本文選題：-二羥- + -環(huán)氧苯并[a]芘　； 參考：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報》2017年23期

【摘要】：目的探討7,8-二羥-9,10-環(huán)氧苯并[a]芘(benzo[a]pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide,BPDE)對小鼠精原細胞株GC-1的細胞毒性機制及褪黑素的保護作用。方法不同濃度BPDE處理GC-1細胞,采用Annexin V/PI染色及流式細胞儀檢測細胞凋亡,JC-1探針染色檢測線粒體膜電位,Western blot檢測細胞質(zhì)Cyt C及細胞總蛋白中caspase-9/3的活化水平,DCFH-DA探針及流式細胞儀檢測細胞內(nèi)的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。褪黑素預(yù)處理細胞后再進行BPDE染毒,采用上述方法檢測褪黑素對BPDE細胞毒性的影響。結(jié)果 BPDE可提高GC-1細胞凋亡率,存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。同時,BPDE可降低細胞線粒體膜電位,促進線粒體Cyt C的釋放,提高細胞中caspase-9和caspase-3蛋白的活化水平,并誘導(dǎo)細胞中ROS水平升高。褪黑素預(yù)處理則可降低BPDE誘導(dǎo)的細胞凋亡,抑制Cyt C的釋放及caspase-9/3的活化,并激活Nrf-2/ARE抗氧化通路,降低細胞ROS水平。結(jié)論BPDE可誘導(dǎo)小鼠精原細胞GC-1線粒體途徑細胞凋亡和氧化應(yīng)激,而褪黑素在這一過程中起保護作用。
[Abstract]:Objective to investigate the cytotoxic mechanism of 7-dioxy-8-diol-8-diol-9 10-epoxide (BPDE) on mouse spermatogonia cell line GC-1 and the protective effect of melatonin on the cytotoxicity of pyrene benzo [a] pyrene benzo (a) on mouse spermatogonia cell line GC-1. Methods GC-1 cells were treated with different concentrations of BPDE. Annexin V/PI staining and flow cytometry were used to detect apoptosis and JC-1 probe staining. Mitochondrial membrane potential was detected by Western blot to detect the activation level of Cyt C in cytoplasm and caspase-9/3 in total cell protein. DCFH-DA probe was used to detect the reactive oxygen species-ROSs in cells by flow cytometry. The effect of melatonin on the cytotoxicity of BPDE cells was detected by the method mentioned above after the cells were pretreated with melatonin and then treated with BPDE. Results BPDE could increase the apoptosis rate of GC-1 cells in a dose-effect relationship. At the same time, BPDE could decrease the mitochondrial membrane potential, promote the release of mitochondrial Cyt C, increase the activation of caspase-9 and caspase-3 protein, and induce the increase of ROS level. Melatonin pretreatment could decrease the apoptosis induced by BPDE, inhibit the release of Cyt C and the activation of caspase-9/3, activate the antioxidant pathway of Nrf-2/ARE, and decrease the level of ROS. Conclusion BPDE can induce apoptosis and oxidative stress in GC-1 mitochondria pathway of mouse spermatogonia, and melatonin plays a protective role in this process.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)軍事預(yù)防醫(yī)學(xué)院毒理學(xué)研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點項目(81130051)~~
【分類號】：R114

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本文編號：1800264