本文選題：蘋果類黃酮 + LoVo和MCF-7細(xì)胞��； 參考：《陜西師范大學(xué)》2012年碩士論文

【摘要】：本論文基于合作導(dǎo)師楊興斌教授的國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目的資助,測定了粉紅女士蘋果果肉和果皮的類黃酮總含量,研究了粉紅女士蘋果類黃酮的體外抗氧化活性。以槲皮素為原料通過磺化反應(yīng)合成了兩種新的槲皮素衍生物槲皮素-5’,8-磺酸鈉(QS)和槲皮素-4',7-硫酸鈉(QOS)。選用對數(shù)生長期的人結(jié)腸癌LoVo和乳腺癌MCF-7兩種細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)對象,采用MTT法測定腫瘤細(xì)胞的存活率、LDH活力測定法評價(jià)黃酮類化合物對腫瘤細(xì)胞的毒性、利用Nikon-TS100倒置顯微鏡觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)損傷、Hoechst33258染色法在倒置熒光顯微鏡下觀察腫瘤細(xì)胞核的形態(tài)變化情況,流式細(xì)胞儀分析腫瘤細(xì)胞的周期分布和腫瘤細(xì)胞中活性氧的產(chǎn)生情況、雙變量流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞進(jìn)入早晚期的凋亡情況,研究了粉紅女士蘋果類黃酮、蘆丁、槲皮素及其衍生物槲皮素-5’,8-磺酸鈉(QS)和槲皮素-4',7-硫酸鈉(QOS)對人結(jié)腸癌LoVo和乳腺癌MCF-7的抗腫瘤活性。研究結(jié)果摘要如下： (1)粉紅女士蘋果果皮、果肉類黃酮的含量分別為24.05±0.14mg/g和10.98±0.25mg/g,類黃酮的得率分別為0.192%和0.088%。 (2)粉紅女士蘋果類黃酮具有較強(qiáng)的體外抗氧化活性,且呈濃度相關(guān)性,果皮類黃酮清除自由基的能力高于果肉類黃酮,對O2·-的清除效果最好。0.8mg/mL的果皮類黃酮對DPPH·和02·-的清除率分別為64.38%和84.84%,總還原力為0.175。 (3)粉紅女士蘋果類黃酮具有抗腫瘤活性,果皮類黃酮抑癌效果強(qiáng)于果肉類黃酮。果皮、果肉類黃酮對人結(jié)腸癌LoVo和乳腺癌MCF-7細(xì)胞的增殖抑制率和毒性隨著濃度的增加而逐漸增大,100mg/mL的果皮類黃酮對MCF-7細(xì)胞增殖的抑制率為57.25%。 (4)粉紅女士蘋果類黃酮可誘導(dǎo)LoVo及MCF-7細(xì)胞產(chǎn)生大量活性氧,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。 (5)以槲皮素為原料通過磺化反應(yīng)合成的槲皮素衍生物槲皮素-5’,8-磺酸鈉(QS)和槲皮素-4',7-硫酸鈉(QOS)具有很好的水溶性,純度97%,分子結(jié)構(gòu)式均為C15H8Na2013S2,屬于同分異構(gòu)體。 (6)槲皮素及其衍生物對人結(jié)腸癌LoVo和乳腺癌MCF-7細(xì)胞抗癌活性表現(xiàn)出劑量相關(guān)性,對乳腺癌MCF-7細(xì)胞系的敏感度高于結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞系。槲皮素、槲皮素-5',8-磺酸鈉(QS)、槲皮素-4',7-硫酸鈉(QOS)和蘆丁四種黃酮類化合物的抗癌活性強(qiáng)弱次序?yàn)椋洪纹に?5’,8-磺酸鈉(QS)槲皮素蘆丁槲皮素-4',7-硫酸鈉(QOS),100μM的槲皮素-5’,8-磺酸鈉對MCF-7細(xì)胞的增殖抑制率可達(dá)92.38%,能誘導(dǎo)90.66%的腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。
[Abstract]:In this paper, the total flavonoid contents of Pink Lady apple pulp and pericarp were determined, and the antioxidant activity of pink lady apple flavonoids in vitro was studied, based on the grant of Professor Yang Xingbin's National Natural Science Foundation.Two new Quercetin derivatives, Quercetin -5 and Sodium Quercetin 8-Sulfonate, were synthesized from quercetin by sulfonation reaction.Two cell lines, human colon cancer LoVo and breast cancer MCF-7, were used to evaluate the toxicity of flavonoids to tumor cells by MTT assay.The morphological damage of tumor cells was observed by Nikon-TS100 inverted microscope. The morphologic changes of tumor nuclei were observed under inverted fluorescence microscope by Hoechst33258 staining.Flow cytometry was used to analyze the cell cycle distribution and the production of reactive oxygen species in tumor cells.The antitumor activity of quercetin and its derivatives, quercetin -5 and sodium Quercetin 8-sulfonate (QS) and Quercetin -4 (7-Sodium Sulfate) against LoVo and MCF-7 in human colon cancer and breast cancer were studied.The findings are summarized as follows:(1) the contents of flavonoids in peel and pulp of Pink Lady apple were 24.05 鹵0.14mg/g and 10.98 鹵0.25 mg / g, respectively. The yield of flavonoid was 0.1922% and 0.088%, respectively.(2) the apple flavonoids of Pink Lady had strong antioxidant activity in vitro and showed a concentration-dependent manner. The ability of flavonoids in pericarp to scavenge free radicals was higher than that in pulp.The best scavenging effect for O2-was 0.0.8 mg / mL of pericarp flavonoids, and the removal rates of DPPH and 02- were 64.38% and 84.84%, respectively, and the total reducing power was 0.175.The anticancer activity of apple flavonoids was stronger than that of pulp flavonoids.The inhibitory rate and toxicity of pericarp and pulp flavonoids on the proliferation of human colon cancer LoVo and breast cancer MCF-7 cells increased gradually with the increase of concentration. The inhibitory rate of flavonoids in pericarp on the proliferation of MCF-7 cells was 57.25%.4) flavonoids from pink apple could induce LoVo and MCF-7 cells to produce a large amount of reactive oxygen species and promote apoptosis of tumor cells.(5) Quercetin derivatives, Quercetin derivatives, were synthesized by sulfonation reaction from quercetin (QS) and quercetin (-4) -7- sodium thiosulfate (QSs) and quercetin were synthesized by sulfonation reaction. They have good water solubility, purity 97 and molecular structure of C15H8Na2013S2, which belong to isomers of the same fractions of Quercetin and Quercetin (Quercetin) and Quercetin (Quercetin) and Quercetin (Quercetin).(6) Quercetin and its derivatives showed a dose-dependent response to the anticancer activity of human colon cancer LoVo and breast cancer MCF-7 cells, and the sensitivity of quercetin to breast cancer MCF-7 cell line was higher than that of colon cancer LoVo cell line.Quercetin,The anticancer activity of quercetin, quercetin, quercetin and rutin flavonoids are in the order of quercetin -5tachloro8-sulfonate, quercetin, rutin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, quercetin, and sodium Quercetin.Sodium inhibited the proliferation of MCF-7 cells by 92.38% and induced 90.66% of tumor cells to apoptosis.
【學(xué)位授予單位】：陜西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：S661.1;R151

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