【摘要】：將單增李斯特菌的內(nèi)化素A(InlA)基因片段進(jìn)行密碼子優(yōu)化后,合成基因并插入到質(zhì)粒載體pET28a中,構(gòu)建原核表達(dá)重組質(zhì)粒。經(jīng)過(guò)乳糖自誘導(dǎo)表達(dá)后,獲得了大小為48 kD的重組蛋白。用Ni親和層析方法純化重組表達(dá)后的InlA蛋白片段。用該蛋白免疫BALB/C小鼠,篩選高效的InlA單克隆抗體細(xì)胞株,并制備單克隆抗體,共篩選出3株親和力較高的單克隆抗體,篩選得到的InlA單克隆抗體經(jīng)過(guò)Protein G親和層析純化。研制雙抗夾心法膠體金免疫層析試紙條,并對(duì)其敏感性、特異性等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。該試紙條靈敏度達(dá)到1×10~6CFU/m L,用實(shí)際樣本加標(biāo)后,對(duì)該膠體金試紙條進(jìn)行驗(yàn)證,并用國(guó)標(biāo)方法做了對(duì)比。結(jié)果表明,該試紙條能滿足樣本中單增李斯特菌的檢測(cè)要求。
【作者單位】： 北京市糧油食品檢驗(yàn)所;北京華安麥科生物技術(shù)有限公司;
【基金】：北京市科委“即食食品中致病菌檢測(cè)及快速檢測(cè)技術(shù)研究與產(chǎn)品開(kāi)發(fā)”項(xiàng)目(Z14110500260000)
【分類(lèi)號(hào)】：R155.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張春琳;張家國(guó);;單增李斯特菌增殖的影響因素研究[J];食品研究與開(kāi)發(fā);2011年07期

2 周小紅;李學(xué)英;楊憲時(shí);遲海;;培養(yǎng)條件對(duì)單增李斯特菌生長(zhǎng)的影響[J];食品工業(yè)科技;2013年15期

3 王海艷;劉中學(xué);劉虹;趙林立;甄宏太;;食品中單增李斯特菌快速、敏感、特異PCR檢測(cè)方法的建立[J];檢驗(yàn)檢疫科學(xué);2006年01期

4 劉仲敏;鄭鳴;王永芬;;食源性單增李斯特菌的實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2007年05期

5 金周浩;宋達(dá)峰;顧青;;一種快速鑒定單增李斯特菌的方法[J];食品科學(xué);2008年03期

6 隋建新;林洪;曹立民;王靜雪;王光輝;;單增李斯特菌(Listeria monocytogens)雞卵黃抗體的制備及其抑菌活性研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2009年02期

7 陳鋼;賴衛(wèi)華;段霞;;單增李斯特菌鞭毛蛋白提取方法的研究[J];食品科學(xué);2009年23期

8 張耀祺;王彬;師寶忠;閆鶴;石磊;;河北省2005年～2007年生肉源單增李斯特菌的血清型及脈沖場(chǎng)凝膠電泳分析[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2010年07期

9 易海華;祝長(zhǎng)青;宋陽(yáng)威;孫慧宇;房超;王云飛;徐波;吳萍蘭;徐政;徐繼承;趙金偉;;食品中單增李斯特菌環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)技術(shù)[J];食品科學(xué);2011年04期

10 蔣亞男;滿朝新;趙鳳;劉穎;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增方法快速檢測(cè)乳中單增李斯特菌[J];中國(guó)乳品工業(yè);2011年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 龍軼;周小明;邢達(dá);;基于磁珠分離和超分支滾環(huán)擴(kuò)增的單增李斯特菌電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)[A];第七屆全國(guó)光生物學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2010年

2 丁建英;韓劍眾;;食品中單增李斯特菌的存在現(xiàn)狀及檢測(cè)方法研究進(jìn)展[A];中國(guó)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會(huì)第五屆年會(huì)暨第四屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2007年

3 張耀祺;石磊;;分離自生肉的單增李斯特菌的血清型及脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型研究[A];“亞運(yùn)食品安全與廣東食品產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展”學(xué)術(shù)研討會(huì)暨2009年廣東省食品學(xué)會(huì)年會(huì)論文集[C];2009年

4 陳慧燕;;單增李斯特菌室間比對(duì)活動(dòng)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果評(píng)價(jià)[A];2009年衛(wèi)生檢驗(yàn)新技術(shù)學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)刊[C];2009年

5 陳健舜;方維煥;;食品中單增李斯特菌的分子流行病學(xué)特征與致病力研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2009學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下冊(cè)）[C];2009年

6 鄭華英;江元山;呂均;熊燕;龍一兵;曾瑩春;;單增李斯特菌食品分離株多重PCR鑒定分型[A];2008年中國(guó)微生物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2008年

7 何冬梅;王洪敏;柯昌文;鄧小玲;楊杏芬;賴蔚傮;柯碧霞;李柏生;譚海玲;;單增李斯特菌檢測(cè)基因芯片的研制與評(píng)價(jià)[A];2011廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2011年

8 斯國(guó)靜;俞驊;劉濤;胡俊;;單核細(xì)胞增生李斯特菌在市售食品中污染現(xiàn)狀分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)病毒學(xué)分會(huì)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 郭明星;朱堂明;陳晨;趙暉;王振華;陳建軍;徐新生;;湖北省水產(chǎn)品中單增李斯特菌基因分型研究[A];第二屆全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

10 程超男;張笑言;彭媛;白家磊;劉原媛;寧保安;高志賢;;基于3-巰基丙酸修飾金電極構(gòu)建電化學(xué)免疫傳感器檢測(cè)牛奶中的單增李斯特菌[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第三十三屆學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 ;重視單增李斯特菌風(fēng)險(xiǎn)防范[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2014年

2 張啟華邋姜文輝;煙臺(tái)首次從進(jìn)口水產(chǎn)品中檢出單增李斯特菌[N];中國(guó)國(guó)門(mén)時(shí)報(bào);2007年

3 記者　 胡其峰;進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

4 黃全權(quán);進(jìn)口日本食品連出問(wèn)題,質(zhì)檢交涉[N];新華每日電訊;2006年

5 夏文俊;進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題[N];中國(guó)質(zhì)量報(bào);2006年

6 呂壯;日本輸華食品頻現(xiàn)安全問(wèn)題[N];中華工商時(shí)報(bào);2006年

7 高亞蘭;小心：進(jìn)口日本食品頻現(xiàn)質(zhì)量問(wèn)題[N];國(guó)際商報(bào);2006年

8 記者　黃全權(quán);進(jìn)口日本食品連續(xù)出現(xiàn)問(wèn)題[N];人民日?qǐng)?bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 方春;單核細(xì)胞增生李斯特菌譜系Ⅲ強(qiáng)毒株與弱毒菌株比較基因組及致病力差異機(jī)制[D];浙江大學(xué);2015年

2 亢春雨;食源性單核增生性李斯特氏菌的分布、遺傳多態(tài)性及其毒理機(jī)制研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 張一敏;三種有機(jī)酸對(duì)單增李斯特菌誘導(dǎo)性耐酸響應(yīng)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 李長(zhǎng)城;三文魚(yú)魚(yú)籽中單增李斯特菌預(yù)測(cè)模型建立及控制研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

5 夏葉;單核細(xì)胞增生李斯特菌：應(yīng)激轉(zhuǎn)錄組學(xué)與RsbX對(duì)SigB表達(dá)和細(xì)菌存活的調(diào)控[D];浙江大學(xué);2015年

6 郗遠(yuǎn);植物提取物對(duì)單增李斯特菌的抑制作用及乳化香腸的品質(zhì)影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 王建鋒;抗單核細(xì)胞增多性李斯特菌溶血素化合物的發(fā)現(xiàn)及作用機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2015年

8 隋建新;單增李斯特菌雞卵黃抗體的抑菌性能及其機(jī)理研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

9 田靜;熟肉制品中單增李斯特菌的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及風(fēng)險(xiǎn)管理措施的研究[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2010年

10 張輝;單增李斯特菌ActA的表達(dá)、免疫原性及膠體金試紙研制[D];吉林大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮曉慧;單增李斯特菌在肉牛屠宰過(guò)程中的流行特點(diǎn)及其熱失活模型的建立[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 于旖斯;食品中單增李斯特菌的分離、鑒定及抑制研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2010年

3 趙一鳴;三種分型技術(shù)對(duì)食源性單增李斯特菌分型研究[D];華南理工大學(xué);2015年

4 萬(wàn)松華;食品中污染微生物通用型熒光PCR檢測(cè)方法研究[D];華南理工大學(xué);2015年

5 周陽(yáng);食品中單增李斯特菌快速檢測(cè)方法的建立與應(yīng)用[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 王昊宇;食品中單增李斯特菌的分離鑒定及PCR快速檢測(cè)方法的研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2013年

7 周旋;姜黃素抑制單增李斯特菌溶血素活性的分子機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

8 張星星;漆黃素對(duì)單增李斯特菌感染妊娠小鼠流產(chǎn)的保護(hù)作用[D];吉林大學(xué);2016年

9 解新方;單增李斯特菌表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)技術(shù)研究[D];天津科技大學(xué);2015年

10 李云霞;納米磁珠對(duì)單增李斯特菌低場(chǎng)磁共振檢測(cè)的影響研究[D];上海師范大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：2534692