香煙煙霧對(duì)小鼠卵母細(xì)胞染色質(zhì)構(gòu)型、DNA甲基化及相關(guān)基因表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞: 香煙煙霧 染色質(zhì)構(gòu)型 DNA甲基化 小鼠卵母細(xì)胞 出處:《衛(wèi)生研究》2017年02期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討香煙煙霧暴露對(duì)小鼠卵母細(xì)胞染色質(zhì)構(gòu)型、全基因組DNA甲基化及相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法將清潔級(jí)健康ICR雌鼠分成3組(對(duì)照組和香煙煙霧低劑量組、高劑量組),分別置于點(diǎn)燃0、1、2支香煙的染毒柜(容積18 L)中,每天2次,每次1 h,共4周。利用Hoechst 33342對(duì)細(xì)胞核染色,觀察卵母細(xì)胞質(zhì)量及染色質(zhì)構(gòu)型;間接免疫熒光法分析卵母細(xì)胞全基因組DNA甲基化模式,實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定卵母細(xì)胞DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNA methyltransferases,DNMT)1、DNMT3a及DNMT3b基因的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果隨著煙霧濃度的升高,去透明帶卵母細(xì)胞直徑顯著減小(P0.05),核仁未包圍(non surrounded nucleolus,NSN)染色質(zhì)構(gòu)型比例明顯升高(P0.05)。高劑量組卵母細(xì)胞DNA甲基化水平顯著下降(P0.05)。隨煙霧濃度升高DNMT1表達(dá)量降低,DNMT3b在高劑量組中表達(dá)水平顯著降低(P0.05)。結(jié)論香煙煙霧暴露可能通過改變卵母細(xì)胞染色質(zhì)構(gòu)型,降低DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的表達(dá),使DNA甲基化水平下降,從而降低卵母細(xì)胞質(zhì)量。
[Abstract]:Objective to study the chromatin configuration of mouse oocytes after cigarette smoke exposure. Methods healthy female ICR mice were divided into three groups (control group, low dose cigarette smoke group and high dose group). Hoechst 33342 staining was used to observe the oocyte quality and chromatin configuration of the 2 cigarettes in the exposure cabinet (volume 18 L) twice a day for 1 hour for 4 weeks. The genomic DNA methylation pattern of oocytes was analyzed by indirect immunofluorescence assay. Real time fluorescence quantitative PCR was used to detect DNA methyltransferase (DNA) methyltransferasone (DNMT-1) in oocytes. Results with the increase of smoke concentration, the diameters of pellucida oocytes decreased significantly (P0.05). Nucleoli were not surrounded by surrounded nucleolus. The ratio of chromatin configuration of NSNs increased significantly (P 0.05). The DNA methylation level of oocytes in high dose group decreased significantly (P 0.05). The expression of DNMT1 decreased with the increase of smoke concentration. Conclusion cigarette smoke exposure may decrease the expression of DNA methyltransferase by changing the chromatin configuration of oocytes. Reduce the DNA methylation level, thereby reducing the quality of oocytes.
【作者單位】: 皖南醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物教研室皖南醫(yī)學(xué)院遺傳研究室活性生物大分子研究安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:安徽省教育廳自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.KJ2016A735) 皖南醫(yī)學(xué)院校中青年自然科學(xué)研究項(xiàng)目(No.WK201511)
【分類號(hào)】:R114
【正文快照】: 卵母細(xì)胞的發(fā)育過程對(duì)外部環(huán)境非常敏感,機(jī)體攝入環(huán)境毒物后,可在生殖系統(tǒng)中積累,損害生殖能力[1]。香煙煙霧包含尼古丁、焦油、煙堿等多種有害物質(zhì),是危害女性生殖健康的重要環(huán)境因素。在我國,高達(dá)64.3%非吸煙女性遭受被動(dòng)吸煙的危害[2]。流行病學(xué)研究顯示,主動(dòng)或被動(dòng)吸煙可
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