【摘要】：[目的]探討高濃度氟化鈉(Na F)致小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞凋亡的影響。[方法]以不同劑量Na F染毒MC3T3-E1細(xì)胞,分別培養(yǎng)24和48 h,用CCK-8法測(cè)定細(xì)胞存活率,明確后續(xù)實(shí)驗(yàn)作用濃度及時(shí)間。0、1×10~3、2×10~3、3×10~3μmol/L Na F染毒小鼠成骨細(xì)胞MC3T3-E1,培養(yǎng)24、48 h后,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡;并用實(shí)時(shí)PCR測(cè)定Caspase-3和Caspase-8 m RNA的表達(dá)及采用免疫印跡法檢測(cè)Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP蛋白的表達(dá)。[結(jié)果]CCK-8實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著Na F濃度增加,MC3T3-E1細(xì)胞的存活率均隨著Na F染毒濃度的升高及染毒時(shí)間的延長(zhǎng)而下調(diào)。1×10~3μmol/L時(shí)OD值低于對(duì)照組,存活率下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。1×10~3μmol/L Na F染毒48 h時(shí)OD值較24 h低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與對(duì)照組相比,Na F作用24 h時(shí),1×10~3μmol/L Na F染毒組中晚期細(xì)胞凋亡率無(wú)明顯變化,其余各Na F染毒組各期細(xì)胞凋亡率均較高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著Na F染毒濃度的升高,MC3T3-E1細(xì)胞Caspase-3、Caspase-8 m RNA的表達(dá)水平呈上升趨勢(shì);且Na F染毒48 h后,除1×10~3μmol/L Na F染毒組的Cleaved PARP蛋白表達(dá)外,其余染毒組MC3T3-E1細(xì)胞Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP的蛋白表達(dá)水平上升(P0.05)。[結(jié)論]在高濃度Na F誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過(guò)程中,Caspase介導(dǎo)的信號(hào)通路發(fā)揮著重要的作用。
[Abstract]:[objective] to investigate the effect of high concentration sodium fluoride (Na F) on apoptosis of mouse osteoblast MC3T3-E1 cells. [methods] MC3T3-E1 cells were incubated with different doses of Na F for 24 h and 48 h, respectively. The survival rate of MC3T3-E1 cells was determined by CCK-8 assay. The concentration and time of the subsequent experiment were determined. The concentration and time of the subsequent experiment were determined. 0 脳 10 ~ 3 脳 10 ~ 3 渭 mol/L Na F ~ 2 脳 10 ~ (3) C ~ (3) 脳 10 ~ (3) 渭 mol/L Na F in mouse osteoblasts MC3T3-E1,. Apoptosis was detected by flow cytometry (FCM) after cultured for 48 h. The expression of Caspase-3 and Caspase-8 m RNA was detected by real time PCR and the expression of Cleaved Caspase-3,Cleaved PARP protein was detected by Western blot. [results] CCK-8 results showed that with the increase of Na F concentration, the survival rate of MC3T3-E1 cells decreased with the increase of Na F concentration and the prolongation of exposure time. The OD value of 1 脳 10 ~ (-3) 渭 mol/L was lower than that of the control group, and the survival rate was decreased. The difference was statistically significant (P0.05). The OD value of 1 脳 10 3 渭 mol/L Na F at 48 h was lower than that of 24 h (P0.05). Compared with the control group for 24 h, the apoptosis rate of 1 脳 10 ~ 3 渭 mol/L Na F group was not changed significantly, but the apoptosis rate of other Na F groups was higher than that of the control group (P0.05). With the increase of Na F concentration, the expression of Caspase-3,Caspase-8 m RNA in MC3T3-E1 cells increased. After 48 h of Na F exposure, the expression of Cleaved Caspase-3,Cleaved PARP protein in MC3T3-E1 cells increased except the Cleaved PARP protein expression of 1 脳 10 3 渭 mol/L Na F group (P0.05). [conclusion] Caspase mediated signal pathway plays an important role in the process of apoptosis induced by high concentration of Na F.
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室環(huán)境污染與疾病監(jiān)控省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81560515) 貴州省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):黔科合SY字[2013]3062號(hào)) 科技部國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(編號(hào):2013BAI05B03)
【分類號(hào)】：R114

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本文編號(hào)：2404704