本文關(guān)鍵詞：三甲基氯化錫（TMT）對大鼠神經(jīng)行為及氧化應(yīng)激的影響　出處：《華中科技大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： TMT 神經(jīng)毒性 神經(jīng)行為 Nissl體 氧化應(yīng)激

【摘要】：三甲基氯化錫（trimethyltin chloride，TMT）作為一種塑料生產(chǎn)過程中有機(jī)錫穩(wěn)定劑副產(chǎn)物，隨著PVC材料的廣泛應(yīng)用而使人群暴露于其的機(jī)會大大增加，其中毒事件時有發(fā)生，嚴(yán)重威脅著人們的健康。因此，對于TMT致神經(jīng)毒性的機(jī)制研究十分必要，不僅具有理論意義，豐富和完善TMT中毒的理論，為相關(guān)研究提供線索和依據(jù)，而且具有很重要的實(shí)際意義，為TMT衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的制定和中毒的診斷和防治提供參考資料。 本文擬在本實(shí)驗(yàn)室前期研究的基礎(chǔ)上，分以下兩部分展開TMT致神經(jīng)毒性機(jī)制的研究。第一部分建立重復(fù)劑量TMT急性經(jīng)口中毒模型，利用神經(jīng)行為學(xué)方法從整體水平上評價其神經(jīng)行為毒性，并通過組織病理學(xué)方法從組織細(xì)胞水平上觀察其神經(jīng)結(jié)構(gòu)的改變，以期尋找TMT致神經(jīng)毒性的早期敏感指標(biāo)和病理基礎(chǔ)。第二部分檢測TMT對大鼠血清及腦組織氧化抗氧化系統(tǒng)的影響，從分子水平上進(jìn)一步探索其中毒的氧化應(yīng)激機(jī)制，為TMT毒作用機(jī)制研究以及國家標(biāo)準(zhǔn)制定提供參考依據(jù)。 第一部分TMT對大鼠神經(jīng)行為的影響 目的：建立大鼠重復(fù)劑量TMT急性經(jīng)口中毒模型；評價TMT對大鼠神經(jīng)行為學(xué)影響；觀察TMT致腦組織神經(jīng)結(jié)構(gòu)的改變。方法：健康成年雄性SD大鼠按體重隨機(jī)分為：對照組（雙蒸水）、低劑量組（0.75mg/kg）、中劑量組（1.50mg/kg）及高劑量組（3.00mg/kg）4個TMT染毒組，每組10只，每天經(jīng)口灌胃染毒一次，共6天，建立整體動物模型。采用前肢握力評分、后肢撐力和平衡木行走試驗(yàn)評分及甩尾系數(shù)等四個神經(jīng)運(yùn)動及感覺功能指標(biāo)評價TMT的神經(jīng)行為毒性。末次染毒24h后處死大鼠，分離腦組織制作石蠟切片，尼氏染色法觀察。 結(jié)果：（1）一般行為毒性表現(xiàn)：高劑量組大鼠在第4天出現(xiàn)輕微的神經(jīng)興奮癥狀，第6天可觀察到震顫、四肢僵直無力、癲癇發(fā)作、抽搐等明顯的中樞興奮性神經(jīng)毒性表現(xiàn)；中劑量組大鼠于第5、6天可觀察到輕微神經(jīng)興奮毒性表現(xiàn)；低劑量組、對照組則未觀察到明顯異常。（2）體重：與對照組相比，高劑量組大鼠體重在染毒后第4、5、6天體重明顯下降（P 0.01），中、低劑量組體重均無明顯異常，對照組體重正常增加。（3）臟器系數(shù):與對照組相比，高劑量組大鼠心，腦，肺，腎，睪丸臟器系數(shù)均明顯變大（P 0.05），脾的臟器系數(shù)明顯減少（P 0.05），中劑量組大鼠脾和腎臟的臟器系數(shù)也有所增加（P 0.05），低劑量組則無明顯變化。（4）神經(jīng)行為毒性表現(xiàn)：①前肢握力評分：高劑量組大鼠評分在第4天開始下降，，第5、6天降低更加明顯（P 0.01），無第三肢攀上鋼絲；中劑量組評分有所降低（P 0.05），偶有第三肢攀上鋼絲；低劑量組和正常組則無明顯變化，均有第三肢攀上鋼絲。②后肢撐力實(shí)驗(yàn)：與對照組相比，高劑量組大鼠后肢撐力系數(shù)在染毒后第4、5、6天下降明顯（P 0.01），中、低劑量組無明顯變化。③釘板平衡木行走實(shí)驗(yàn)評分：與對照組相比，高劑量組大鼠評分于第3天開始增高（P 0.05），第4天評分明顯增高（P0.01），部分大鼠不能完成實(shí)驗(yàn)，第5天不能完成實(shí)驗(yàn)的大鼠增多，部分大鼠甚至無法在平衡木上站立，平衡能力下降，第6天基本上都不能完成平衡木行走實(shí)驗(yàn)，評分顯著增高（P 0.01）；中劑量組大鼠第5、6天有個別大鼠不能完成實(shí)驗(yàn)，評分增加明顯（P 0.05）；低劑量組大鼠均能完成實(shí)驗(yàn)，評分無明顯變化。④甩尾實(shí)驗(yàn)：高劑量組大鼠甩尾系數(shù)在染毒后第5、6天明顯增加（P 0.05），中、低劑量組則無明顯變化。（5）Nissl染色：①大腦皮層：對照組大鼠皮層神經(jīng)細(xì)胞密集，染色深，結(jié)構(gòu)較規(guī)則，分布均勻，尼氏小體清晰可辨，數(shù)量較多；高劑量組神經(jīng)細(xì)胞數(shù)目明顯減少，胞體變小，染色很淺，排列紊亂，極不規(guī)則，間隙很大，部分神經(jīng)元缺失，胞核和胞漿分界不明顯，軸突和樹突無法區(qū)分，Nissl體數(shù)量明顯減少。②小腦：對照組大鼠小腦顆粒層細(xì)胞數(shù)量較多，排列緊密，分布均勻，染色較深，浦肯野細(xì)胞呈單層排列，胞體較大，分子層細(xì)胞胞體較小，分布較分散。中、高劑量組顆粒細(xì)胞染色變淺，浦肯野細(xì)胞染色明顯變淺，Nissl體數(shù)量減少。 結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)室條件下觀察到：（1）TMT能引起大鼠體重明顯下降，并導(dǎo)致心，腦，腎，肺，睪丸的臟器系數(shù)均明顯增大，而脾的臟器系數(shù)明顯減少，說明TMT可導(dǎo)致多臟器損傷，且腎和脾對TMT較敏感；另外，TMT也能誘導(dǎo)大鼠出現(xiàn)震顫、躁狂、攻擊性、尖叫、易激惹、抽搐以及癲癇發(fā)作等較為明顯的中樞神經(jīng)興奮性癥狀，說明TMT神經(jīng)毒性整體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ驮诒緦?shí)驗(yàn)室建立成功；（2）神經(jīng)行為功能測試表明TMT可引起神經(jīng)行為毒性，造成神經(jīng)運(yùn)動及感覺功能障礙，其中平衡木行走試驗(yàn)評分是更為敏感的指標(biāo)；（3）Nissl染色法觀察到大鼠腦組織有明顯的病理改變，提示TMT具有神經(jīng)毒性，且皮層和小腦均為其毒作用靶器官，而皮層更為敏感。 第二部分TMT對大鼠血清和腦組織氧化應(yīng)激的影響 目的：檢測TMT對大鼠血清及腦組織氧化抗氧化系統(tǒng)的影響，從分子水平上進(jìn)一步探索其中毒的氧化應(yīng)激機(jī)制。 方法：取大鼠血清，以及皮層和小腦組織勻漿，用相關(guān)試劑盒及分光光度計檢測血清、腦組織中MDA、GSH及T-SOD等氧化抗氧化系統(tǒng)指標(biāo)的變化。 結(jié)果：（1）血清：①M(fèi)DA:與對照組相比，中、高劑量組MDA含量分別增加39.0%（P0.05）、22.0%（P0.05），低劑量組無明顯變化；②GSH：與對照組相比，中、高劑量組GSH含量分別增加133.6%（P0.01）和92.9%（P0.05），低劑量組增加45.1%（P0.05）；③T-SOD活性：與對照組相比，高劑量組T-SOD活性顯著增強(qiáng)（P0.05），低、中劑量組無明顯變化。（2）皮層：①M(fèi)DA：隨著染毒劑量增加，各染毒組大鼠皮層MDA含量均有所增加，其中高劑量組增加45.4%（P0.05）；②GSH：與對照組相比，低、中、高劑量組大鼠皮層中GSH含量均分別減少29.91%（P0.05）、38.0%（P0.01）和50.66%（P0.01），且隨劑量減少有線性趨勢；③T-SOD：與對照組相比，低、中、高劑量組T-SOD酶活性均明顯降低（P0.05），分別降低28.5%、34.9%和25.8%。（3）小腦：①M(fèi)DA：各染毒組大鼠MDA含量與對照組相比均無明顯變化；②GSH：與對照組相比，高劑量組GSH含量降低25.0%（P 0.05），中劑量組下降無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；③T-SOD：高劑量組T-SOD酶活性明顯降低，與對照組相比，降低7.5%（P 0.05），低、中劑量組均無明顯變化。 結(jié)論：在本實(shí)驗(yàn)室條件下，得到以下結(jié)論：（1）TMT不僅對大鼠血清氧化抗氧化系統(tǒng)損傷不明顯，甚至?xí)せ羁寡趸到y(tǒng)，提示血液系統(tǒng)可能存在某些代償機(jī)制增加其抗氧化能力來保護(hù)機(jī)體；（2）TMT可引起皮層和小腦氧化損傷，二者均為其毒作用靶器官，且皮層相對更為敏感，氧化應(yīng)激損傷是TMT致神經(jīng)毒性的可能機(jī)制之一。（3）腦組織氧化抗氧化系統(tǒng)中GSH含量變化可能是TMT氧化損傷機(jī)制研究中較為敏感的指標(biāo)之一。 綜上所述，在本實(shí)驗(yàn)室條件下，通過對中毒大鼠的整體中毒表現(xiàn)（包括一般毒性和神經(jīng)行為毒性）、組織病理改變及氧化應(yīng)激指標(biāo)變化等指標(biāo)的研究，分別從整體、組織細(xì)胞及分子水平上多層次、多角度證實(shí)了TMT的神經(jīng)毒性，并探討了其可能機(jī)制。在整體水平上，TMT中毒主要表現(xiàn)為典型的神經(jīng)中毒癥狀、體重下降及神經(jīng)行為改變，并引起多臟器損傷；從組織細(xì)胞水平上來看，TMT可損傷大腦皮層神經(jīng)結(jié)構(gòu)及功能，對小腦結(jié)構(gòu)存在一定損傷，且對小腦浦肯野細(xì)胞損傷較明顯；而在分子水平，TMT可誘導(dǎo)氧化應(yīng)激損傷，主要表現(xiàn)為引起脂質(zhì)過氧化損傷及抗氧化系統(tǒng)中抗氧化物消耗及抗氧化物酶活性降低，其對血液系統(tǒng)損傷不明顯，而對皮層氧化損傷較為嚴(yán)重，對小腦損傷則相對較輕微，氧化應(yīng)激損傷可能為其致神經(jīng)毒性的可能機(jī)制。此外，在本這些神經(jīng)毒性測試指標(biāo)中，平衡木行走試驗(yàn)評分及GSH含量的改變?yōu)槠湎鄬^為靈敏的指標(biāo)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R114

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 龍晉祥,朱春山,劉祖平,王定勝,徐海金,黃水生;急性三甲基錫中毒225例臨床分析[J];中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2000年01期

2 唐小江;黃明;李斌;賴關(guān)朝;吳邦華;李來玉;;國內(nèi)外三甲基氯化錫中毒事故分析[J];中國工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2010年05期

3 楊曉君;劉振中;唐小江;;三甲基氯化錫經(jīng)兩種途徑染毒后的毒性比較[J];山西醫(yī)藥雜志;2008年01期

4 代佼;王正虹;李林;;三甲基氯化錫的毒性及危害研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年08期

5 彭彪,林偉華,廖江寧,張鳳娥,譚明;急性三甲基氯化錫中毒123例臨床分析[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;2000年02期

6 蘇偉;徐秋萍;張舸;;急性三烷基錫中毒107例診治分析[J];中國急救醫(yī)學(xué);2008年01期

本文編號：1422615