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外源過氧化氫酶對腸道組織抗氧化能力及腸道菌群的影響

發(fā)布時間:2017-03-25 01:10

  本文關鍵詞:外源過氧化氫酶對腸道組織抗氧化能力及腸道菌群的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:膳食營養(yǎng)不均衡會導致機體氧化還原狀態(tài)失衡,產(chǎn)生過量活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),改變腸道菌群結(jié)構(gòu),誘發(fā)多種慢性疾病。如何緩解膳食誘導的氧化應激,是一亟待研究的問題。本試驗研究外源過氧化氫酶緩解腸道氧化應激,改善腸道菌群結(jié)構(gòu)的能力。研究包括以下兩部分內(nèi)容:(1)外源過氧化氫酶對腸道氧化還原狀態(tài)及菌群的影響。試驗用50只雄性清潔級5周齡昆明種小鼠,均分為5組,分別為正常組(基礎飼料)、高脂組(20%脂肪)高脂日糧添加0.9g/kg、1.2g/kg以及1.5g/kg外源CAT的低劑量組、中劑量組和高劑量組。分別飼喂10周屠宰動物,通過檢測回腸中T-AOC、CAT和T-SOD等氧化還原水平來評價動物腸道氧化還原狀態(tài),測定血清、組織勻漿液中的LPS、IL-6、IFN-γ以及TNF-α,分析過氧化氫酶對炎癥細胞因子水平的影響。采用T-RFLP方法分析腸道菌群狀況。結(jié)果顯示:高脂組小鼠體重顯著高于(P0.05)正常組,過氧化氫酶干預組小鼠體重有所降低,但依然高于正常組。高脂組體脂率明顯高于正常組,過氧化氫酶干預組體脂率下降,各劑量干預組間卻無明顯差別。與正常組相比,高脂組T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均顯著降低。與高脂組比較,過氧化氫酶干預組的T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均比高脂組有所提高。三個干預組之間進行比較,干預2組顯著提高,干預1組次之。腸道菌群檢測結(jié)果表現(xiàn)出較大差異,其中T-RF60出現(xiàn)于高脂組和干預1、2、3組,正常組中未出現(xiàn);T-RF93只在干預組中出現(xiàn);T-RF199只出現(xiàn)在正常組和高脂組中;高脂組中未出現(xiàn)T-RF425、T-RF587。其中T-RF425和T-RF587屬于益生菌,T-RF220對人體不利。說明而外源過氧化氫酶能夠一定程度的改善高脂膳食對腸道菌群產(chǎn)生的不利影響。(2)外源過氧化氫酶對體外腸道菌群的影響。試驗取3名志愿者的新鮮糞便樣品使用磷酸鹽緩沖溶液稀釋離心后,取其上清液并按照4%(v/v)的比例將其接入含有不同劑量過氧化氫酶的GAM培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h和24h后,使用高通量測序的方法對樣品中的細菌群落結(jié)構(gòu)進行了研究。研究發(fā)現(xiàn)添加過氧化氫酶會對微生物群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著的影響,而這種變化是由梭菌屬(Clostridium)、普氏菌屬(Prevotella)、阿里松氏菌屬(Allisonella)、巨型球菌屬(Megamonas)、埃希氏桿菌屬/志賀氏菌屬(Escherichia/Shigella)、柯林斯菌屬(Collinsella)和雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)等7個細菌屬導致的。同時添加過氧化氫酶可以促使埃希氏桿菌屬/志賀氏菌屬(Escherichia/Shigella)、乳酸桿菌屬(Lactobacillus)、乳酸球菌屬(Lactococcus)、阿里松氏菌屬(Allisonella)和巨型球菌屬(Megasphaera)的生長,而抑制腸球菌屬(Enterococcus)和雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)的生長。外源過氧化氫酶添加可以提高高脂膳食小鼠腸道抗氧化能力、減輕其炎癥反應與改善腸道菌群的結(jié)構(gòu)。
【關鍵詞】:外源過氧化氫酶 腸道菌群 高脂膳食 高通量
【學位授予單位】:江南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R151
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-6
  • 主要縮略詞總匯6-9
  • 第一章 緒論9-15
  • 1.1 過氧化氫酶9-11
  • 1.1.1 過氧化氫酶與氧化脅迫9-10
  • 1.1.2 過氧化氫酶應用10-11
  • 1.2 人的腸道菌群11-13
  • 1.2.1 腸道的環(huán)境11-12
  • 1.2.2 結(jié)腸中主要的細菌種類12
  • 1.2.3 飲食對腸道微生物的影響12
  • 1.2.4 能量、肥胖與代謝健康12-13
  • 1.3 研究意義及主要內(nèi)容13-15
  • 第二章 材料與方法15-25
  • 2.1 實驗材料15-16
  • 2.1.1 實驗動物15
  • 2.1.2 實驗主要試劑15
  • 2.1.3 主要實驗設備15
  • 2.1.4 主要溶液的配制15-16
  • 2.2 實驗方法16-25
  • 2.2.1 外源過氧化氫酶對小鼠組織抗氧化能力的影響16-19
  • 2.2.2 不同過氧化氫酶處理的人體來源糞便樣品體外培養(yǎng)物微生物群落結(jié)構(gòu)的研究19-23
  • 2.2.3 數(shù)據(jù)分析23-25
  • 第三章結(jié)果與討論25-47
  • 3.1 外源過氧化氫酶對小鼠組織抗氧化能力的影響25-30
  • 3.1.1 表型及表征25
  • 3.1.2 高脂膳食及過氧化氫酶干預對腸道抗氧化能力的影響25-26
  • 3.1.3 T-RFLP分析10周末五組小鼠的腸道菌群26-27
  • 3.1.4 高脂膳食及過氧化氫酶干預對免疫功能的影響27-30
  • 3.2 不同水平過氧化氫酶對人源糞便微生物群落的影響30-47
  • 3.2.1 序列豐度和多樣性分析30-32
  • 3.2.2 基于門屬水平的不同樣品中細菌群落結(jié)構(gòu)的研究32-39
  • 3.2.3 基于多元統(tǒng)計方法的不同樣品菌群群落結(jié)構(gòu)的比較分析39-43
  • 3.2.4 與群落結(jié)構(gòu)顯著相關微生物的分析43-45
  • 3.2.5 不同細菌屬的定量分析45-47
  • 主要結(jié)論與展望47-49
  • 本文主要結(jié)論47
  • 展望47-49
  • 致謝49-51
  • 參考文獻51-57
  • 附錄: 作者在攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文57

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本文編號:266441

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