【摘要】：研究背景 三氯乙烯（Trichloroethylene，TCE）是工業(yè)上廣泛使用的一種有機(jī)溶劑，在五金、電子、玩具等行業(yè)作為金屬部件和電子元件的清洗劑、脫脂劑。在我國職業(yè)性三氯乙烯藥疹樣皮炎（ODMLT）的發(fā)病人數(shù)不斷上升，已成為TCE接觸工人健康危害的突出問題。ODMLT的發(fā)病機(jī)制，大多觀點(diǎn)認(rèn)為是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的IV型變態(tài)反應(yīng)。對于ODMLT中炎癥性反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制方面，多數(shù)學(xué)者進(jìn)行了大量研究，但有關(guān)TCE免疫性損傷的調(diào)節(jié)機(jī)制研究還剛起步。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞是一種不同于Th1和Th2的具有免疫抑制功能的T細(xì)胞群，在免疫抑制或免疫耐受過程中發(fā)揮重要作用，主要通過分泌IL-10、TGF-β發(fā)揮抑制作用。 目的 通過檢測TCE致敏小鼠脾臟Treg細(xì)胞比例，以及外周血和皮膚組織中抗炎性細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（IL-10）、轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）的表達(dá)水平，研究CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞在TCE引起的免疫應(yīng)答中動態(tài)變化情況，探討CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞在TCE致敏中的作用，為最終闡明TCE的危害及其機(jī)理并制定防治對策提供理論依據(jù)。 方法 選用6~8周健康雌性BALB/c小鼠80只，隨機(jī)分成空白對照組、TCE處理組。建立BALB/c小鼠致敏模型，觀察記錄小鼠背部受試部位的皮膚致敏反應(yīng)情況。根據(jù)末次激發(fā)24h后小鼠的致敏結(jié)果以及取材時(shí)點(diǎn)的不同(分別于末次激發(fā)后1d、2d、3d、7d、14d采血，無菌取皮膚組織和脾臟)，將TCE處理組分為致敏1d組、致敏2d組、致敏3d組、致敏7d組、致敏14d組和未致敏1d組、未致敏2d組、未致敏3d組、未致敏7d組、未致敏14d組。脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液用相關(guān)熒光標(biāo)記的抗體染色后采用流式細(xì)胞術(shù)分析。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測各組血清中IL-10、TGF-β水平。免疫組織化學(xué)法檢測皮膚組織中IL-10、TGF-β的表達(dá)。 結(jié)果 1.致敏率 皮膚致敏反應(yīng)試驗(yàn)中，空白對照組背部皮膚均沒有發(fā)現(xiàn)紅斑和水腫；TCE處理組75只小鼠中有27只出現(xiàn)背部皮膚的紅斑或水腫，致敏率為36%。 2.脾臟Treg細(xì)胞的比例 末次激發(fā)后，各組小鼠脾臟組織CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg細(xì)胞比例：致敏1d組CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg細(xì)胞比例較空白對照組升高不明顯；與空白組對照組、致敏1d組相比，致敏2d組和3d組均顯著升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏3d組比例最高，但與致敏2d組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與致敏2d組和3d組比較，致敏7d組和14d組又明顯下降。同時(shí)點(diǎn)的比較，致敏2d、3d組分別高于未致敏2d、3d組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.血清IL-10和TGF-β水平 末次激發(fā)后，，各組小鼠血清中IL-10的水平：所有致敏組顯著高于空白對照組； IL-10的水平在致敏組有“先升后降”的趨勢，在末次激發(fā)后3天達(dá)到最高，且致敏2d、3d、7d、14d組均高于致敏1d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)點(diǎn)的比較，致敏組IL-10的水平均高于未致敏組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，除了未致敏14d組。 末次激發(fā)后，各組小鼠血清中TGF-β的水平：致敏1d、2d、3d、14d組顯著高于空白對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏3d、7d、14d組均低于致敏1d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏3d、7d組低于致敏2d組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)點(diǎn)的比較，致敏2d組TGF-β的水平均高于未致敏2d組（P0.05），其他致敏組均高于未致敏組，但是差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.皮膚組織IL-10和TGF-β表達(dá) 末次激發(fā)后，各組小鼠皮膚組織中IL-10的水平：致敏1d、2d、3d組較空白對照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏7d、14d組顯著降低，與致敏1d、2d、3d組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)點(diǎn)的比較，致敏1d、2d、3d組分別高于未致敏1d、2d、3d組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 末次激發(fā)后，各組小鼠皮膚組織中TGF-β的水平：致敏1d、2d、3d、7d組較空白對照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏2d、3d組較致敏1d組升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與致敏3d組比較，致敏7d、14d組下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；致敏14d組降至最低，與致敏7d組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。同時(shí)點(diǎn)的比較，致敏1d、2d、7d組分別高于未致敏1d、2d、7d組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 1. TCE在一定劑量下能對小鼠致敏，致敏率為36%，TCE對BALB/c小鼠皮膚具有中度致敏作用。 2. Treg細(xì)胞及其分泌的IL-10、TGF-β在TCE接觸過敏性皮炎發(fā)生過程中可能發(fā)揮重要的免疫下調(diào)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R135

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2366733