砷對(duì)人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子紅細(xì)胞系-2p45相關(guān)因子-2和Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1基因表達(dá)的影響
本文選題:亞砷酸鈉 切入點(diǎn):人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 出處:《環(huán)境與健康雜志》2015年10期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:目的探討不同劑量亞砷酸鈉對(duì)人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞(human keratinocytes cell,Ha Ca T)Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白-1(Keap1)和核轉(zhuǎn)錄因了紅細(xì)胞系-2 p45相關(guān)因子-2(Nrf2)基因表達(dá)的影響。方法將Ha Ca T細(xì)胞分別暴露于終濃度為0(對(duì)照)、1.30、3.25、6.50μmol/L的亞砷酸鈉培養(yǎng)基中培養(yǎng)24、48、72 h。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Ha Ca T細(xì)胞凋亡率,采用實(shí)時(shí)熒光定量(real-time quantitative PCR)檢測(cè)Ha Ca T細(xì)胞中Nrf2、Keap1 m RNA的表達(dá)水平。結(jié)果與對(duì)照組相比,1.30μmol/L亞砷酸鈉染毒24 h后Ha Ca T細(xì)胞的凋亡率降低,而3.25、6.50μmol/L亞砷酸鈉染毒48、72 h后Ha Ca T細(xì)胞的凋亡率升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);且隨著亞砷酸鈉染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的升高,Ha Ca T細(xì)胞的凋亡率均呈上升趨勢(shì)。與對(duì)照組相比,1.30μmol/L亞砷酸鈉染毒24、48、72 h和3.25μmol/L亞砷酸鈉染毒24 h后Ha Ca T細(xì)胞中Nrf2 m RNA的表達(dá)水平均增高,而3.25、6.50μmol/L亞砷酸鈉染毒72 h后Ha Ca T細(xì)胞中Nrf2 m RNA的表達(dá)水平均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);且隨著亞砷酸鈉染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的升高,Ha Ca T細(xì)胞Nrf2 m RNA的表達(dá)水平均呈下降趨勢(shì)。與對(duì)照組相比,1.30、3.25μmol/L亞砷酸鈉染毒72 h和3.25、6.50μmol/L亞砷酸鈉染毒48 h后Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平均增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。隨著亞砷酸鈉染毒時(shí)間的延長(zhǎng),1.30μmol/L亞砷酸鈉染毒組Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平呈波動(dòng)性上升,3.25μmol/L亞砷酸鈉染毒組Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平呈逐漸上升趨勢(shì),6.50μmol/L亞砷酸鈉染毒組Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平呈先上升后下降;隨著亞砷酸鈉染毒劑量的升高,24、72 h時(shí)Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平呈下降趨勢(shì),而48 h時(shí)Ha Ca T細(xì)胞中Keap1 m RNA的表達(dá)水平呈上升趨勢(shì)。結(jié)論亞砷酸鈉可抑制Ha Ca T細(xì)胞的生長(zhǎng),誘導(dǎo)凋亡和角化的發(fā)生,其機(jī)制可能與Nrf2和Keap1基因的表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of different doses of sodium arsenite on the gene expression of human immortalized keratinocytes, human keratinocytes cell Ha Ca Tntnka-like epichlorohydrin associated protein -1keap1) and nuclear transcription factor -2 p45 related factor -2nrf2. Methods Ha Ca T was used to induce the expression of Ha-Ca T gene in human immortalized keratinocytes. The cells were exposed to sodium arsenite culture medium with a final concentration of 0 (1.30 ~ 3.256.50 渭 mol/L) for 24 ~ 4872 h. The apoptosis rate of Ha Ca T cells was detected by flow cytometry. The expression of Nrf2keap1 m RNA in Ha Ca T cells was detected by real-time quantitative. Results compared with the control group, the apoptosis rate of Ha Ca T cells was decreased after exposure to 1.30 渭 mol/L sodium arsenite for 24 h. However, the apoptosis rate of Ha Ca T cells was increased after exposure to 3.25 ~ 6.50 渭 mol/L sodium arsenite for 48 ~ 72 h. The difference was statistically significant (P 0.05), and with the prolongation of sodium arsenite exposure time and the increase of dose of sodium arsenite, the apoptotic rate of Ha-Ca T cells showed an increasing trend. Compared with the control group, sodium arsenite was exposed to sodium arsenite at 1.30 渭 mol/L for 2448.72h and 3.25 渭 mol/L for sodium arsenite. The expression of Nrf2 m RNA in Ha Ca T cells increased 24 h after toxicity. However, the expression of Nrf2 m RNA in Ha Ca T cells decreased 72 h after exposure to 3.25 ~ 6.50 渭 mol/L sodium arsenite. The difference was statistically significant (P 0.05), and with the prolongation of sodium arsenite exposure time and the increase of dose, the expression of Nrf2 m RNA in Ha Ca T cells decreased. Compared with the control group, sodium arsenite was exposed to 1.30 ~ 3.25 渭 mol/L for 72 h and 3.25 渭 mol/L 6.50 渭 mol/L. The expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells increased 48 h after exposure to sodium acid. With the prolongation of sodium arsenite exposure time, the expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells was increased with the prolongation of sodium arsenite exposure to 1. 30 渭 mol/L. The expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells was increased by 3.25 渭 mol/L sodium arsenite. The expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells increased at first and then decreased in sodium arsenite exposed to 6.50 渭 mol/L. The expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells decreased with the increase of sodium arsenite exposure for 2472 h. The expression of Keap1 m RNA in Ha Ca T cells increased at 48 h. Conclusion Sodium arsenite can inhibit the growth of Ha Ca T cells, induce apoptosis and keratogenesis, and its mechanism may be related to the expression of Nrf2 and Keap1 genes.
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)勞動(dòng)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81560513;81260410) 教育部高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)基金(20126517110002;20126517120003)
【分類(lèi)號(hào)】:R114
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,本文編號(hào):1562915
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