【摘要】：將單增李斯特菌的內(nèi)化素A(InlA)基因片段進行密碼子優(yōu)化后,合成基因并插入到質(zhì)粒載體pET28a中,構(gòu)建原核表達重組質(zhì)粒。經(jīng)過乳糖自誘導(dǎo)表達后,獲得了大小為48 kD的重組蛋白。用Ni親和層析方法純化重組表達后的InlA蛋白片段。用該蛋白免疫BALB/C小鼠,篩選高效的InlA單克隆抗體細胞株,并制備單克隆抗體,共篩選出3株親和力較高的單克隆抗體,篩選得到的InlA單克隆抗體經(jīng)過Protein G親和層析純化。研制雙抗夾心法膠體金免疫層析試紙條,并對其敏感性、特異性等指標進行評價。該試紙條靈敏度達到1×10~6CFU/m L,用實際樣本加標后,對該膠體金試紙條進行驗證,并用國標方法做了對比。結(jié)果表明,該試紙條能滿足樣本中單增李斯特菌的檢測要求。
【作者單位】： 北京市糧油食品檢驗所;北京華安麥科生物技術(shù)有限公司;
【基金】：北京市科委“即食食品中致病菌檢測及快速檢測技術(shù)研究與產(chǎn)品開發(fā)”項目(Z14110500260000)
【分類號】：R155.5

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張春琳;張家國;;單增李斯特菌增殖的影響因素研究[J];食品研究與開發(fā);2011年07期

2 周小紅;李學(xué)英;楊憲時;遲海;;培養(yǎng)條件對單增李斯特菌生長的影響[J];食品工業(yè)科技;2013年15期

3 王海艷;劉中學(xué);劉虹;趙林立;甄宏太;;食品中單增李斯特菌快速、敏感、特異PCR檢測方法的建立[J];檢驗檢疫科學(xué);2006年01期

4 劉仲敏;鄭鳴;王永芬;;食源性單增李斯特菌的實時定量PCR檢測[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2007年05期

5 金周浩;宋達峰;顧青;;一種快速鑒定單增李斯特菌的方法[J];食品科學(xué);2008年03期

6 隋建新;林洪;曹立民;王靜雪;王光輝;;單增李斯特菌(Listeria monocytogens)雞卵黃抗體的制備及其抑菌活性研究[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2009年02期

7 陳鋼;賴衛(wèi)華;段霞;;單增李斯特菌鞭毛蛋白提取方法的研究[J];食品科學(xué);2009年23期

8 張耀祺;王彬;師寶忠;閆鶴;石磊;;河北省2005年～2007年生肉源單增李斯特菌的血清型及脈沖場凝膠電泳分析[J];食品與發(fā)酵工業(yè);2010年07期

9 易海華;祝長青;宋陽威;孫慧宇;房超;王云飛;徐波;吳萍蘭;徐政;徐繼承;趙金偉;;食品中單增李斯特菌環(huán)介導(dǎo)等溫擴增檢測技術(shù)[J];食品科學(xué);2011年04期

10 蔣亞男;滿朝新;趙鳳;劉穎;薛玉清;胡惠秩;李博;姜毓君;;環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增方法快速檢測乳中單增李斯特菌[J];中國乳品工業(yè);2011年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 龍軼;周小明;邢達;;基于磁珠分離和超分支滾環(huán)擴增的單增李斯特菌電化學(xué)發(fā)光檢測[A];第七屆全國光生物學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2010年

2 丁建英;韓劍眾;;食品中單增李斯特菌的存在現(xiàn)狀及檢測方法研究進展[A];中國食品科學(xué)技術(shù)學(xué)會第五屆年會暨第四屆東西方食品業(yè)高層論壇論文摘要集[C];2007年

3 張耀祺;石磊;;分離自生肉的單增李斯特菌的血清型及脈沖場凝膠電泳分型研究[A];“亞運食品安全與廣東食品產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新發(fā)展”學(xué)術(shù)研討會暨2009年廣東省食品學(xué)會年會論文集[C];2009年

4 陳慧燕;;單增李斯特菌室間比對活動實驗室結(jié)果評價[A];2009年衛(wèi)生檢驗新技術(shù)學(xué)術(shù)研討會會刊[C];2009年

5 陳健舜;方維煥;;食品中單增李斯特菌的分子流行病學(xué)特征與致病力研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集（下冊）[C];2009年

6 鄭華英;江元山;呂均;熊燕;龍一兵;曾瑩春;;單增李斯特菌食品分離株多重PCR鑒定分型[A];2008年中國微生物學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2008年

7 何冬梅;王洪敏;柯昌文;鄧小玲;楊杏芬;賴蔚傮;柯碧霞;李柏生;譚海玲;;單增李斯特菌檢測基因芯片的研制與評價[A];2011廣東省預(yù)防醫(yī)學(xué)會學(xué)術(shù)年會資料匯編[C];2011年

8 斯國靜;俞驊;劉濤;胡俊;;單核細胞增生李斯特菌在市售食品中污染現(xiàn)狀分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會醫(yī)學(xué)病毒學(xué)分會、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)分會學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2011年

9 郭明星;朱堂明;陳晨;趙暉;王振華;陳建軍;徐新生;;湖北省水產(chǎn)品中單增李斯特菌基因分型研究[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

10 程超男;張笑言;彭媛;白家磊;劉原媛;寧保安;高志賢;;基于3-巰基丙酸修飾金電極構(gòu)建電化學(xué)免疫傳感器檢測牛奶中的單增李斯特菌[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第三十三屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

相關(guān)重要報紙文章 前8條

1 ;重視單增李斯特菌風(fēng)險防范[N];中國醫(yī)藥報;2014年

2 張啟華邋姜文輝;煙臺首次從進口水產(chǎn)品中檢出單增李斯特菌[N];中國國門時報;2007年

3 記者　 胡其峰;進口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問題[N];光明日報;2006年

4 黃全權(quán);進口日本食品連出問題,質(zhì)檢交涉[N];新華每日電訊;2006年

5 夏文俊;進口日本食品連續(xù)出現(xiàn)質(zhì)量問題[N];中國質(zhì)量報;2006年

6 呂壯;日本輸華食品頻現(xiàn)安全問題[N];中華工商時報;2006年

7 高亞蘭;小心：進口日本食品頻現(xiàn)質(zhì)量問題[N];國際商報;2006年

8 記者　黃全權(quán);進口日本食品連續(xù)出現(xiàn)問題[N];人民日報;2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 方春;單核細胞增生李斯特菌譜系Ⅲ強毒株與弱毒菌株比較基因組及致病力差異機制[D];浙江大學(xué);2015年

2 亢春雨;食源性單核增生性李斯特氏菌的分布、遺傳多態(tài)性及其毒理機制研究[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 張一敏;三種有機酸對單增李斯特菌誘導(dǎo)性耐酸響應(yīng)研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 李長城;三文魚魚籽中單增李斯特菌預(yù)測模型建立及控制研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2015年

5 夏葉;單核細胞增生李斯特菌：應(yīng)激轉(zhuǎn)錄組學(xué)與RsbX對SigB表達和細菌存活的調(diào)控[D];浙江大學(xué);2015年

6 郗遠;植物提取物對單增李斯特菌的抑制作用及乳化香腸的品質(zhì)影響[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 王建鋒;抗單核細胞增多性李斯特菌溶血素化合物的發(fā)現(xiàn)及作用機制研究[D];吉林大學(xué);2015年

8 隋建新;單增李斯特菌雞卵黃抗體的抑菌性能及其機理研究[D];中國海洋大學(xué);2010年

9 田靜;熟肉制品中單增李斯特菌的風(fēng)險評估及風(fēng)險管理措施的研究[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2010年

10 張輝;單增李斯特菌ActA的表達、免疫原性及膠體金試紙研制[D];吉林大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮曉慧;單增李斯特菌在肉牛屠宰過程中的流行特點及其熱失活模型的建立[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

2 于旖斯;食品中單增李斯特菌的分離、鑒定及抑制研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2010年

3 趙一鳴;三種分型技術(shù)對食源性單增李斯特菌分型研究[D];華南理工大學(xué);2015年

4 萬松華;食品中污染微生物通用型熒光PCR檢測方法研究[D];華南理工大學(xué);2015年

5 周陽;食品中單增李斯特菌快速檢測方法的建立與應(yīng)用[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

6 王昊宇;食品中單增李斯特菌的分離鑒定及PCR快速檢測方法的研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2013年

7 周旋;姜黃素抑制單增李斯特菌溶血素活性的分子機制研究[D];吉林大學(xué);2016年

8 張星星;漆黃素對單增李斯特菌感染妊娠小鼠流產(chǎn)的保護作用[D];吉林大學(xué);2016年

9 解新方;單增李斯特菌表面增強拉曼光譜檢測技術(shù)研究[D];天津科技大學(xué);2015年

10 李云霞;納米磁珠對單增李斯特菌低場磁共振檢測的影響研究[D];上海師范大學(xué);2016年

，

本文編號：2534692