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二甲基甲酰胺通過活性氧介導(dǎo)線粒體通路誘導(dǎo)H9c2心肌細胞凋亡研究

發(fā)布時間:2018-04-18 21:08

  本文選題:二甲基甲酰胺 + 肌細胞; 參考:《中華疾病控制雜志》2017年04期


【摘要】:目的初步探討二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)是否通過線粒體通路致H9c2心肌細胞凋亡及可能機制。方法 H9c2心肌細胞體外培養(yǎng),分組給予不同處理:正常對照組,N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)(4 mmol/L)組,DMF(200 mmol/L)組,NAC(4 mmol/L)+DMF(200 mmol/L)組,24 h后使用免疫熒光細胞化學(xué)法(immune-fluorescence cytochemistry,IFC)檢測細胞內(nèi)細胞色素C(cytochrome C,Cyt-c)定位,蛋白免疫印跡法檢測胞漿Cyt-c、Bcl-2、Cleaved caspse-3水平。結(jié)果 IFC觀察發(fā)現(xiàn),正常對照及NAC組Cyt-c呈點狀或斑塊狀分布于胞漿,DMF作用24 h導(dǎo)致Cyt-c彌散分布于胞漿,而NAC可抑制DMF的這種作用;蛋白免疫印跡結(jié)果表明,Cyt-c蛋白水平組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=26.14,P0.001),與對照組相比,DMF組Cyt-c水平升高,NAC+DMF組較DMF組Cyt-c水平降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均有P0.001);Bcl-2蛋白水平組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=28.92,P0.001),與對照組相比,DMF組Bcl-2蛋白水平降低,與DMF組相比,NAC+DMF組Bcl-2蛋白水平升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均有P0.001);Cleaved caspase-3蛋白水平組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(F=28.98,P0.001)),與對照組相比,DMF組Cleaved caspase-3水平上升,NAC+DMF組較DMF組Cleaved caspase-3水平降低,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(均有P0.001)。結(jié)論 DMF可以通過線粒體通路誘導(dǎo)H9c2心肌細胞凋亡,氧化應(yīng)激可能參與該通路的發(fā)生。
[Abstract]:Aim to investigate whether dimethylformamide (DMF) can induce apoptosis of H9c2 cardiomyocytes through mitochondrial pathway and its possible mechanism.Methods H9c2 cardiomyocytes were cultured in vitro and divided into two groups: the normal control group was treated with N-acetyl-L-cysteine N-acetyl-L-cysteine (NACX / L) 4 mmol / L) group (n = 4 mmol / L). After 24 h, the cytochrome C(cytochrome (C(cytochrome) was detected by immuno-fluorescence cytochemistry.The level of cytoplasmic Cyt-c-2 Bcl-2Cleaved caspse-3 was detected by Western blot.Results IFC observation showed that the distribution of Cyt-c in the cytoplasm of normal control group and NAC group was punctate or plaques after 24 h treatment, which resulted in the distribution of Cyt-c in the cytoplasm, whereas NAC could inhibit the effect of DMF.The results of Western blot showed that there was significant difference in the level of Cyt-c protein between the two groups. Compared with the control group, the level of Cyt-c in the Cyt-c group increased and the Cyt-c level in the NAC DMF group was lower than that in the DMF group.There were significant differences between the two groups in the level of Bcl-2 protein (P 0.001). Compared with the control group, the level of Bcl-2 protein in the DMF group was lower than that in the control group, and the level of Bcl-2 protein in the DMF group was higher than that in the DMF group.The difference was statistically significant (P 0.001). The level of Cleaved caspase-3 in Cleaved DMF group was significantly lower than that in DMF group (P 0.001), and the difference was statistically significant (P 0.001). The difference was statistically significant (all P 0.001), and the difference was statistically significant (all P 0.001) compared with the control group, the level of Cleaved caspase-3 in the DMF group was significantly lower than that in the DMF group (P < 0.05), and there was no significant difference between the two groups (P > 0.05).Conclusion DMF can induce apoptosis of H9c2 cardiomyocytes through mitochondrial pathway, and oxidative stress may be involved in this pathway.
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)系;安徽國際旅行衛(wèi)生保健中心;安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院感染管理科;
【分類號】:R114

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6 郁U,

本文編號:1770056


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