【摘要】：目的通過研究甲狀腺激素受體alpha1(Thyroid hormone receptor alpha 1,TRα1)、beta1(Thyroid hormone receptor beta 1,TRβ1)在甲狀腺和乳腺組織中蛋白和基因水平的變化,以及鈉碘轉(zhuǎn)運體(Sodium/iodide symporter,NIS)和脫碘酶1(Deiodinase 1,Dio1)在自身調(diào)節(jié)中的作用,探討孕期、哺乳期補碘對哺乳期Wistar大鼠甲狀腺和乳腺的影響。方法孕0日大鼠隨機分為適碘(normal iodide,NI)組,10倍高碘(10 times high iodide,10 HI)組和100倍高碘(100 times high iodide,100 HI)組。通過攝入正常飼料和不同濃度碘化鉀(potassium iodide,KI)的去離子水,使三組大鼠攝碘量分別為7.5μg/d、75μg/d和750μg/d。Wistar大鼠分別喂養(yǎng)至哺乳7天、14天和21天時處死。采用過硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法測定大鼠尿碘和甲狀腺以及乳腺組織碘含量;測量大鼠體重和甲狀腺重量,計算甲狀腺臟體比;采用直接化學發(fā)光法和ELISA法測定大鼠血清甲狀腺激素水平;采用Mito SOX,通過流式細胞術(shù)檢測哺乳7天、14天和21天大鼠甲狀腺和乳腺線粒體超氧化物生成;采用Western blot方法檢測大鼠甲狀腺和乳腺蛋白TRα1、TRβ1和NIS表達的變化;采用Real-time Quantitative PCR(QPCR)檢測大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1、NIS和Dio1m RNA表達;HE染色觀察甲狀腺和乳腺組織形態(tài)學變化;免疫組化染色觀察TRα1、TRβ1表達及NIS和CD4+T淋巴細胞的空間分布。結(jié)果1.甲狀腺臟體比:Wistar大鼠自孕0日起NI、10 HI和100 HI攝入直至哺乳7天、14天和21天各組大鼠甲狀腺臟體比無明顯變化(p0.05)。2.尿碘中位數(shù)以及組織碘含量:在哺乳7天,14天和21天,與NI組相比,10HI組和100 HI組尿碘中位數(shù)、甲狀腺和乳腺組織碘含量顯著增加(p0.05);與10 HI組相比,100 HI組也顯著增加(p0.05)。3.血清甲狀腺激素水平:與NI組和10 HI組相比,100 HI組母鼠血清FT3水平和FT3/FT4比值降低,FT4水平升高,TPOAb和Tg Ab水平升高,差異均有統(tǒng)計學意義(p0.05)。4.Western blot和QPCR:在哺乳7天、14天和21天,與NI組和10 HI組相比,100 HI組大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1和NIS蛋白和m RNA表達顯著下降(p0.05);與NI組相比,10 HI組大鼠甲狀腺和乳腺NIS蛋白和m RNA表達也顯著下降(p0.05)。5.線粒體超氧化物生成:在哺乳7天、14天和21天,與NI組和10 HI組相比,甲狀腺和乳腺細胞線粒體超氧化物生成在100 HI組顯著增加(p0.05)。6.HE染色:哺乳7天、14天和21天100 HI組甲狀腺和乳腺結(jié)構(gòu)破壞嚴重,伴有腺泡融合。100 HI組甲狀腺組織有淋巴細胞浸潤。7.免疫組化染色:在哺乳7天、14天和21天,隨著碘攝入量的增加,哺乳期大鼠甲狀腺和乳腺TRα1、TRβ1蛋白表達逐漸減弱。TRα1和TRβ1在細胞核表達;NIS在細胞漿表達,NI組偶見細胞膜分布。100 HI組甲狀腺組織可見CD4+T淋巴細胞表達。結(jié)論1.孕期、哺乳期10倍碘補充哺乳期母鼠可通過尿碘排出的增加、NIS下調(diào)、乳腺泌乳來維持母體甲狀腺功能正常。2.孕期、哺乳期100倍碘補充可導致哺乳期母鼠甲狀腺淋巴細胞浸潤,同時降低的TRα1和TRβ1可能影響TH介導的生理活動及正常轉(zhuǎn)錄。
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【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R153.1

【參考文獻】

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本文編號：2423826