本文關(guān)鍵詞： 細顆粒物 人角質(zhì)細胞 促炎癥作用 過敏反應(yīng)　出處：《毒理學雜志》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的觀察細顆粒物PM_(2.5)對人角質(zhì)細胞HaCaT的促炎癥作用和過敏反應(yīng)的影響。方法在霧霾天氣和沙塵暴天氣下分別收集PM_(2.5),用多次超聲水浴法提取PM_(2.5)全顆粒,霧霾天氣和沙塵暴天氣下收集制備的PM_(2.5)分別記為PM_(2.5)non-dust即PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)dust即PM_(2.5)(D)。實驗組分為PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)及PM_(2.5)+2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzol,DNCB)聯(lián)合作用組,采用MTT實驗、實時熒光定量PCR實驗、ELISA檢測測定各處理組作用后細胞存活率、相關(guān)促炎癥因子IL-18、IL-1α、TNF-α表達變化。結(jié)果與對照組相比HaCaT細胞經(jīng)各組處理后的細胞存活率差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。HaCaT細胞經(jīng)PM_(2.5)(N)處理后,IL-1α、TNFα的胞內(nèi)mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);而經(jīng)PM_(2.5)(D)處理后IL-1α、TNFα的表達明顯增加,變化倍數(shù)分別上調(diào)為2.65倍(P0.01)、1.69倍(P0.05);HaCaT細胞經(jīng)PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)處理后IL-18的胞外釋放量與對照相比均有顯著增加(P0.01),而胞內(nèi)表達水平存在差異;且PM_(2.5)預處理可明顯拮抗化學致敏劑DNCB導致的IL-18細胞外蛋白含量增加(P0.05)。顆粒物組分分析顯示,TNF-α的產(chǎn)生與PAHs(r=0.929)、WSOC(r=0.905)成正相關(guān);而IL-18和IL-1α的產(chǎn)生與PAHs(r=-0.901,r=-0.864)、WSOC(r=-0.847,r=-0.919)成負相關(guān)。結(jié)論本研究表明了不同組分PM_(2.5)引發(fā)皮膚角質(zhì)細胞免疫反應(yīng)的異同;沙塵天氣比霧霾天氣的PM_(2.5)可能具有更強的促炎癥效應(yīng);而霧霾天氣的PM_(2.5)的致敏反應(yīng)可能更為持久,顆粒物的致敏反應(yīng)可能通過TLR2/4等促免疫通路導致。
[Abstract]:Objective to observe the effects of fine particulate matter (PMSP 2.5) on the inflammatory and allergic reaction of human keratinocytes (HaCaT). Methods under the weather of haze and sandstorm, PMS2.5 was collected and extracted by ultrasonic water bath. Haze and dust storms were recorded as PM_(2.5)non-dust. The experimental group was divided into two groups: PMV2.5D and PMS-2.5-D). The experimental group was divided into two groups: 24-dinitrochlorobenzolium (DNCBB) and 24-dinitrochlorobenzolium (DNCBB), and the experimental group was divided into two groups, namely, PM2. 5 (DNCBs) and PM20 (2. 4 dinitrochlorobenzolium DNCBs). The experimental group was divided into two groups: PM2. 5 (DNCBs) and PM20 (24-dinitrochlorobenzolium) (DNCBs). Real-time fluorescence quantitative PCR assay and Elisa were used to detect the survival rate of the treated cells. Results compared with the control group, there was no significant difference in the cell survival rate of HaCaT cells treated with P0.05N. HaCaT cells were treated with P0.05N. There was no significant difference in the intracellular mRNA expression of IL-1 偽 -TNF- 偽 after treated with P0.05. HaCaT cells were compared with the control group (P0.05), and there was no significant difference in the expression of mRNA between the two groups after the treatment of IL-18 and IL-1 偽, compared with the control group, there was no significant difference in the intracellular mRNA expression between the two groups. The expression of IL-1 偽 -TNF- 偽 was significantly increased after the treatment of PMC 2.5, and the expression of TNF- 偽 was significantly increased after treatment. The changes were increased to 2.65 times (P 0.01) and 1.69 times (P 0.05). The extracellular release of IL-18 was significantly higher than that of the control, and the intracellular expression level was different between the two groups. In addition, P0. 05) pretreatment could significantly antagonize the increase of extracellular protein content of IL-18 induced by chemical sensitizer DNCB. The analysis of particulate composition showed that there was a positive correlation between the production of TNF- 偽 and the production of PAHs / TNF- 偽 (0. 905). However, the production of IL-18 and IL-1 偽 was negatively correlated with the expression of IL-18 and IL-1 偽 in the skin keratinocytes. Conclusion the results show that the IL-18 and IL-1 偽 may have a stronger inflammatory effect on the skin keratinocytes than those on the haze weather, and that the different components of PMS-2.5) may have a stronger pro-inflammatory effect than that of the PMS-0.901r-0.864. Conclusion the present study shows that the different components of PMS-2.5) induce the keratinocyte immune response of the skin, and that the sand dust weather may have a stronger pro-inflammatory effect than that of the haze weather. However, the sensitizing reaction of haze may be more persistent, and the sensitization of particulate matter may be caused by TLR2/4 and other immune pathways.
【作者單位】： 北京大學公共衛(wèi)生學院;南京大學模式動物研究所;
【基金】：國家自然科學基金(21577004) 北京大學青年人才基金(BMU20130340) 北京市自然科學基金(7162104)
【分類號】：R122

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本文編號：1528900