乳源酪蛋白糖巨肽作用人結腸癌細胞HT-29調控炎癥活力研究
本文選題:酪蛋白糖巨肽 切入點:結腸癌細胞HT- 出處:《食品科學》2017年15期
【摘要】:為進一步闡釋乳源酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP)的抗炎及修復腸道炎癥的功效,本研究在確定了乳源CGMP對脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)誘導的結腸癌細胞HT-29NF-κB亞單位p65蛋白的影響和乳源CGMP調控核轉錄因子(nuclear factor,NF)-κB信號通路的基礎上,通過構建表達乳源CGMP和NF-κB必需調節(jié)蛋白(NF-κB essential modulator,NEMO)的質粒,共轉HT-29細胞,免疫共沉淀測定兩個蛋白的相互作用。最后采用線粒體膜電位法測定乳源CGMP對HT-29細胞的促凋亡作用。結果表明,乳源CGMP與NEMO(NF-κB essential modulator)30 h共轉HT-29細胞中,乳源CGMP與NEMO蛋白均表達,且表現(xiàn)出二者的相互作用。乳源CGMP可與NEMO相互作用影響NF-κB信號通路;同時乳源CGMP還促進HT-29細胞凋亡,呈時間依賴性,其中0.1μg/m L的CGMP作用效果最好。乳源CGMP與NEMO相互作用是間接作用于IκB激酶(IκB kinase,IKK)而作用于?IκB,進而影響NF-κB信號通路。研究揭示了乳源CGMP調控NF-κB信號通路的另一種途徑,也充分說明乳源CGMP可通過作用多種抗炎途徑發(fā)揮其調控作用。
[Abstract]:In order to further elucidate the anti-inflammatory effect of casein glycomacropeptidec CGMPs and the effect of repairing intestinal inflammation, In this study, we determined the effect of milk source CGMP on the p65 protein of human colon cancer cell line HT-29NF- 魏 B induced by lipopolysaccharide polysaccharide (LPSs) and the regulation of nuclear transcription factor nuclear factor nuclear factor- 魏 B signaling pathway by milk source CGMP. CGMP and NF- 魏 B essential regulatory proteins (NF- 魏 B essential modulator Nemo) were constructed and co-transformed into HT-29 cells. The interaction of two proteins was assayed by immunoprecipitation. Finally, the apoptotic effect of CGMP on HT-29 cells was determined by mitochondrial membrane potential method. The results showed that the expression of CGMP and NEMO protein in breast derived CGMP and NEMONF- 魏 B essential modulator)30 h cotransfected HT-29 cells were detected. Milk source CGMP could interact with NEMO to influence NF- 魏 B signaling pathway, and milk source CGMP could promote HT-29 cell apoptosis in a time dependent manner. The effect of 0.1 渭 g / mL CGMP was the best. The interaction of milk source CGMP and NEMO was mediated by I 魏 B kinase I 魏 B kinase (Ike). I 魏 B, which in turn affects NF- 魏 B signaling pathway. This study revealed another pathway of regulation of NF- 魏 B signaling pathway by CGMP, and fully demonstrated that milk source CGMP can play its regulatory role by acting on a variety of anti-inflammatory pathways.
【作者單位】: 天津商業(yè)大學生物技術與食品科學學院天津市食品生物技術重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金面上項目(31071522) 天津商業(yè)大學國家基金培育項目(160120)
【分類號】:R151;TS252.1
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本文編號:1694070
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