【摘要】：目的通過(guò)對(duì)氟化鈉染毒大鼠的炎癥反應(yīng)相關(guān)因子及關(guān)鍵信號(hào)通路分子的檢測(cè),探討其對(duì)大鼠子宮組織細(xì)胞氧化損傷的作用機(jī)制。方法將30只雌性SD成年大鼠分為3組(10只/組),分別給予蒸餾水(對(duì)照組)、100 mg/L氟化鈉溶液(100 mg/L氟化鈉處理組)、200 mg/L氟化鈉溶液(200 mg/L氟化鈉處理組)飲用,持續(xù)染毒180 d,建立氟化鈉染毒動(dòng)物模型。采用Western blot、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)子宮組織炎癥相關(guān)因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達(dá);采用ELISA對(duì)氧化應(yīng)激相關(guān)分子ROS、MDA、SOD、CAT、GSH進(jìn)行檢測(cè);采用Western blot測(cè)定P38、ERK、JNK、PI3K活性物質(zhì)的表達(dá)。結(jié)果 2個(gè)氟化鈉處理組大鼠子宮組織炎癥相關(guān)因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P0.05);2個(gè)氟化鈉處理組ROS、SOD、CAT、GSH明顯高于對(duì)照組,而MDA明顯低于對(duì)照組(P0.05);與對(duì)照組相比,2個(gè)氟化鈉處理組P38、JNK蛋白磷酸化效率增加(P0.05),而且ERK、PI3K總蛋白及磷酸化蛋白表達(dá)水平均有增加。結(jié)論氟化鈉可誘導(dǎo)大鼠子宮組織的氧化應(yīng)激,促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生,MAPK(ERK、JNK、P38)和PI3K信號(hào)通路可能參與其中。
【圖文】：

MDA、SOD、CAT、GSH水平為探索氧化應(yīng)激是否參與了氟化鈉所導(dǎo)致的大鼠子宮組織炎癥反應(yīng)，我們對(duì)氧化損傷指標(biāo)ＲOS、MDA和抗氧化損傷指標(biāo)SOD、CAT、GSH進(jìn)行了檢測(cè)。大鼠子宮組織處理方法同1．3所述，上清液送上海研輝生物科技有限公司用ELISA檢測(cè)ＲOS、MDA、SOD、CAT、GSH水平。1．7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，行單因素方差分析，統(tǒng)計(jì)圖利用GraphPadPrism5．0軟件繪制。2結(jié)果2．1模型驗(yàn)證動(dòng)物血清及子宮組織中的氟離子濃度測(cè)定結(jié)果顯示，氟化鈉處理組氟離子濃度明顯高于對(duì)照組(P＜0.05，圖1)，表明模型建立成功。2．2氟化鈉處理導(dǎo)致大鼠子宮組織發(fā)生炎癥反應(yīng)100mg/L、200mg/L氟化鈉處理組大鼠子宮組織炎癥相關(guān)因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達(dá)水平均明顯高于對(duì)照組(P＜0．05，圖2)。進(jìn)一步用免疫組化檢測(cè)Cox-2、ICAM-1的表達(dá)及分布，結(jié)果發(fā)現(xiàn)氟化鈉處理組Cox-2、ICAM-1廣泛表達(dá)于子宮基質(zhì)中，而對(duì)照組未見(jiàn)明顯陽(yáng)性表達(dá)(圖3)。1:對(duì)照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組圖1離子選擇電極法測(cè)定血清(A)和子宮(B)中的氟離子濃度1:對(duì)照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組A、B:Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β蛋白Westernblot檢測(cè)結(jié)果;C:半定量分析結(jié)果a:P＜0．05，與對(duì)照組比較圖2Westernblot檢測(cè)大鼠子宮組織炎癥相關(guān)因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β的表達(dá)1746第37卷第17期2015年9月15日第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015

2．3氟化鈉處理引起大鼠子宮組織氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡與對(duì)照組相比，氟化鈉處理導(dǎo)致大鼠子宮組織ＲOS及抗氧化酶類SOD、CAT、GSH明顯增高(圖4A～D，P＜0．05)。進(jìn)一步對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA的水平進(jìn)行了檢測(cè)，與對(duì)照組相比，，100mg/L氟化鈉處理組與200mg/L氟化鈉處理組MDA水平都明顯降低(P＜0.05，圖4E)。結(jié)果證實(shí)，氟化鈉處理導(dǎo)致大鼠子宮組織產(chǎn)生大量過(guò)氧化物，同時(shí)，也激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生大量的抗氧化物質(zhì)，打破了機(jī)體氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡。ge:腺上皮;le:腔上皮;sc:基質(zhì)細(xì)胞↑:示棕色為陽(yáng)性表達(dá)圖3免疫組化檢測(cè)Cox-2、ICAM-1在子宮組織的表達(dá)及分布(S-P)A:ＲOS;B:SOD;C:CAT;D:GSH;E:MDA1:對(duì)照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組圖4ELISA檢測(cè)各組子宮組織氧化應(yīng)激指標(biāo)變化1747第37卷第17期2015年9月15日第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院生殖生物學(xué)研究室;
【基金】：重慶市地質(zhì)礦產(chǎn)勘探開(kāi)發(fā)局項(xiàng)目(渝地勘科字[2010]第2號(hào)) 國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(30973195)~~
【分類號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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1 黃志斐;張U

本文編號(hào)：2547360