【摘要】：目的鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)是廣泛存在于日常生活中的塑化劑,被認(rèn)為是一種能對胰島β細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。本研究旨在分析DEHP對胰島MIN6細(xì)胞增殖與周期的影響,進(jìn)一步闡明DEHP對胰島MIN6細(xì)胞的毒性作用。方法采用小鼠胰島MIN 6細(xì)胞為研究對象,分別用25,50,100μM的DEHP及溶劑對照組(DMSO,0.1%)干預(yù)MIN 6細(xì)胞48小時。通過3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT)法檢測DEHP對MIN6細(xì)胞存活率的影響,酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測DEHP對MIN6細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素分泌(GSIS)的影響,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測DEHP對MIN6細(xì)胞周期的影響,水溶性四唑鹽(WST-1)法檢測DEHP對MIN6細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響,硫代巴比妥酸(TBA)法檢測DEHP對MIN6細(xì)胞內(nèi)MDA含量的影響,蛋白免疫印跡(WB)法檢測DEHP對MIN 6細(xì)胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4(CDK4)表達(dá)的影響。結(jié)果1.MTT結(jié)果顯示:25μM,50μM,100μM的DEHP抑制MIN6細(xì)胞的存活率(P0.05)。2.GSIS結(jié)果顯示:在基礎(chǔ)葡萄糖刺激下,DEHP不影響MIN6細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素的分泌;在高糖刺激下,50μM,100μM的DEHP抑制MIN6細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素的分泌(P0.01)。3.SOD活性結(jié)果顯示:100μM的DEHP抑制MIN6細(xì)胞內(nèi)SOD活性(P0.01)。4.MDA含量結(jié)果顯示:50μM,100μM的DEHP增加MIN6細(xì)胞內(nèi)MDA含量(P0.001)。5.細(xì)胞周期結(jié)果顯示:25μM,50μM,100μM的DEHP增加MIN6細(xì)胞G0/G1期細(xì)胞的百分比(P0.01),降低S期和G2/M期細(xì)胞的百分比(P0.05)。6.WB結(jié)果顯示:25μM,50μM,100μM的DEHP降低MIN6細(xì)胞中Cyclin D1和CDK4的表達(dá)(P0.05)。結(jié)論1.DEHP能抑制胰島MIN6細(xì)胞存活率及GSIS,誘導(dǎo)MIN6細(xì)胞周期阻滯,下調(diào)Cyclin D1和CDK4的表達(dá),其機(jī)制可能與氧化應(yīng)激有關(guān)。2.DEHP通過抑制MIN6細(xì)胞內(nèi)SOD的活性,增加MIN6細(xì)胞內(nèi)MDA的產(chǎn)生,進(jìn)而引起氧化應(yīng)激。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R114

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 趙紫婷;鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）對MIN6β細(xì)胞的毒性作用及維生素C、E干預(yù)效果研究[D];蘭州大學(xué);2016年

2 王正;鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）與2型糖尿病相關(guān)性研究[D];蘭州大學(xué);2015年

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本文編號：2656341