發(fā)布時間：2019-02-09 12:12

【摘要】：為制備特異性和靈敏度較高的抗福氏志賀氏菌2a單克隆抗體,并建立雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測法,用于檢測生鮮食品中的福氏志賀氏菌2a。本研究利用自制的福氏志賀氏菌2a抗原免疫BALB/c小鼠,并用雜交瘤技術(shù)進行細胞融合,經(jīng)篩選克隆后,獲得3株分泌抗福氏志賀氏菌2a單克隆抗體穩(wěn)定的雜交瘤細胞,分別命名為5C12、1B5和6A11。3株雜交瘤細胞注射進小鼠腹腔后,誘導(dǎo)產(chǎn)生的腹水中抗體的效價為1∶2.048×10~5~1∶1.024×10~5,免疫球蛋白亞型均為IgG。3株抗體識別抗原表位的最佳配對為5C12和6A11,由此建立雙抗夾心ELISA體系,測得其靈敏度為1 000 CFU/g,且具有良好的特異性。
[Abstract]:In order to prepare a specific and sensitive monoclonal antibody against Shigella flexneri 2a, a double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa) was established for the detection of Shigella flexneri 2a in fresh food. In this study, BALB/c mice were immunized with 2a antigen of Shigella flexneri and fused with hybridoma technique. After screening and cloning, three hybridoma cells secreting stable monoclonal antibody against Shigella flexneri 2a were obtained. After the hybridoma cells were named 5C12O1B5 and 6A11.3 strain, the titer of antibody in ascites induced by injection into mice was 1: 2.048 脳 10 ~ (12) ~ (5) and 1: 1.024 脳 10 ~ (5) ~ (5), respectively, and the titer of antibody in ascites was 1: 2.048 脳 10 ~ (5). The best pairs of immunoglobulin subtypes were 5C12 and 6A11 for antibody recognition epitopes of IgG.3 strain. The double antibody sandwich ELISA system was established. The sensitivity was 1 000 CFU/g, and the specificity was good.
【作者單位】： 食品質(zhì)量與安全北京實驗室/農(nóng)產(chǎn)品有害微生物及農(nóng)殘安全檢測與控制北京市重點實驗室/北京市食品安全免疫快速檢測工程技術(shù)研究中心/微生態(tài)制劑關(guān)鍵技術(shù)開發(fā)北京市工程實驗室/北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：北京市屬高等學(xué)校高層次人才引進與培養(yǎng)長城學(xué)者計劃項目(CIT&TCD20140315) 北京農(nóng)學(xué)院協(xié)同創(chuàng)新建設(shè)項目
【分類號】：R155.5

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本文編號：2418944