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膳食補(bǔ)充亮氨酸可通過抑制泛素-蛋白酶體削弱增齡小鼠骨骼肌萎縮

發(fā)布時間:2019-06-07 07:59
【摘要】:目的:探討膳食補(bǔ)充亮氨酸對增齡所致骨骼肌萎縮的影響及可能機(jī)制。方法:13月齡雄性ICR小鼠根據(jù)體重隨機(jī)分為補(bǔ)充亮氨酸(Leu)、補(bǔ)充丙氨酸(Ala)以及空白對照組(NC),Leu和Ala組分別在飼料中添加5%比例亮氨酸和3.4%比例丙氨酸8周,NC組飼喂普通飼料。末次給食后禁食17h處死小鼠,便攜式血糖儀檢測血糖;ELISA法檢測血清胰島素、IGF-1;分光光度法檢測血尿素氮;氨基酸分析儀檢測血漿游離氨基酸譜;HE染色觀察肌纖維適應(yīng)性及病理性改變;BCA法定量蛋白后,Western Blotting法檢測Ub、Atrogin-1、MuRF-1及MHCⅡ的蛋白表達(dá)。結(jié)果:與NC組和Ala組小鼠相比,添加5%亮氨酸(Leu組)未顯著影響小鼠體重、采食量,血糖、胰島素水平與IGF-1無顯著變化,血尿素氮水平顯著下降;血漿游離亮氨酸含量升高而丙氨酸、甘氨酸和谷氨酸含量下降;腓腸白肌濕重/體重比值、肌纖維橫截面積及直徑均表現(xiàn)出增長的趨勢,但增幅并不顯著;骨骼肌纖維圓形化、核中心化病變顯著減少;腓腸白肌總蛋白含量、MHCⅡ蛋白表達(dá)顯著增加,而Ub、Atrogin-1及MuRF-1的蛋白表達(dá)均顯著下降。Ala組與NC組小鼠相比各指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論:亮氨酸能夠削弱老年前期小鼠骨骼肌萎縮,其機(jī)制可能與亮氨酸對泛素-蛋白酶體系統(tǒng)的抑制有關(guān)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of dietary Leucine supplementation on skeletal muscle atrophy induced by aging and its possible mechanism. Methods: 13 month old male ICR mice were randomly divided into Leucine (Leu), supplemented with alanine (Ala) and blank control group (NC), according to body weight. Leu and Ala groups were fed with 5% Leucine and 3.4% alanine respectively for 8 weeks, and NC group was fed with common feed. The mice were killed after fasting for 17 hours after the last administration, blood glucose was measured by portable blood glucose meter, serum insulin was detected by ELISA, blood urea nitrogen was detected by IGF-1; spectrophotometry, and plasma free amino acid spectrum was detected by amino acid analyzer. The adaptability and pathological changes of muscle fibers were observed by HE staining, and the protein expression of Ub,Atrogin-1,MuRF-1 and MHCII was detected by, Western Blotting after quantitative protein by BCA. Results: compared with NC group and Ala group, adding 5% Leucine (Leu group) had no significant effect on body weight, feed intake, blood glucose, insulin level and IGF-1, but blood urea nitrogen level decreased significantly. The content of plasma free Leucine increased while the contents of alanine, glycine and glutamic acid decreased, the wet weight / body weight ratio of sural white muscle, the cross section area and diameter of muscle fiber increased, but the increase was not significant. The fibers of skeletal muscle were circular and the lesions of nucleus centralization were significantly reduced. The total protein content of sural white muscle and the expression of MuRF-1 II protein increased significantly, while the protein expression of Ub,Atrogin-1 and MuRF-1 decreased significantly. There was no significant difference between Ala group and NC group. Conclusion: Leucine can weaken skeletal muscle atrophy in presenile mice, and its mechanism may be related to the inhibition of ubiquitin proteasome system by Leucine.
【作者單位】: 井岡山大學(xué)體育學(xué)院;武漢體育學(xué)院研究生院;北京體育大學(xué)運(yùn)動人體科學(xué)學(xué)院;成都體育學(xué)院;成都大學(xué)體育學(xué)院;保山學(xué)院體育學(xué)院;
【基金】:江西省科技廳自然科學(xué)基金青年項目(20142BAB215048) 四川省教育廳自然科學(xué)科研項目(13ZB0073)
【分類號】:R151.45

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