【摘要】：目的：通過對花背蟾蜍胚后早期蝌蚪的急慢性毒性實驗，我們探討除草劑丁草胺染毒后對背蟾蜍胚后發(fā)育早期蝌蚪的形態(tài)學與行為學的改變、腦部神經(jīng)元形態(tài)和數(shù)量以及室管膜厚度的改變，從而揭示除草劑丁草胺對花背蟾蜍胚后早期腦部發(fā)育的毒性作用，為生態(tài)保護工作提供更充實的資料。 方法：首先對花背蟾蜍發(fā)育至gosner20、gosner25和gosner26期的蝌蚪進行急性染毒，求出各期蝌蚪的LC_(50)及其95%置信區(qū)間、安全濃度，并觀察記錄蝌蚪在行為學和形態(tài)學上的變化；接著依照gosner20,25,26期蝌蚪的各自24hLC_(50)濃度對各期蝌蚪進行染毒，24h后從各期取4-5只蝌蚪做腦部石蠟切片，尼氏染色，觀察急性染毒后的腦部組織學變化；然后以發(fā)育至gosner25期的蝌蚪做為研究對象，以其24h LC_(50)濃度值為基礎換算為一系列濃度梯度（24h LC_(50)濃度值的1/5、1/10、1/20、1/50、1/100和1/200）進行慢性染毒，每隔3天記錄體重、體長的變化，并取4-5只蝌蚪做腦部石蠟組織切片，尼氏染色觀察染毒對花背蟾蜍胚后早期腦部發(fā)育的影響。 結(jié)果：隨著發(fā)育時間的增加，丁草胺對花背蟾蜍的LC_(50)值逐漸增大。急性染毒對蝌蚪的行為學和形態(tài)學均產(chǎn)生了不同程度的毒性作用。慢性染毒過程中，丁草胺對花背蟾蜍胚后早期生長發(fā)育造成了明顯的滯育影響，體重從第6天、體長從第9天開始染毒組與對照組之間出現(xiàn)了顯著性差異。急慢性染毒后蝌蚪腦部神經(jīng)元形態(tài)均未出現(xiàn)明顯病理性改變，但在急性染毒24h后，蝌蚪的部分腦區(qū)的神經(jīng)元數(shù)量出現(xiàn)了明顯減少，在慢性染毒的第3天，花背蟾蜍蝌蚪腦部四個區(qū)域（大腦海馬區(qū)、間腦丘腦區(qū)，中腦頂蓋區(qū)和延髓區(qū)）的神經(jīng)元數(shù)量均出現(xiàn)了不同程度的減少，在第6天，染毒組的神經(jīng)元數(shù)量恢復到了與對照組基本相同的水平，而到了第12天，海馬區(qū)和延髓區(qū)的的神經(jīng)元數(shù)量出現(xiàn)了下降，第21天觀察，除中腦區(qū)外，海馬區(qū)、間腦區(qū)和延髓區(qū)染毒組的神經(jīng)元數(shù)量均高出了對照組的水平。在急慢性染毒期間，延髓區(qū)神經(jīng)元數(shù)量減少最為顯著。同時，在染毒過程中，側(cè)腦室，第三腦室和第四腦室的室管膜厚度均出現(xiàn)了明顯的增厚。 結(jié)論：酰胺類除草劑丁草胺對花背蟾蜍胚后發(fā)育早期的蝌蚪具有中等毒性，染毒會對蝌蚪的行為和形態(tài)造成改變，并且具有明顯的滯育效應，對體重的影響較對體長的影響更為明顯；丁草胺染毒對蝌蚪腦部神經(jīng)元的形態(tài)基本上不產(chǎn)生影響，，但染毒會使室管膜的厚度產(chǎn)生保護性的增高。在染毒早期，蝌蚪腦部四個區(qū)域神經(jīng)元數(shù)量均出現(xiàn)了減少，尤其對延髓區(qū)神經(jīng)元的影響最為顯著，但隨后通過蝌蚪自身的適應性調(diào)節(jié)，神經(jīng)元的數(shù)量又逐步恢復到了正常水平。
[Abstract]:Objective: to investigate the changes of morphology and behavior of tadpoles in the early postembryonic tadpoles of Bufo bufo (Bufo bufo) at the early stage of postembryonic development after exposure to herbicide butachlor. The changes of morphology and number of neurons in the brain and ependymal thickness revealed the toxic effect of herbicide butachlor on the early postembryonic brain development of toad and provided more sufficient data for ecological protection. Methods: tadpoles developed to gosner20,gosner25 and gosner26 stages were exposed to acute toxicity. The LC_ (50) and 95% confidence interval and safe concentration of tadpoles were obtained. The changes in behavior and morphology of tadpoles were observed and recorded. Then the tadpoles of each stage were exposed to the 24 h LC50 concentration of gosner20,25,26. After 24 hours, 4-5 tadpoles were taken from each stage for paraffin section and Nissl staining to observe the changes of brain histology after acute exposure. Then the tadpoles developed to the stage of gosner25 were used as research objects, and their 24 h LC_ (50) concentrations were converted to a series of concentration gradients (1 / 5 / 10 / 10 / 10 / 1 / 20 / 20 / 50 / 100 and 1 / 200 of the concentration of 24 h LC_ (50) for chronic exposure. The changes of body weight and body length were recorded every 3 days, and 4-5 tadpoles were taken as paraffin sections of the brain. Results: with the increase of development time, the LC_ (50) value of butachlor on toad increased gradually. The behavior and morphology of tadpoles were affected by acute exposure. During chronic exposure, butachlor had a significant diapause effect on the growth and development of toad embryo, and there were significant differences in body weight and body length between the control group and the control group from the 6th day and the 9th day. After acute and chronic exposure, no pathological changes were found in the brain neurons of tadpoles, but after 24 hours of acute exposure, the number of neurons in some brain regions of tadpoles decreased significantly, and on the third day of chronic exposure, the number of neurons in some brain regions of tadpoles decreased significantly. The number of neurons in four brain regions (hippocampus, diencephalon, mesencephalic tectum and medulla oblongata) of Bufo bufo tadpole decreased in varying degrees. The number of neurons in the exposed group returned to the same level as that in the control group, but on the 12th day, the number of neurons in the hippocampus and medulla oblongata decreased. The number of neurons in diencephalon and medulla oblongata groups was higher than that in control group. During acute and chronic exposure, the number of neurons in the medulla oblongata decreased most significantly. At the same time, the ependymal thickness of lateral ventricle, third ventricle and fourth ventricle were obviously thickened. Conclusion: butachlor has moderate toxicity to the tadpoles in the early postembryonic development of Bufo bufo, which can change the behavior and morphology of the tadpoles, and has obvious diapause effect. The effect on body weight is more obvious than on body length. Butachlor exposure had no effect on the morphology of brain neurons of tadpoles, but the thickness of ependymal membrane was increased by exposure to butachlor. In the early stage of exposure, the number of neurons in the four regions of tadpole brain decreased, especially in the medulla oblongata area, but the number of neurons gradually returned to normal level through the adaptive regulation of tadpole itself.
【學位授予單位】：沈陽師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R114

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