發(fā)布時(shí)間：2017-06-13 06:12

  本文關(guān)鍵詞：塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文以塞隆骨為研究對(duì)象,運(yùn)用制備型高效液相色譜法和二維液相色譜法,分別從提取工藝方法的選擇、不同模式的二維正交液相色譜方法的建立、主要單體化合物的純化制備和組分化合物的活性初篩四個(gè)方面展開(kāi)研究,為新藥開(kāi)發(fā)奠定了一定的物質(zhì)基礎(chǔ)。通過(guò)考察影響塞隆骨提取效果的因素,如提取方式、提取溶劑、提取時(shí)間、提取次數(shù)和料液比,對(duì)塞隆骨提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,得到了最佳提取工藝;醇提物一維分離制備采用正相DAISO Silica柱,水提物采用反相DAISO C18柱,分別考察不同洗脫程序?qū)Ψ蛛x過(guò)程的影響,最終確定了最佳制備方法工藝,正相制備色譜得到10個(gè)組分,反相得到5個(gè)組分,對(duì)樣品進(jìn)行了初步砍斷分割,為后續(xù)二維分離制備提高了效率。二維建立了DAISO Silica柱和YMC Diol柱聯(lián)用的新型2D-NPLC/HILIC制備色譜分離體系以及雙硅膠柱聯(lián)用(2D-NPLC/NPLC)的分離體系,具有良好選擇性和正交性,實(shí)現(xiàn)了塞隆骨醇提物組分中小極性難分離物質(zhì)和中等極性物質(zhì)的一個(gè)高效分離制備,得到16個(gè)高純度化合物,部分純度達(dá)到98%以上,結(jié)合質(zhì)譜和核磁數(shù)據(jù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征,表明醇提組分主要物質(zhì)為甾醇和有機(jī)酸類物質(zhì)。對(duì)水提物運(yùn)用建立的2D-RPLC/RPLC色譜體系,選擇親水高密度鍵合極性MP C18柱,對(duì)復(fù)雜水提組分進(jìn)行了有效的分離,得到高純度單一化合物9種,結(jié)構(gòu)鑒定得到其序列,多為多肽,分子量為1kD左右,為塞隆骨進(jìn)一步的藥理、毒理活性研究提供新的物質(zhì)基礎(chǔ)。塞隆骨提取物對(duì)前破骨細(xì)胞(RAW264.7細(xì)胞)活性的初步篩選實(shí)驗(yàn),表明醇提物中的6種組分具有明顯抑制前破骨細(xì)胞的作用,進(jìn)一步研究可開(kāi)發(fā)為破骨細(xì)胞抑制劑。
【關(guān)鍵詞】：塞隆骨 制備液相色譜 二維液相色譜 親水作用色譜 分離純化 前破骨細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：天津大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R914
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-10
• 前言10-11
• 第一章 文獻(xiàn)綜述11-25
• 1.1 塞隆骨研究背景概述11-17
• 1.1.1 高原鼢鼠簡(jiǎn)介11-12
• 1.1.2 塞隆骨化學(xué)成分研究進(jìn)展12-13
• 1.1.3 塞隆骨藥理作用研究進(jìn)展13-16
• 1.1.4 塞隆骨的臨床應(yīng)用16
• 1.1.5 其它動(dòng)物骨藥材研究概況16-17
• 1.2 高效液相色譜17-19
• 1.2.1 高效液相色譜法的發(fā)展概況17-18
• 1.2.2 正相色譜（NPLC）18
• 1.2.3 反相色譜（RPLC）18-19
• 1.2.4 親水色譜（HILIC）19
• 1.3 二維高效液相色譜法的研究現(xiàn)狀19-21
• 1.3.1 二維高效液相色譜法的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)19-20
• 1.3.2 二維高效液相色譜法的技術(shù)功能20
• 1.3.3 二維高效液相色譜法的正交性20-21
• 1.3.4 二維高效液相色譜法的應(yīng)用21
• 1.4 制備型高效液相色譜概述21-24
• 1.4.1 制備色譜的分類22
• 1.4.2 制備色譜方法的建立22-23
• 1.4.3 高效液相色譜制備的策略23
• 1.4.4 制備色譜在中藥研究中的應(yīng)用23-24
• 1.5 本文研究的主要內(nèi)容24-25
• 第二章 塞隆骨一維高效液相色譜的分離制備25-40
• 2.1 實(shí)驗(yàn)原料、試劑及儀器設(shè)備25-27
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)原料25
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑25-26
• 2.1.3 儀器設(shè)備26
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)裝備26-27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法27-29
• 2.2.1 塞隆骨樣品的提取和預(yù)處理27-28
• 2.2.2 分析色譜條件28-29
• 2.2.3 制備色譜條件29
• 2.3 實(shí)驗(yàn)步驟29-30
• 2.4 結(jié)果與討論30-38
• 2.4.1 提取工藝的優(yōu)化30-33
• 2.4.2 色譜條件的優(yōu)化33-35
• 2.4.3 分析液相到制備液相的線性放大35-36
• 2.4.4 塞隆骨一維各組分的收集和分析36-38
• 2.4.5 塞隆骨一維各組分的得率38
• 2.5 小結(jié)38-40
• 第三章 塞隆骨醇提物的二維液相色譜分離制備40-61
• 3.1 實(shí)驗(yàn)原料、試劑及儀器設(shè)備40-42
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)原料40
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器設(shè)備40-42
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法42-44
• 3.2.1 樣品的制備42
• 3.2.2 二維色譜分離系統(tǒng)的建立42-44
• 3.2.3 操作步驟44
• 3.3 結(jié)果與討論44-60
• 3.3.1 制備組分的色譜分析44-46
• 3.3.2 目標(biāo)單組分的最佳色譜模式46-55
• 3.3.3 單體化合物的純度檢測(cè)55-57
• 3.3.4 單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定57-60
• 3.4 小結(jié)60-61
• 第四章 塞隆骨水提物的二維液相色譜分離制備61-70
• 4.1 實(shí)驗(yàn)原料、試劑及儀器設(shè)備61-63
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)原料61-62
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器設(shè)備62-63
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法63-64
• 4.2.1 樣品的制備63
• 4.2.2 色譜條件63
• 4.2.3 二維色譜分離系統(tǒng)的建立63-64
• 4.2.4 操作步驟64
• 4.3 結(jié)果與討論64-69
• 4.3.1 水提組分的最佳二維色譜模式64-67
• 4.3.2 水提物中單體化合物純度檢測(cè)67-69
• 4.3.3 單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定69
• 4.4 小結(jié)69-70
• 第五章 塞隆骨提取物的細(xì)胞活性初步篩選70-79
• 5.1 塞隆骨醇提組分對(duì)前破骨細(xì)胞生長(zhǎng)的影響70-76
• 5.1.1 實(shí)驗(yàn)材料70-72
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)方法72-73
• 5.1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析73-76
• 5.2 塞隆骨水提組分對(duì)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)的影響76-78
• 5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料76-77
• 5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法77
• 5.2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果和分析77-78
• 5.3 小結(jié)78-79
• 第六章 結(jié)論與展望79-81
• 6.1 結(jié)論79-80
• 6.2 展望80-81
• 參考文獻(xiàn)81-88
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明88-89
• 致謝89-90

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 海平;塞隆骨抗炎作用(Ⅱ)[J];高原醫(yī)學(xué)雜志;2002年01期

2 海平;塞隆骨抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];遼寧中醫(yī)雜志;2000年11期

3 ;復(fù)方塞隆膠囊——國(guó)家專利 天然藥物[J];健康向?qū)?2009年01期

4 王麗娟,海平;塞隆骨活血化瘀作用研究[J];青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年01期

5 遠(yuǎn)程;;我跳繩,我減肥[J];人人健康;2006年11期

6 周起東;塞隆替代虎骨[J];野生動(dòng)物;1998年05期

7 索有瑞,張寶琛,汪漢卿;塞隆骨與虎骨中礦物質(zhì)元素的比較[J];中草藥;2004年04期

8 張寶琛;塞隆骨代虎骨具有重要開(kāi)發(fā)前景[J];中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志;1996年07期

9 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周材權(quán);周開(kāi)亞;;中藥材塞隆骨(高原鼢鼠Mysopalax bailey骨)的分子鑒定研究[A];四川省動(dòng)物學(xué)會(huì)第八次會(huì)員代表大會(huì)暨第九次學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 劉爽;養(yǎng)殖新品種——塞隆[N];中國(guó)特產(chǎn)報(bào);2001年

2 萊威;塞隆的人工飼養(yǎng)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

3 亞靜;品質(zhì)是中藥打開(kāi)國(guó)際市場(chǎng)的鑰匙[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

4 江曉原;未來(lái)史詩(shī)：星際戰(zhàn)艦卡拉狄加[N];中華讀書(shū)報(bào);2007年

5 唐文;“我們?nèi)狈ψ晕艺故揪瘛盵N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

6 董小芳;中藥研發(fā)——引入現(xiàn)代生物技術(shù)[N];人民日?qǐng)?bào);2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 王丹;塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究[D];天津大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：塞隆骨化學(xué)成分的分離純化與生物活性初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：445892