發(fā)布時(shí)間：2018-05-07 18:42

  本文選題：電磁脈沖 + 小鼠��； 參考：《第四軍醫(yī)大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：電磁脈沖（Electromagneticpulse,EMP）作為一種特殊的高能復(fù)合電磁波，應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)展，其生物學(xué)效應(yīng)和相關(guān)的作用機(jī)制已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)之一。免疫系統(tǒng)是機(jī)體抵御外來(lái)侵襲和損傷的主要防御體系，通過(guò)抗原的識(shí)別和應(yīng)答，免疫防御、免疫監(jiān)視和免疫自穩(wěn)等機(jī)制維持機(jī)體的穩(wěn)態(tài)。因此研究電磁輻射對(duì)免疫系統(tǒng)的作用具有重要的意義。既往研究發(fā)現(xiàn)，電磁輻射對(duì)各種免疫細(xì)胞的增殖和凋亡和功能有不同程度的影響。目前有關(guān)電磁脈沖對(duì)T淋巴細(xì)胞作用的相關(guān)研究報(bào)道不多。 目的：探討電磁脈沖對(duì)T淋巴細(xì)胞的影響及機(jī)制。 方法： 一、在體實(shí)驗(yàn) 選用電磁脈沖輻射源(場(chǎng)強(qiáng)200kV/m,脈沖前沿3.5ns，脈寬14ns，重復(fù)頻率1Hz)對(duì)雄性BALB/c小鼠進(jìn)行輻照，每天照射400次，連續(xù)照射7天，于照后不同時(shí)間處死小鼠觀察以下指標(biāo)： 1.取胸腺和脾臟，用HE染色法觀察其組織形態(tài)的改變； 2.處死前稱取小鼠的體重、處死后對(duì)胸腺和脾臟進(jìn)行稱重，計(jì)算胸腺、脾臟指數(shù)；提取胸腺和脾臟淋巴細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，，觀察淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化； 3.通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)脾臟淋巴細(xì)胞中的T、B淋巴細(xì)胞比例的變化； 4.通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)脾臟淋巴細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期的改變； 5.通過(guò)Migrationassay實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)EMP照射不同次數(shù)（0次、100次、200次、400次），照后不同時(shí)間（1、3、7、14、28天），脾臟淋巴細(xì)胞遷移能力的變化； 6.通過(guò)ELISA法檢測(cè)脾臟組織液中的SDF-1的表達(dá)水平； 7.通過(guò)Westernblotting實(shí)驗(yàn)檢測(cè)脾臟淋巴細(xì)胞p-AKT的表達(dá)水平。 二、離體細(xì)胞實(shí)驗(yàn) 用相同的EMP源輻照J(rèn)urkatT細(xì)胞，觀察以下指標(biāo)： 1.EMP照射0次（對(duì)照組）、100次、200次、400次；照后0h（對(duì)照組）、1h、3h、6h、12h、24h,通過(guò)Migrationassay檢測(cè)JurkatT細(xì)胞遷移能力的變化； 2.用流式細(xì)胞儀檢測(cè)EMP照后JurkatT細(xì)胞膜上CXCR4的表達(dá)水平的改變； 3.用Westernblotting法檢測(cè)JurkatT細(xì)胞PI3K、p-AKT、PAK1、Rac1表達(dá)水平的變化。4.采用ELISA方法檢測(cè)JurkatT細(xì)胞IL-4和IFN-γ表達(dá)水平的變化。 結(jié)果: 1.BALB/c小鼠在EMP輻照后，（1）胸腺結(jié)構(gòu)沒有顯著的變化；輻照3 天后，脾臟血竇擴(kuò)張，充血明顯，脾小體結(jié)構(gòu)不清；（2）胸腺指數(shù)變化沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；脾臟指數(shù)呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，在照后第3、7天輻照組的脾臟指數(shù)高于對(duì)照組；胸腺淋巴細(xì)胞數(shù)的變化與對(duì)照組沒有顯著差異；脾臟淋巴細(xì)胞數(shù)在照后第3和7天，輻照組淋巴細(xì)胞數(shù)多于對(duì)照組；（3）輻照組脾臟中的T淋巴細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組相比顯著增加，B淋巴細(xì)胞數(shù)改變不顯著；（4）輻照組和對(duì)照組脾臟淋巴細(xì)胞的凋亡數(shù)量和細(xì)胞周期的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（5）400次EMP輻照組的淋巴細(xì)胞的遷移能力與對(duì)照組相比明顯增加，照后1、3、7天脾臟淋巴細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)；（6）EMP輻照后脾臟中的SDF-1表達(dá)量升高；（7）脾臟淋巴細(xì)胞的p-AKT的表達(dá)也相應(yīng)的增加。 2.JurkatT細(xì)胞在EMP輻照后，（1）200次EMP輻照組的細(xì)胞遷移能力增加顯著；照后1h、3h、6h的細(xì)胞趨化能力與對(duì)照組相比增加明顯；（2）輻照后6h，JurkatT細(xì)胞表面CXCR4的表達(dá)量高于對(duì)照組；（3）JurkatT細(xì)胞PI3K、p-AKT、PAK1、Rac1表達(dá)水平的變化與趨化能力的時(shí)間變化特征基本一致；（4）JurkatT細(xì)胞的IL-4的表達(dá)在照后3h、6h增高；IFN-γ在照后1h、3h、6h表達(dá)增加。 結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)條件下，電磁脈沖對(duì)雄性BALB/c小鼠胸腺的作用不敏感，但對(duì)脾臟作用顯著。脾臟的組織結(jié)構(gòu)遭到一定的破壞；脾臟重量增大，脾臟淋巴細(xì)胞數(shù)量增加，增加的主要是T淋巴細(xì)胞；但是淋巴細(xì)胞的凋亡和細(xì)胞周期沒有顯著的改變；脾臟中的趨化因子表達(dá)增加，脾臟淋巴細(xì)胞的遷移能力增強(qiáng)。JurkatT細(xì)胞的遷移能力也增強(qiáng)，細(xì)胞免疫功能活化。
[Abstract]:Electromagneticpulse (EMP), as a special high-energy compound electromagnetic wave, has been widely used in the field of application. Its biological effects and related mechanisms have become one of the hotspots of research at home and abroad. The immune system is the main defense system for resisting the invasion and injury of the body and through the recognition and response of the antigen. The mechanisms of immune defense, immune surveillance and immune self stability maintain the homeostasis of the body. Therefore, it is of great significance to study the effect of electromagnetic radiation on the immune system. Previous studies have found that electromagnetic radiation affects the proliferation, apoptosis and function of various immune cells in varying degrees. At present, the effects of electromagnetic pulse on T lymphocyte There are few reports on the study.
Objective: To investigate the effect and mechanism of electromagnetic pulse on T lymphocytes.
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本文編號(hào)：1858040