本文關(guān)鍵詞：紅酵母紅素對(duì)氧化受損PC12細(xì)胞的保護(hù)作用

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【摘要】：紅酵母紅素(Torularhodin)是一種具備清除自由基、淬滅單線態(tài)氧、抗衰老和抑制癌癥等生物活性的類胡蘿卜素。當(dāng)前,國(guó)內(nèi)外對(duì)紅酵母紅素生物活性的探究,尤其在細(xì)胞層面,成果很少。本課題研究紅酵母紅素在不同保存條件下的穩(wěn)定性,再通過(guò)建立H2O2誘導(dǎo)氧化損傷PC12細(xì)胞模型,研究紅酵母紅素對(duì)氧化受損PC12細(xì)胞的保護(hù)作用,為未來(lái)紅酵母紅素的合理開發(fā)和有效應(yīng)用提供理論依據(jù)。首先,利用高效液相色譜檢測(cè)紅酵母紅素在不同的光照、氧和溫度條件下的保留率。研究結(jié)果表明,紅酵母紅素在室內(nèi)避光180 min后保留率高達(dá)92.51%;隔氧充CO2 60 d后保留率為84.68%;4℃和25℃存放150 min后保留率分別為92.61%和87.39%。然后,基于H2O2誘導(dǎo)氧化損傷PC12細(xì)胞模型,利用酶標(biāo)法、熒光探針和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法,研究紅酵母紅素對(duì)氧化受損PC12細(xì)胞的抗氧化保護(hù)作用。結(jié)果表明,紅酵母紅素能提高PC12細(xì)胞內(nèi)部分抗氧化酶的活性,抑制細(xì)胞內(nèi)ROS含量的升高,上調(diào)與抗氧化有關(guān)基因Nrf2、HO-1和NQO1 m RNA的表達(dá)水平,下調(diào)GSK-3β和Keap1m RNA的表達(dá)水平,其中3μmol/L紅酵母紅素組的檢測(cè)結(jié)果在實(shí)驗(yàn)組中最優(yōu)。在調(diào)控細(xì)胞內(nèi)ROS含量方面,與模型組的DCF熒光強(qiáng)度相比,3μmol/L紅酵母紅素組的DCF熒光強(qiáng)度降低82.23%(P0.01),而陽(yáng)性對(duì)照番茄紅素組的DCF熒光強(qiáng)度僅下降56.16%(P0.01)。最后,采用激光共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)等檢測(cè)方法,研究紅酵母紅素對(duì)氧化受損PC12細(xì)胞的抗凋亡保護(hù)作用。結(jié)果表明紅酵母紅素能保護(hù)PC12細(xì)胞核免受損傷,降低細(xì)胞凋亡率,維持細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中Ca2+濃度的平衡,遏制線粒體膜電位的下降,同時(shí)提高抗凋亡基因Bcl-2和PARP m RNA的表達(dá)水平,抑制促凋亡基因Bax和Caspase-3m RNA的表達(dá)水平,尤其是3μmol/L紅酵母紅素組,各項(xiàng)指標(biāo)最佳,其細(xì)胞凋亡率僅為1.1±0.45%(P0.01),比模型組的細(xì)胞凋亡率降低11.6%,也比陽(yáng)性對(duì)照番茄紅素組的細(xì)胞凋亡率小3.6%。綜上,紅酵母紅素在避光、隔氧充CO2和低溫或常溫的條件下穩(wěn)定性最好。更值得一提的是,紅酵母紅素對(duì)氧化受損PC12細(xì)胞有顯著的保護(hù)作用,增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化能力,激活抗氧化酶系,清除自由基,提高細(xì)胞存活率,起到抗凋亡作用,并可調(diào)節(jié)GSK-3β/Nrf2信號(hào)傳導(dǎo)通路和介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的線粒體通路相關(guān)基因m RNA的表達(dá)水平;在各實(shí)驗(yàn)中,3μmol/L紅酵母紅素的抗氧化活性和抗凋亡作用最強(qiáng)且效果優(yōu)于相同濃度的番茄紅素。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R151

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 方敏,王曉東;細(xì)胞凋亡的線粒體通路[J];北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2002年01期

2 嚴(yán)曉昱,師建國(guó),閻慶國(guó),成勝權(quán),張志培,李擒龍,張靜;三氧化二砷聯(lián)合抗壞血酸對(duì)肝癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年11期

3 李煌元;石年;;Keap1-Nrf2/ARE通路在分子毒理學(xué)中的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊(cè));2006年03期

4 王永華,梁世中;類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)和生理功能研究[J];廣州食品工業(yè)科技;2000年04期

5 王艷艷;姚俊杰;梁正其;朱俊華;馮亞楠;;Pb~(2+)對(duì)建鯉幼魚抗氧化酶活性和總抗氧化能力的影響[J];淡水漁業(yè);2013年01期

6 楊遠(yuǎn)帆,倪輝,肖智強(qiáng),陳小花;胡蘿卜中水溶性類胡蘿卜素穩(wěn)定性的研究[J];集美大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年01期

7 葉志華;邢雅玲;田琳琳;周U，

本文編號(hào)：1203019