【摘要】：8-羥基脫氧鳥苷是氧化應(yīng)激過程中，羥自由基攻擊DNA形成的一種DNA氧化損傷產(chǎn)物，可誘導(dǎo)突變、堿基錯(cuò)配等。研究發(fā)現(xiàn)它與機(jī)體的衰老、癌癥的發(fā)生和環(huán)境污染物等有一定的相關(guān)性，是目前國(guó)際公認(rèn)的DNA氧化損傷生物標(biāo)志物。建立簡(jiǎn)便、靈敏、選擇性好的8-OHdG定量檢測(cè)方法，對(duì)研究癌癥發(fā)生、衰老機(jī)制等具有重要意義。 第二章，建立了一種靈敏度高、特異性強(qiáng)、成本低的比色傳感法。本法以未修飾的金納米粒子為指示探針，未修飾的核酸適體為特異性識(shí)別分子，檢測(cè)人體尿液中8-OHdG。在8-OHdG存在的情況下，Apt構(gòu)象發(fā)生變化，由不規(guī)則螺旋結(jié)構(gòu)形成G-四分體結(jié)構(gòu)，致使體系顏色發(fā)生改變，，并且與8-OHdG濃度在5.60×10~(-9)~2.82×10~(-7)mol·L~(-1)范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢出限為1.68×10~(-9)mol·L~(-1)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.12%~4.19%(n=6)，加標(biāo)回收率在95.9%~104.9%之間。新建方法無需任何儀器，可對(duì)樣品直接目測(cè)分析。 第三章，建立了一種基于金納米粒子的共振光散射法檢測(cè)尿中8-OHdG的方法。在高鹽溶液中8-OHdG與Apt結(jié)合后，金納米粒子共振光散射強(qiáng)度增加，并且8-OHdG濃度在9.08×10~(-11)~1.41×10~(-8)mol·L~(-1)范圍內(nèi)，與溶液共振光散射強(qiáng)度之間存在良好的線性關(guān)系，線性回歸方程為ΔIRLS=10.7+12.7c (×10~(-9)mol·L~(-1))，檢出限為2.73×10~(-11)mol·L~(-1)，本方法精密度較好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.63%~3.46%(n=6)之間，已用于實(shí)際樣品檢測(cè)，結(jié)果滿意。 第四章，建立了一種金納米粒子分光光度法測(cè)定尿8-羥基脫氧鳥苷的方法，在pH為3.5的BR緩沖溶液中，8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)與金納米粒子作用，導(dǎo)致溶液吸光度比值改變，且在4.98×10~(-7)mol·L~(-1)~1.27×10~(-5)mol·L~(-1)范圍內(nèi)，吸光度值改變與8-OHdG的濃度呈良好的線性關(guān)系，其回歸方程為：Δ(A_(630)/A_(520))= 0.00713+0.0812c(×10~(-6)mol·L~(-1))，相關(guān)系數(shù)r=0.9984，檢出限為1.50×10~(-7)mol·L~(-1)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在1.48%~3.57%。用于尿中8-OHdG的測(cè)定，回收率在96.1%~98.0%。該方法簡(jiǎn)單、快速、成本低。
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R115

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2545201