本文關(guān)鍵詞：外源過氧化氫酶對腸道組織抗氧化能力及腸道菌群的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：膳食營養(yǎng)不均衡會導(dǎo)致機(jī)體氧化還原狀態(tài)失衡,產(chǎn)生過量活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS),改變腸道菌群結(jié)構(gòu),誘發(fā)多種慢性疾病。如何緩解膳食誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激,是一亟待研究的問題。本試驗(yàn)研究外源過氧化氫酶緩解腸道氧化應(yīng)激,改善腸道菌群結(jié)構(gòu)的能力。研究包括以下兩部分內(nèi)容:(1)外源過氧化氫酶對腸道氧化還原狀態(tài)及菌群的影響。試驗(yàn)用50只雄性清潔級5周齡昆明種小鼠,均分為5組,分別為正常組(基礎(chǔ)飼料)、高脂組(20%脂肪)高脂日糧添加0.9g/kg、1.2g/kg以及1.5g/kg外源CAT的低劑量組、中劑量組和高劑量組。分別飼喂10周屠宰動(dòng)物,通過檢測回腸中T-AOC、CAT和T-SOD等氧化還原水平來評價(jià)動(dòng)物腸道氧化還原狀態(tài),測定血清、組織勻漿液中的LPS、IL-6、IFN-γ以及TNF-α,分析過氧化氫酶對炎癥細(xì)胞因子水平的影響。采用T-RFLP方法分析腸道菌群狀況。結(jié)果顯示:高脂組小鼠體重顯著高于(P0.05)正常組,過氧化氫酶干預(yù)組小鼠體重有所降低,但依然高于正常組。高脂組體脂率明顯高于正常組,過氧化氫酶干預(yù)組體脂率下降,各劑量干預(yù)組間卻無明顯差別。與正常組相比,高脂組T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均顯著降低。與高脂組比較,過氧化氫酶干預(yù)組的T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px水平均比高脂組有所提高。三個(gè)干預(yù)組之間進(jìn)行比較,干預(yù)2組顯著提高,干預(yù)1組次之。腸道菌群檢測結(jié)果表現(xiàn)出較大差異,其中T-RF60出現(xiàn)于高脂組和干預(yù)1、2、3組,正常組中未出現(xiàn);T-RF93只在干預(yù)組中出現(xiàn);T-RF199只出現(xiàn)在正常組和高脂組中;高脂組中未出現(xiàn)T-RF425、T-RF587。其中T-RF425和T-RF587屬于益生菌,T-RF220對人體不利。說明而外源過氧化氫酶能夠一定程度的改善高脂膳食對腸道菌群產(chǎn)生的不利影響。(2)外源過氧化氫酶對體外腸道菌群的影響。試驗(yàn)取3名志愿者的新鮮糞便樣品使用磷酸鹽緩沖溶液稀釋離心后,取其上清液并按照4%(v/v)的比例將其接入含有不同劑量過氧化氫酶的GAM培養(yǎng)基中培養(yǎng)12h和24h后,使用高通量測序的方法對樣品中的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)添加過氧化氫酶會對微生物群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著的影響,而這種變化是由梭菌屬(Clostridium)、普氏菌屬(Prevotella)、阿里松氏菌屬(Allisonella)、巨型球菌屬(Megamonas)、埃希氏桿菌屬/志賀氏菌屬(Escherichia/Shigella)、柯林斯菌屬(Collinsella)和雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)等7個(gè)細(xì)菌屬導(dǎo)致的。同時(shí)添加過氧化氫酶可以促使埃希氏桿菌屬/志賀氏菌屬(Escherichia/Shigella)、乳酸桿菌屬(Lactobacillus)、乳酸球菌屬(Lactococcus)、阿里松氏菌屬(Allisonella)和巨型球菌屬(Megasphaera)的生長,而抑制腸球菌屬(Enterococcus)和雙歧桿菌屬(Bifidobacterium)的生長。外源過氧化氫酶添加可以提高高脂膳食小鼠腸道抗氧化能力、減輕其炎癥反應(yīng)與改善腸道菌群的結(jié)構(gòu)。
【關(guān)鍵詞】：外源過氧化氫酶 腸道菌群 高脂膳食 高通量
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R151
【目錄】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 主要縮略詞總匯6-9
• 第一章 緒論9-15
• 1.1 過氧化氫酶9-11
• 1.1.1 過氧化氫酶與氧化脅迫9-10
• 1.1.2 過氧化氫酶應(yīng)用10-11
• 1.2 人的腸道菌群11-13
• 1.2.1 腸道的環(huán)境11-12
• 1.2.2 結(jié)腸中主要的細(xì)菌種類12
• 1.2.3 飲食對腸道微生物的影響12
• 1.2.4 能量、肥胖與代謝健康12-13
• 1.3 研究意義及主要內(nèi)容13-15
• 第二章 材料與方法15-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)主要試劑15
• 2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備15
• 2.1.4 主要溶液的配制15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-25
• 2.2.1 外源過氧化氫酶對小鼠組織抗氧化能力的影響16-19
• 2.2.2 不同過氧化氫酶處理的人體來源糞便樣品體外培養(yǎng)物微生物群落結(jié)構(gòu)的研究19-23
• 2.2.3 數(shù)據(jù)分析23-25
• 第三章結(jié)果與討論25-47
• 3.1 外源過氧化氫酶對小鼠組織抗氧化能力的影響25-30
• 3.1.1 表型及表征25
• 3.1.2 高脂膳食及過氧化氫酶干預(yù)對腸道抗氧化能力的影響25-26
• 3.1.3 T-RFLP分析10周末五組小鼠的腸道菌群26-27
• 3.1.4 高脂膳食及過氧化氫酶干預(yù)對免疫功能的影響27-30
• 3.2 不同水平過氧化氫酶對人源糞便微生物群落的影響30-47
• 3.2.1 序列豐度和多樣性分析30-32
• 3.2.2 基于門屬水平的不同樣品中細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的研究32-39
• 3.2.3 基于多元統(tǒng)計(jì)方法的不同樣品菌群群落結(jié)構(gòu)的比較分析39-43
• 3.2.4 與群落結(jié)構(gòu)顯著相關(guān)微生物的分析43-45
• 3.2.5 不同細(xì)菌屬的定量分析45-47
• 主要結(jié)論與展望47-49
• 本文主要結(jié)論47
• 展望47-49
• 致謝49-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 附錄: 作者在攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文57

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