【摘要】：目的建立干血點中25-羥基維生素D2[25(OH)D2]和D3[25(OH)D3]的超高效液相色譜-串聯(lián)質譜(UHPLC-MS/MS)同時測定方法。方法干血點經過定量取樣,加水超聲提取后加乙腈沉淀蛋白,再使用乙酸乙酯:正己烷(2:1,V/V)萃取,氮氣吹干后加PTAD試劑衍生,氮吹干后用流動相復溶,使用Waters BEH C18柱分離、電噴霧正離子(ESI+)模式和多反應監(jiān)測(MRM)檢測,同位素內標法定量。結果 25(OH)D2和25(OH)D3分別在全血濃度為5~167ng/m L和1.7~167ng/m L的范圍內呈良好的線性關系,相關系數r0.999;檢出限(LOD)分別為1.5ng/m L和0.25ng/m L,定量限(LOQ)分別為5ng/m L和1.7ng/m L;樣品高低兩水平的加標回收率均80%,日內精密度均9%,日間精密度均10%。結論該方法需血量少、靈敏、快速、準確,適用于人群維生素D營養(yǎng)狀況的監(jiān)測。
[Abstract]:Objective to establish a method for simultaneous determination of 25-hydroxyvitamin D _ 2 [25 (OH) D _ 2] and D _ 3 [25 (OH) D _ 3] in dry blood spots by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS). Methods after quantitative sampling, ultrasonic extraction with water, acetonitrile precipitated protein was added. Ethyl acetate: n-hexane (2: 1 V / V) was extracted, nitrogen was dried and PTAD reagent was added. After nitrogen was dried, mobile phase was used to dissolve the protein. Waters BEH C18 column separation, electrospray positive ion (ESI) model and multi-reaction monitoring (MRM) were used. Results there was a good linear relationship between 25 (OH) D2 and 25 (OH) D 3 within the range of 5~167ng/m L and 1.7~167ng/m L, respectively. The correlation coefficient was r 0.999. The detection limit (LOD) was 1.5ng/m L and 0.25ng/m L, and the quantitative limit (LOQ) was 5ng/m L and 1.7ng/m L. The recoveries of the samples at both levels were 80, 9 and 10, respectively. Conclusion this method needs less blood volume, is sensitive, rapid and accurate, and is suitable for the monitoring of vitamin D nutritional status.
【作者單位】： 上海市普陀區(qū)疾病預防控制中心;上海市疾病預防控制中心;
【分類號】：R151

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本文編號：2394001