發(fā)布時(shí)間：2019-07-03 13:24

【摘要】：研究4-(甲基亞硝氨基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)對(duì)小鼠肝細(xì)胞NCTC 1469細(xì)胞的毒性作用。利用MTT比色法檢測(cè)5個(gè)不同NNK濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/m L)對(duì)細(xì)胞的毒性作用;倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)凋亡基因Bcl-2和Bax的表達(dá)。MTT顯示,NNK能降低NCTC 1469細(xì)胞存活率,并呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性。鏡檢結(jié)果可見(jiàn)細(xì)胞皺縮,密度降低;流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示,0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/m L的NNK作用24 h后凋亡率分別為(16.79±2.01)%、(26.87±1.67)%、(41.78±3.19)%、(50.89±3.94)%和(65.86±4.54)%,顯著高于對(duì)照組(7.46±1.58)%;熒光定量PCR結(jié)果顯示,隨著NNK濃度的增加,Bcl-2 m RNA的表達(dá)減少,Bax m RNA的表達(dá)逐漸上升。NNK能夠降低NCTC 1469細(xì)胞存活率并誘導(dǎo)其凋亡,作用呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性。
[Abstract]:The toxic effect of 4-(methyl nitrosamino)-1-(3-pyridyl)-1-butanone (NNK) on mouse hepatocytes NCTC 1469 cells was studied. The toxic effects of five different concentrations of NNK (0.1, 0.2, 0.4, 0.4, 0.5 mg/m / L) were detected by MTT colorimetric assay, the morphological changes were observed by inverted phase contrast microscope, the apoptosis rate was detected by flow cytometry, and the expression of apoptosis genes Bcl-2 and Bax was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. PCR showed that NNK could decrease the survival rate of NCTC 1469 cells in a dose-and time-dependent manner. The results of microscopic examination showed that the apoptosis rate of cells was (16.79 鹵2.01)%, (26.87 鹵1.67)%, (41.78 鹵3.19)%, (50.89 鹵3.94)% and (65.86 鹵4.54)%, respectively, which was significantly higher than that of the control group (7.46 鹵1.58)%, and the apoptosis rate was (16.79 鹵2.01)%, (26.87 鹵1.67)%, (41.78 鹵3.19)%, (50.89 鹵3.94)% and (65.86 鹵4.54)%, respectively. The results of fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Bcl-2 m RNA decreased and the expression of, Bax m RNA increased gradually with the increase of NNK concentration. NNK could decrease the survival rate and induce apoptosis of NCTC 1469 cells in a dose-and time-dependent manner.
【作者單位】： 鄭州輕工業(yè)學(xué)院食品與生物工程學(xué)院;
【基金】：鄭州市科技局科技攻關(guān)項(xiàng)目(121PPTGG362-16) 河南省教育廳青年骨干教師項(xiàng)目(2012GG-117)
【分類(lèi)號(hào)】：R114

【參考文獻(xiàn)】

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1 李瀚e，

本文編號(hào)：2509424