發(fā)布時間：2019-02-12 07:13

【摘要】：性激素具有維持內分泌系統(tǒng)穩(wěn)定的作用,監(jiān)測其水平對哺乳動物疾病的預防、診斷、治療具有極其重要的意義。目前,性激素在畜牧業(yè)生產中不規(guī)范使用,導致其在畜牧產品和環(huán)境水體中的殘留。因此,建立準確、簡便的性激素檢測方法對保障人民生命健康和生態(tài)平衡尤為必要。本文研究了17β-雌二醇(BE2)、雌酮(E1)、己烯雌酚(DES)和黃體酮(PES)等性激素的高效液相色譜檢測法,主要研究內容如下： 一、超聲輔助表面活性劑增強乳化微萃取(UASEME)-高效液相色譜法檢測性激素的研究 1.UASEME-HPLC檢測環(huán)境水體中性激素的研究 以超聲輔助表面活性劑增強乳化微萃取環(huán)境水中βE2、E1和DES,最佳萃取條件為：2.4x10-6mol/LTriton X-100作為分散劑和乳化劑,50μLCCl4為萃取劑,35kHz、25℃超聲5min,4000rpm離心5min,富集倍數(shù)達85.29。10-1000ng/mL范圍內,線性良好,檢測限為0.10-0.20ng/mL,RSD為0.85-1.28%,回收率高于89.82%。此方法明顯縮短了萃取時間,提高了富集倍數(shù)和萃取效率。 2. UASEME-HPLC檢測血液、尿液和牛奶中性激素的研究 以超聲輔助表面活性劑增強乳化微萃取生物和牛奶樣品中βE2、E1、DES和PES,最佳萃取條件為：1mL乙腈和0.3g MgS04沉淀全血,0.2g Na2SO4沉淀尿液,0.1gNaAc、0.4g MgSO4口0.5mL乙腈重復兩次沉淀牛奶。上清液調節(jié)pH至7.0,0.8×10-5mol/L Triton X-100為分散劑和乳化劑,80×L CCl4為萃取劑,35kHz、25℃下超聲3min,加入0.3g NaCl,4000rpm離心5min,取有機相進樣分析。5-1000ng/mL內,βE2、E1和DES線性良好,10-1000ng/mL范圍內,PES的線性良好,檢測限為0.05-0.50ng/mL,RSD為1.28-3.88%,回收率高于83.2%。此方法能準確、簡便地分析血液、尿液和牛奶中的性激素,在臨床和食品檢測方面具有一定的推廣性。 二、超聲輔助濁點萃取(UA-CPE)—高效液相色譜法測定尿液中性激素的研究 以Tergitol TMN-6為萃取劑的濁點萃取尿液樣品中βE2、E1和DES,最佳萃取條件為：0.5%(v/v)Tergitol TMN-6,35kHz、45℃超聲45min,2.0%NaCl,4000rpm離心3min,富集倍數(shù)高于78.39。5-1000ng/mL范圍內,線性良好,檢測限為0.10-0.20ng/mL,回收率高于85.35%,重復檢測三天的RSD為0.84-5.15%。此法有效地縮短了萃取時間,提高了萃取效率和穩(wěn)定性。 三、鹽析輔助液液萃取(SA-LLE)—高效液相色譜法檢測牛奶中性激素的研究 以乙腈、NaAc和MgSO4鹽析輔助液液萃取牛奶中BE2, El、DES和PES,最佳萃取條件為：15mL牛奶樣品中,加入6mL酸化乙腈、g NaAc和2.4g MgSO4,10000rpm離心3min,取上清液重復離心一次后調節(jié)pH至5.0,加入1mL乙腈,4000rpm離心10min,取乙腈相進樣分析。10-5000ng/mL范圍內,BE2、E1和DES線性良好,20-8000ng/mL范圍內,PES的線性良好,檢測限為0.40-2.40ng/mL,RSD為0.3-4.4%,回收率高于95.10%,明顯優(yōu)于液液萃取和蛋白沉淀后再萃取。此法能有效地用于牛奶中性激素殘留的檢測。
[Abstract]:Sex hormones can maintain the stability of endocrine system. It is very important to monitor the level of sex hormones for the prevention, diagnosis and treatment of mammalian diseases. At present, sex hormones are not standardized in animal husbandry production, resulting in their residues in animal husbandry products and environmental water. Therefore, it is necessary to establish an accurate and simple method for the determination of sex hormone in order to ensure the life and health of the people and the ecological balance. The determination of 17 尾 -estradiol (BE2), estradiol (E1), diethylstilbestrol (DES) and progesterone (PES) by high performance liquid chromatography (HPLC) was studied. Study on Ultrasound-assisted Surfactant Enhancement emulsified Microextraction (UASEME) and High performance liquid Chromatography for determination of Sex hormones in Environmental Water the study of Ultrasound-assisted Surfactant Enhancement Emulsified microextraction environment water 尾 E2, The optimum extraction conditions for E1 and DES, were as follows: 2.4x10-6mol/LTriton X-100 as dispersant and emulsifier, 50 渭 LCCl4 as extractant, 35 kHz ~ (25 鈩，

本文編號：2420193