨噬細胞損傷保護作用，為降低鈾礦塵致肺損傷尋找防護劑提供實驗依據(jù)。方法 將實驗分為對照組(0μg/cm2)和實驗組(25、50、100、200和400μg/cm2)，通過MTT法檢測鈾礦塵對人巨噬細胞(THP-1)存活率影響的時效關(guān)系；采用Annexin-V FITC/PI雙染法以及Hoechst33258熒光標(biāo)記法來分析鈾礦塵對人巨噬細胞凋亡率和凋亡形態(tài)學(xué)的影響；經(jīng)2,7-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFH-DA)染色后，采用熒光顯微鏡及化學(xué)/熒光發(fā)光儀檢測鈾礦塵對人巨噬細胞內(nèi)活性氧(ROS)水平的變化情況；分別用熒光染料JC-10、FLUO-8AM、CMFDA染色后，化學(xué)/熒光發(fā)光儀檢測THP-1巨噬細胞線粒體膜電位、細胞內(nèi)游離鈣離子(Ca2+)及胞內(nèi)谷胱甘肽(GSH)水平的變化情況；FITC標(biāo)記的大腸桿菌與不同濃度鈾礦塵處理12h后的THP-1巨噬細胞共同孵育2h，化學(xué)/熒光發(fā)光儀檢測其熒光強度，分析鈾礦塵對THP-1巨噬細胞吞噬功能的影響；液體懸浮芯片系統(tǒng)檢測各實驗組細胞因子(IL-1β、GM-CSF、TNF-α、IL-8等)時效關(guān)系的變化特征。 抗氧化劑(NAC、SOD、CAT、甘露醇)孵育THP-1巨噬細胞后，檢測鈾礦塵致巨噬細胞損傷后細胞凋亡、凋亡相關(guān)指標(biāo)、吞噬功能以及細胞因子的變化情況，比較研究四種抗氧化劑對鈾礦塵致人巨噬細胞功能損傷的保護作用。結(jié)果 鈾礦塵染毒人巨噬細胞后，細胞存活率呈暴露時間和劑量依賴性下降。胞內(nèi)ROS的變化水平和細胞凋亡率與染毒劑量呈正相關(guān)，上升的ROS水平加快GSH耗竭。同時伴隨線粒體跨膜電位的下降與胞內(nèi)Ca2+水平上升。細胞的吞噬功能隨著鈾礦塵濃度的升高而逐漸被抑制，低劑量鈾礦塵處理時IL-1β、GM-CSF、TNF-α和IL-8等細胞因子的表達量呈逐漸增加狀態(tài)，加快了炎癥反應(yīng)。 四種抗氧化劑(SOD、CAT、甘露醇、NAC)孵育THP-1巨噬細胞后，存活率較處理前明顯上升，凋亡率也呈下降趨勢，氧化損傷指標(biāo)影響的(ROS和GSH變化水平)也呈對應(yīng)變化趨勢。其中，NAC和甘露醇組作用效果最為明顯。NAC孵育后較孵育前能明顯抑制巨噬細胞吞噬功能的降低，IL-1β、GM-CSF、TNF-α、IL-8等細胞因子的上升幅度較孵育前也明顯降低。胞內(nèi)活性氧自由基(H2O2、O2-·、· OH等)的產(chǎn)生與鈾礦塵致人巨噬功能損傷呈正相關(guān)，· OH可能是細胞損傷過程中最主要的活性氧自由基，其具體作用機制需要進一步研究。結(jié)論1．鈾礦塵能誘導(dǎo)THP-1巨噬細胞凋亡，降低細胞存活率，早期鈾礦塵致細胞損傷是以凋亡為主的毒性影響。2．鈾礦塵可以抑制THP-1巨噬細胞的吞噬功能，可使胞內(nèi)ROS水平上升以及GSH相對水平含量降低。鈾礦塵致巨噬細胞功能損傷過程中，能引起TNF-α、IL-8、TGF-β等細胞因子含量的升高。3．NAC、CAT、SOD、甘露醇四種抗氧化劑對鈾礦塵所致的巨噬細胞損傷具有一定的保護作用，其中NAC的保護作用最為明顯，，它能使鈾礦塵刺激之后的巨噬細胞吞噬功能顯著增加，降低ROS水平，提高GSH水平，減少IL-8、TNF-α、GM-CSF等細胞因子的分泌。
【關(guān)鍵詞】：鈾礦塵 巨噬細胞 吞噬 氧化損傷
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R135.2
【目錄】：

• 主要英文縮略語索引4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-18
• 1 實驗材料12-13
• 2 實驗方法13-17
• 3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析17-18
• 結(jié)果18-30
• 1 鈾礦塵對人巨噬細胞功能損傷的影響18-23
• 2 抗氧化劑對鈾礦塵致巨噬細胞損傷保護作用23-30
• 討論30-34
• 1. 鈾礦塵對人巨噬細胞功能損傷的影響30-32
• 2. 抗氧化劑對鈾礦塵致巨噬細胞損傷保護作用32-34
• 結(jié)論34-35
• 參考文獻35-40
• 綜述40-46
• 參考文獻44-46
• 已發(fā)表的論文46-47
• 致謝47

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：266814