本文關鍵詞：雙酚A對MCF-7細胞DNA甲基化的影響及其機制

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【摘要】：目的 通過研究雙酚A (Bisphenol A，BPA)對MCF-7細胞產生的DNA甲基化修飾作用及其機制探討，進一步闡明雙酚A促進乳腺癌的分子機制。 方法 選擇濃度為10-7mol/L和10-6mol/L的BPA分別作用于MCF-7細胞24h、48h、72h，，0.1%DMSO為溶劑對照組。在染毒結束后，用免疫熒光法檢測MCF-7細胞內5-mC的含量，用RT-PCR法檢測DNMT1、DNMT3A、DNMT3B在mRNA水平的表達，用比色法檢測甲基化轉移酶活性的改變；用RT-PCR法檢測MCF-7細胞內轉錄因子SP1和SP3在mRNA水平的表達，用免疫細胞化學法檢測SP1和SP3在蛋白水平的表達。 結果 1.與溶劑對照組相比，在濃度為10-6mol/L BPA染毒后，各時間點的MCF-7細胞內5-mC的含量下降（P0.05）；10-7mol/L BPA染毒72h后，MCF-7細胞內5-mC的含量下降，與溶劑對照組相比，差異有統計學意義（P0.05）； 2.與溶劑對照組相比，10-6mol/L BPA染毒24h、48h、72h后，MCF-7細胞內DNMT1在mRNA水平表達下降（P0.05），而DNMT3A和DNMT3B表達上調（P0.05），10-7mol/L BPA在染毒72h后，引起DNMT3A和DNMT3B表達增加（P0.05）； 3.與溶劑對照組相比，在濃度為10-6mol/L BPA染毒24h、48h、72h后，MCF-7細胞DNMTS總活性升高（P0.05），10-7mol/L BPA染毒72h后，DNMTS的總活性升高（P0.05），差異有統計學意義。與整體DNA甲基化水平和DNMT3A、DNMT3B在mRNA表達水平的改變一致； 4.與溶劑對照組相比，濃度為10-6mol/L BPA在染毒后，各時間點的MCF-7細胞內SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平均表達增高，差異有統計學意義（P0.05）。10-7mol/L BPA在染毒48h后，引起MCF-7細胞內轉錄因子SP1在mRNA和蛋白水平的增加，與溶劑對照組性比，差異有統計學意義（P0.05）；在染毒72h后，引起MCF-7細胞內SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平均表達增高，與溶劑對照組性比，差異有統計學意義（P0.05）。 結論 1. BPA能夠改變MCF-7細胞內DNA甲基化模式； 2. BPA作用后，使DNMT1表達下降，DNMT3A和DNMT3B表達上升，并增加DNMTS的總活性； 3. BPA染毒后，MCF-7細胞內轉錄因子SP1和SP3在mRNA水平和蛋白水平的表達均增加，是BPA調節(jié)DNMTS的可能機制。
【學位授予單位】：南華大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R114

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前2條

1 王曉梅;洪燕;陳鋒;;中低劑量雙酚A對小鼠肝、腎氧化損傷作用的實驗研究[J];實用預防醫(yī)學;2013年03期

2 楊建平;袁建輝;胡恭華;紀衛(wèi)東;張文娟;許玉玲;徐薇;楊淋清;張錦州;吳麗明;胡福勇;朱志良;吳禮康;莊志雄;;三氯乙酸染毒對肝L-02細胞的增殖作用及對DNA甲基化水平的影響[J];毒理學雜志;2008年05期

本文編號：1196356