【摘要】：目的:研究丙烯酰胺(acrylamide,AA)對體外培養(yǎng)的睪丸間質(zhì)細胞R2C生長及孕酮合成功能的影響。方法:用濃度為0.25、0.5、0.75、1、2、4、6 mmol/L的AA作用于R2C細胞24 h,四甲基偶氮唑藍(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法獲得IC25、IC50及IC75的AA作用濃度。用以上3種濃度的AA處理R2C細胞24 h,觀察細胞形態(tài)。AA作用于R2C細胞4 h后,通過彗星實驗(Comet assay)檢測細胞DNA的損傷程度;放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)測定AA處理R2C細胞4 h和24 h后的孕酮合成量。結(jié)果:AA能抑制R2C細胞活性,其IC25、IC50、IC75分別為1.140、1.925、3.250 mmol/L;3種濃度的AA能不同程度地影響R2C細胞生長形態(tài);作用4 h對R2C細胞DNA有損傷作用;各濃度組作用24 h后均能降低R2C細胞的孕酮合成量。結(jié)論:AA能影響R2C細胞增殖及孕酮合成能力。
【圖文】：

※營養(yǎng)衛(wèi)生食品科學(xué)2015,Vol.36,No.1724900%/2040608010012345AA/mmol/L6圖1不同濃度AA對R2C細胞的生長抑制率Fig.1InhibitoryratiosofAAonthegrowthofR2Ccellsabcda.對照組；b～d.AA作用濃度分別為1.140、1.925、3.250mmol/L（IC25、IC50、IC75）。圖2不同濃度AA作用24h后的R2C細胞形態(tài)（×400）Fig.2MorphologicalchangesofR2CcellsafterbeingexposedtovariousconcentrationsofAAfor24h(×400)由圖2可知，濃度分別為1.140、1.925、3.250mmol/L（IC25、IC50、IC75）的AA作用24h后，R2C細胞變小，形狀由不規(guī)則多邊形變?yōu)闄E圓形，細胞數(shù)目減少且貼壁能力降低，且AA對R2C細胞生長的抑制作用呈現(xiàn)劑量依賴性。2.2AA對R2C細胞DNA損傷的作用NAD%/1.140***02040601.925AA/mmol/L3.250*.與對照組相比，差異顯著（P＜0.05）；**.與對照組相比，差異極顯著（P＜0.01）。下同。圖3不同濃度AA刺激4h后R2C細胞的尾部DNA含量Fig.3TailDNAcontentinR2CcellsafterbeingexposedtoAAfor4h由圖3～5可知，與對照組相比，不同濃度的AA作用于R2C細胞4h后，細胞拖尾現(xiàn)象顯著增加。R2C細胞的尾部DNA含量、尾長及Olive尾距（Olivetailmoment，OTM）均隨AA濃度增加而增大，尤其當(dāng)AA濃度為1.925、3.250mmol/L（IC50、IC75）時，其尾部DNA含量、尾長和OTM分別增加了1166.6%、1776.7%，106.4%、295.7%和329.3%、476.9%，結(jié)果較對照組具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01），表明AA可以誘導(dǎo)R2C細胞產(chǎn)生DNA損傷。μm/1.140***01020301.925AA/mmol/L3.250圖4不同濃度AA刺激4h后R2C細胞的尾長Fig.4TaillengthofR2CcellsafterbeingexposedtoAAfor4hliveO
【作者單位】： 暨南大學(xué)理工學(xué)院食品科學(xué)與工程系生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;廣東工業(yè)大學(xué)輕工化工學(xué)院;
【基金】：廣東省高等學(xué)校優(yōu)秀青年教師培養(yǎng)計劃項目(Yq2013024) 教育部“新世紀(jì)優(yōu)秀人才支持計劃”項目 國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項目(31201402;31201340)
【分類號】：R114

【參考文獻】

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本文編號：2544966