本文關(guān)鍵詞： 細(xì)顆粒物 人角質(zhì)細(xì)胞 促炎癥作用 過(guò)敏反應(yīng)　出處：《毒理學(xué)雜志》2017年02期 　論文類(lèi)型：期刊論文

【摘要】：目的觀察細(xì)顆粒物PM_(2.5)對(duì)人角質(zhì)細(xì)胞HaCaT的促炎癥作用和過(guò)敏反應(yīng)的影響。方法在霧霾天氣和沙塵暴天氣下分別收集PM_(2.5),用多次超聲水浴法提取PM_(2.5)全顆粒,霧霾天氣和沙塵暴天氣下收集制備的PM_(2.5)分別記為PM_(2.5)non-dust即PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)dust即PM_(2.5)(D)。實(shí)驗(yàn)組分為PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)及PM_(2.5)+2,4-二硝基氯苯(2,4-dinitrochlorobenzol,DNCB)聯(lián)合作用組,采用MTT實(shí)驗(yàn)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)、ELISA檢測(cè)測(cè)定各處理組作用后細(xì)胞存活率、相關(guān)促炎癥因子IL-18、IL-1α、TNF-α表達(dá)變化。結(jié)果與對(duì)照組相比HaCaT細(xì)胞經(jīng)各組處理后的細(xì)胞存活率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HaCaT細(xì)胞經(jīng)PM_(2.5)(N)處理后,IL-1α、TNFα的胞內(nèi)mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而經(jīng)PM_(2.5)(D)處理后IL-1α、TNFα的表達(dá)明顯增加,變化倍數(shù)分別上調(diào)為2.65倍(P0.01)、1.69倍(P0.05);HaCaT細(xì)胞經(jīng)PM_(2.5)(N)、PM_(2.5)(D)處理后IL-18的胞外釋放量與對(duì)照相比均有顯著增加(P0.01),而胞內(nèi)表達(dá)水平存在差異;且PM_(2.5)預(yù)處理可明顯拮抗化學(xué)致敏劑DNCB導(dǎo)致的IL-18細(xì)胞外蛋白含量增加(P0.05)。顆粒物組分分析顯示,TNF-α的產(chǎn)生與PAHs(r=0.929)、WSOC(r=0.905)成正相關(guān);而IL-18和IL-1α的產(chǎn)生與PAHs(r=-0.901,r=-0.864)、WSOC(r=-0.847,r=-0.919)成負(fù)相關(guān)。結(jié)論本研究表明了不同組分PM_(2.5)引發(fā)皮膚角質(zhì)細(xì)胞免疫反應(yīng)的異同;沙塵天氣比霧霾天氣的PM_(2.5)可能具有更強(qiáng)的促炎癥效應(yīng);而霧霾天氣的PM_(2.5)的致敏反應(yīng)可能更為持久,顆粒物的致敏反應(yīng)可能通過(guò)TLR2/4等促免疫通路導(dǎo)致。
[Abstract]:Objective to observe the effects of fine particulate matter (PMSP 2.5) on the inflammatory and allergic reaction of human keratinocytes (HaCaT). Methods under the weather of haze and sandstorm, PMS2.5 was collected and extracted by ultrasonic water bath. Haze and dust storms were recorded as PM_(2.5)non-dust. The experimental group was divided into two groups: PMV2.5D and PMS-2.5-D). The experimental group was divided into two groups: 24-dinitrochlorobenzolium (DNCBB) and 24-dinitrochlorobenzolium (DNCBB), and the experimental group was divided into two groups, namely, PM2. 5 (DNCBs) and PM20 (2. 4 dinitrochlorobenzolium DNCBs). The experimental group was divided into two groups: PM2. 5 (DNCBs) and PM20 (24-dinitrochlorobenzolium) (DNCBs). Real-time fluorescence quantitative PCR assay and Elisa were used to detect the survival rate of the treated cells. Results compared with the control group, there was no significant difference in the cell survival rate of HaCaT cells treated with P0.05N. HaCaT cells were treated with P0.05N. There was no significant difference in the intracellular mRNA expression of IL-1 偽 -TNF- 偽 after treated with P0.05. HaCaT cells were compared with the control group (P0.05), and there was no significant difference in the expression of mRNA between the two groups after the treatment of IL-18 and IL-1 偽, compared with the control group, there was no significant difference in the intracellular mRNA expression between the two groups. The expression of IL-1 偽 -TNF- 偽 was significantly increased after the treatment of PMC 2.5, and the expression of TNF- 偽 was significantly increased after treatment. The changes were increased to 2.65 times (P 0.01) and 1.69 times (P 0.05). The extracellular release of IL-18 was significantly higher than that of the control, and the intracellular expression level was different between the two groups. In addition, P0. 05) pretreatment could significantly antagonize the increase of extracellular protein content of IL-18 induced by chemical sensitizer DNCB. The analysis of particulate composition showed that there was a positive correlation between the production of TNF- 偽 and the production of PAHs / TNF- 偽 (0. 905). However, the production of IL-18 and IL-1 偽 was negatively correlated with the expression of IL-18 and IL-1 偽 in the skin keratinocytes. Conclusion the results show that the IL-18 and IL-1 偽 may have a stronger inflammatory effect on the skin keratinocytes than those on the haze weather, and that the different components of PMS-2.5) may have a stronger pro-inflammatory effect than that of the PMS-0.901r-0.864. Conclusion the present study shows that the different components of PMS-2.5) induce the keratinocyte immune response of the skin, and that the sand dust weather may have a stronger pro-inflammatory effect than that of the haze weather. However, the sensitizing reaction of haze may be more persistent, and the sensitization of particulate matter may be caused by TLR2/4 and other immune pathways.
【作者單位】： 北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;南京大學(xué)模式動(dòng)物研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(21577004) 北京大學(xué)青年人才基金(BMU20130340) 北京市自然科學(xué)基金(7162104)
【分類(lèi)號(hào)】：R122

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本文編號(hào)：1528900