【摘要】：多壁碳納米管(Mullti-walled carbon nanotube,MWCNT)是1991年被發(fā)現(xiàn)的新型碳結(jié)構(gòu),因其具有多項優(yōu)越的理化特性而被廣泛應(yīng)用�，F(xiàn)有研究結(jié)果表明MWCNT具有較強(qiáng)的生物毒性,對不同細(xì)胞具有細(xì)胞毒作用,但也有報道MWCNT具有非常低甚至沒有細(xì)胞毒作用。體內(nèi)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)MWCNT可以導(dǎo)致大鼠肺部炎癥、肉芽腫、肺纖維化、間皮瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷,但也有報道MWCNT的長期染毒不導(dǎo)致大鼠腫瘤形成�？傊�,MWCNT的生物毒性并不完全明確而且存在爭議。而對MWCNT生物毒性及機(jī)制研究有助于早期發(fā)現(xiàn)和早期干預(yù)其毒作用損傷,有助于保護(hù)越來越多的生產(chǎn)和使用MWCNT及其制品的人群健康�；谏锵到y(tǒng)的高度復(fù)雜性,需要有革新性的信息量豐富的方法來完成這個目標(biāo)。蛋白質(zhì)組學(xué)可以在整體水平上研究蛋白質(zhì)的組成與調(diào)控的活動規(guī)律,揭示一些未知或未預(yù)期的關(guān)聯(lián)。因此,本項目以人肺腺癌細(xì)胞(A549)為研究對象,首先檢測了MWCNT對A549的細(xì)胞毒性和遺傳毒性,并運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析MWCNT對A549細(xì)胞蛋白質(zhì)表達(dá)譜的影響,探討MWCNT對A549細(xì)胞的毒作用效應(yīng)及其可能機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)MWCNT對A549具有明顯的時間和劑量依賴性的細(xì)胞毒損傷,但是在染毒30μg/ml及24h范圍內(nèi)沒有對細(xì)胞增殖產(chǎn)生影響,沒有顯著細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡；也沒有檢測γH2AX焦點增多,細(xì)胞無明顯彗星拖尾等DNA損傷現(xiàn)象。而在該處理條件下仍能檢測顯著的蛋白質(zhì)表達(dá)譜改變,雙向電泳共篩選出106個差異表達(dá)蛋白質(zhì)。質(zhì)譜鑒定了52個差異表達(dá)蛋白質(zhì),上調(diào)29個、下調(diào)23個。蛋白質(zhì)功能涉及細(xì)胞增殖、凋亡、細(xì)胞代謝及骨架調(diào)節(jié)等。Western blot和免疫熒光驗證了14-3-3ε、Actin和Hsp27蛋白表達(dá)改變,結(jié)果與雙向電泳一致。其中MWCNT引起A549細(xì)胞的骨架蛋白Actin表達(dá)量升高,進(jìn)而影響細(xì)胞遷移能力,而ROS及Ca2+可能參與了這一過程。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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1 沈臻霖;聶海瑜;王海芳;楊彬;鐘麗君;鄒霞娟;婁雅欣;劉丹;郭健;賈光;;表面不同修飾的兩種多壁碳納米管引起RAW264.7細(xì)胞蛋白質(zhì)差異表達(dá)[J];北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年03期

2 馬佳;張慶;陳昌杰;楊清玲;陳素蓮;;線粒體DNA缺失對人淋巴瘤Namalwa細(xì)胞生長和侵襲能力的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2013年02期

3 汪冰,豐偉悅,趙宇亮,邢更妹,柴之芳,王海芳,賈光;納米材料生物效應(yīng)及其毒理學(xué)研究進(jìn)展[J];中國科學(xué)(B輯 化學(xué));2005年01期

4 孫靜;;碳納米管及其研究進(jìn)展[J];世界科學(xué);2006年05期

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本文編號：2582161