【摘要】：目的通過對氟化鈉染毒大鼠的炎癥反應相關因子及關鍵信號通路分子的檢測,探討其對大鼠子宮組織細胞氧化損傷的作用機制。方法將30只雌性SD成年大鼠分為3組(10只/組),分別給予蒸餾水(對照組)、100 mg/L氟化鈉溶液(100 mg/L氟化鈉處理組)、200 mg/L氟化鈉溶液(200 mg/L氟化鈉處理組)飲用,持續(xù)染毒180 d,建立氟化鈉染毒動物模型。采用Western blot、免疫組織化學法檢測子宮組織炎癥相關因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達;采用ELISA對氧化應激相關分子ROS、MDA、SOD、CAT、GSH進行檢測;采用Western blot測定P38、ERK、JNK、PI3K活性物質的表達。結果 2個氟化鈉處理組大鼠子宮組織炎癥相關因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達量明顯高于對照組(P0.05);2個氟化鈉處理組ROS、SOD、CAT、GSH明顯高于對照組,而MDA明顯低于對照組(P0.05);與對照組相比,2個氟化鈉處理組P38、JNK蛋白磷酸化效率增加(P0.05),而且ERK、PI3K總蛋白及磷酸化蛋白表達水平均有增加。結論氟化鈉可誘導大鼠子宮組織的氧化應激,促進炎癥反應發(fā)生,MAPK(ERK、JNK、P38)和PI3K信號通路可能參與其中。
【圖文】：

MDA、SOD、CAT、GSH水平為探索氧化應激是否參與了氟化鈉所導致的大鼠子宮組織炎癥反應，我們對氧化損傷指標ＲOS、MDA和抗氧化損傷指標SOD、CAT、GSH進行了檢測。大鼠子宮組織處理方法同1．3所述，上清液送上海研輝生物科技有限公司用ELISA檢測ＲOS、MDA、SOD、CAT、GSH水平。1．7統(tǒng)計學分析采用SPSS17．0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，行單因素方差分析，統(tǒng)計圖利用GraphPadPrism5．0軟件繪制。2結果2．1模型驗證動物血清及子宮組織中的氟離子濃度測定結果顯示，氟化鈉處理組氟離子濃度明顯高于對照組(P＜0.05，圖1)，表明模型建立成功。2．2氟化鈉處理導致大鼠子宮組織發(fā)生炎癥反應100mg/L、200mg/L氟化鈉處理組大鼠子宮組織炎癥相關因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β表達水平均明顯高于對照組(P＜0．05，圖2)。進一步用免疫組化檢測Cox-2、ICAM-1的表達及分布，結果發(fā)現氟化鈉處理組Cox-2、ICAM-1廣泛表達于子宮基質中，而對照組未見明顯陽性表達(圖3)。1:對照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組圖1離子選擇電極法測定血清(A)和子宮(B)中的氟離子濃度1:對照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組A、B:Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β蛋白Westernblot檢測結果;C:半定量分析結果a:P＜0．05，與對照組比較圖2Westernblot檢測大鼠子宮組織炎癥相關因子Cox-2、ICAM-1、TNF-α、IL-1β的表達1746第37卷第17期2015年9月15日第三軍醫(yī)大學學報JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015

2．3氟化鈉處理引起大鼠子宮組織氧化-抗氧化系統(tǒng)失衡與對照組相比，氟化鈉處理導致大鼠子宮組織ＲOS及抗氧化酶類SOD、CAT、GSH明顯增高(圖4A～D，P＜0．05)。進一步對脂質過氧化物MDA的水平進行了檢測，與對照組相比，，100mg/L氟化鈉處理組與200mg/L氟化鈉處理組MDA水平都明顯降低(P＜0.05，圖4E)。結果證實，氟化鈉處理導致大鼠子宮組織產生大量過氧化物，同時，也激發(fā)機體產生大量的抗氧化物質，打破了機體氧化系統(tǒng)與抗氧化系統(tǒng)之間的平衡。ge:腺上皮;le:腔上皮;sc:基質細胞↑:示棕色為陽性表達圖3免疫組化檢測Cox-2、ICAM-1在子宮組織的表達及分布(S-P)A:ＲOS;B:SOD;C:CAT;D:GSH;E:MDA1:對照組;2:100mg/L氟化鈉處理組;3:200mg/L氟化鈉處理組圖4ELISA檢測各組子宮組織氧化應激指標變化1747第37卷第17期2015年9月15日第三軍醫(yī)大學學報JThirdMilMedUnivVol．37，No．17Sep．152015
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學公共衛(wèi)生與管理學院生殖生物學研究室;
【基金】：重慶市地質礦產勘探開發(fā)局項目(渝地勘科字[2010]第2號) 國家自然科學基金面上項目(30973195)~~
【分類號】：R114

【參考文獻】

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1 黃志斐;張U

本文編號：2547360