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煙草煙霧凝集物對BEAS-2B細胞caspase-1及相關炎性細胞因子表達的影響

發(fā)布時間:2019-03-30 16:09
【摘要】:目的觀察煙草煙霧凝集物CSC(cigarette smoke condensate,CSC)刺激永生化人支氣管上皮細胞(Immortalized human bronchial epithelial cells,BEAS-2B),其caspase-1及相關炎性細胞因子的改變。方法分別以終濃度為0 mg/ml(空白對照與DMSO溶劑對照)、0.015 mg/ml(1/4 IC50)、0.03mg/ml(1/2 IC50)及0.06 mg/ml(IC50)的CSC溶液作用于BEAS-2B細胞8、16和24 h,檢測caspase-1活性,并用ELISA方法檢測細胞內caspase-1活性及含量和細胞培養(yǎng)上清液中IL-1β和IL-18的水平。結果隨CSC刺激濃度增加,BEAS-2B細胞抑制率增大,CSC對BEAS-2B細胞的半數(shù)抑制濃度約為0.06 mg/ml。不同濃度CSC處理細胞8和16 h后,1/4IC50、1/2IC50與IC50組caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于對照組(P0.05),且隨染毒濃度增高而增高(P0.05);不同濃度CSC處理細胞24h后,各染毒組細胞caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于對照組(P0.05),但1/2IC50組與IC50組caspase-1活性及含量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論 CSC處理BEAS-2B細胞可引起caspase-1活化,且IL-1β、IL-18表達水平增高,提示可能存在caspase-1依賴的細胞焦亡(pyroptosis)。
[Abstract]:Aim to observe the changes of caspase-1 and related inflammatory cytokines in immortalized human bronchial epithelial cells (Immortalized human bronchial epithelial cells,BEAS-2B) stimulated by tobacco smoke agglutinin (CSC (cigarette smoke condensate,CSC). Methods BEAS-2B cells were treated with CSC solution of 0 mg/ml (blank control and DMSO solvent control), 0.015 mg/ml (1? 4 IC50), 0.03mg/ml (1? 2 IC50) and 0.06 mg/ml (IC50) for 8, 16 and 24 h, respectively. The activity of caspase-1 was detected, and the activity and content of caspase-1 in the cells and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in the supernatant of cell culture were detected by ELISA method. Results with the increase of CSC concentration, the inhibition rate of BEAS-2B cells increased, and the half inhibitory concentration of CSC on BEAS-2B cells was about 0.06 mg/ml.. After 8 and 16 hours of treatment with different concentrations of CSC, the activity and content of caspase-1 and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in the groups treated with 1? 4IC _ (50), 1 ~ (2) IC _ (50) and IC50 were higher than those in the control group (P0.05), and increased with the increase of the concentration (P0.05). After treated with different concentrations of CSC for 24 hours, the activity and content of caspase-1 and the levels of IL-1 尾 and IL-18 in each group were higher than those in the control group (P0.05). But there was no significant difference in caspase-1 activity and content between 1/2IC50 group and IC50 group (P0.05). Conclusion CSC can induce the activation of caspase-1 and increase the expression of IL-1 尾 and IL-18 in BEAS-2B cells, suggesting that there may be caspase-1 dependent (pyroptosis). In focal death.
【作者單位】: 鄭州大學公共衛(wèi)生學院;鄭州大學醫(yī)學檢驗系;
【基金】:國家自然科學基金(81172717)
【分類號】:R114

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