本文選題：魚油 + n-3多不飽和脂肪酸��； 參考：《江蘇大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:眾多的研究表明,高攝入飽和脂肪酸,尤其是n-6不飽和脂肪酸可促進(jìn)慢性炎癥及相關(guān)疾病的發(fā)生,如心血管疾病。有報(bào)道表明魚油中富含大量的n-3多不飽和脂肪酸,該n-3多不飽和脂肪酸有明顯的抑炎效應(yīng),在一定程度上可以預(yù)防高脂飲食引起的心血管等慢性疾病的發(fā)生、發(fā)展。但這大都源自較低水平攝入n-3不飽和脂肪酸的研究結(jié)果,而高攝入n-3不飽和脂肪酸對(duì)于機(jī)體的影響,尤其是對(duì)于肝臟、補(bǔ)體及腸道菌群等的影響尚不清楚。本文利用小鼠為模型研究了高魚油攝入對(duì)以上所述補(bǔ)體等的影響,以期探討高攝入n-3不飽和脂肪酸對(duì)機(jī)體的影響。方法:(1)將適齡C57BL/6小鼠隨機(jī)分成兩組:低脂正常飲食組(LFD)和高n-3PUFAs魚油飲食組(FO)。每組小鼠分別給予4周的低脂正常飲食或高n-3PUFAs魚油飲食。為期4周不同飲食后,用分析天平分別稱取各組小鼠體重、脾臟重量以及肝臟重量,同時(shí)觀察小鼠腸系膜淋巴結(jié)的肉眼變化,并拍照。(2)采用流式細(xì)胞術(shù)分析兩組小鼠肝臟中CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD11b+Gr-1+細(xì)胞比例變化。肝臟組織切片進(jìn)行HE染色觀察。小鼠肝臟中IL-1β、IL-6和MCP-1等炎癥相關(guān)因子的變化,采用熒光定量PCR的方法測(cè)定。(3)收集小鼠肝臟及血清,采用ELISA的方法測(cè)定總補(bǔ)體活性(CH50)、膜攻擊復(fù)合物(MAC)以及補(bǔ)體C3的含量。熒光定量PCR法測(cè)定了補(bǔ)體激活經(jīng)典途徑(CP)、旁路途徑(AP)以及MBL途徑中重要補(bǔ)體分子的表達(dá)量,比如C3、C4b、C1qb、CFB、CFH、MASP1等。兩組小鼠腸系膜淋巴結(jié)、脾臟、肝臟、外周血中補(bǔ)體受體CR3、CR4的表達(dá)水平,利用流式細(xì)胞術(shù)探究。(4)4周不同飲食后,收集小鼠糞便,利用高通量Miseq測(cè)序技術(shù)以及相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法,定量分析腸道內(nèi)微生物結(jié)構(gòu)特征,包括OTUs聚類分析和樣品復(fù)雜度分析。結(jié)果:(1)高魚油飲食后,小鼠的體重并沒有發(fā)現(xiàn)明顯的變化,但脾臟重量明顯增大,并且呈現(xiàn)肉眼可見的充血腫脹變大。肝臟重量雖然沒有大的變化,但肉眼觀察也呈現(xiàn)出充血性改變。同時(shí),高魚油組小鼠的腸系膜淋巴結(jié)與低脂組小鼠白色、光滑、透明的腸系膜淋巴結(jié)相比,變黃、變粘連、變得有油膩感。(2)在高魚油飲食后,經(jīng)流式分析顯示,CD4+T細(xì)胞比例增加,CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞比例發(fā)生了倒置。高魚油飲食組小鼠肝臟中,不管是CD11b+Gr-1hi細(xì)胞還是CD11b+Gr-1int細(xì)胞都發(fā)生了明顯增加。這一結(jié)果也在肝臟組織切片中得以驗(yàn)證,肝臟組織切片中呈現(xiàn)出更多的炎性細(xì)胞。同樣炎癥相關(guān)因子IL-1β、IL-6和MCP-1的m RNA轉(zhuǎn)錄水平也明顯增高。(3)經(jīng)ELISA分析,在高魚油組小鼠中,總補(bǔ)體活性(CH50)、膜攻擊復(fù)合物(MAC)以及補(bǔ)體C3含量明顯增加。熒光定量PCR結(jié)果顯示,補(bǔ)體C3、C4b、C1qb、CFB m RNA水平增加,CFH表達(dá)量下降,MASP1表達(dá)量沒有明顯變化。同時(shí),高魚油飲食后,補(bǔ)體受體CR3在腸系膜淋巴結(jié)和脾臟中高表達(dá),在肝臟和外周血中變化不明顯。而補(bǔ)體受體CR4表達(dá)水平?jīng)]有發(fā)生明顯的變化。(4)Miseq測(cè)序結(jié)果顯示,高魚油組小鼠腸道內(nèi)菌群多樣性較低脂飲食組降低,同時(shí)Bacteroidetes(擬桿菌門)明顯下降,出現(xiàn)了新的優(yōu)勢(shì)菌群Akkermansia菌屬。結(jié)論:高魚油飲食促進(jìn)肝臟炎癥的發(fā)生,并且激活了補(bǔ)體系統(tǒng),同時(shí)也影響了腸道內(nèi)微生物的種群結(jié)構(gòu),改變了腸道菌群的種類多樣性。
[Abstract]:Objective : To study the effects of high intake of n - 3 unsaturated fatty acids on human body , especially for liver , complement and intestinal flora . Results : ( 1 ) After diet of high fish oil , there was no obvious change in the body weight of mice , but the ratio of CD4 + T cells and CD8 + T cells increased significantly . ( 4 ) Miseq sequencing showed that the diversity of intestinal flora in high fish oil group was lower than that in low fat diet group , while Bacteroidetes ( bacteroidetes ) decreased significantly , and new dominant flora Akkermansia was found . Conclusion : The high fish oil diet promotes the occurrence of liver inflammation and activates the complement system , and also affects the population structure of microorganism in intestinal tract , and changes the species diversity of intestinal flora .

【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R151

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本文編號(hào)：1844703