目的研究結(jié)腸癌細(xì)胞LOVO在氯喹(CQ)作用下對(duì)化療藥物5-氟尿嘧啶(5-FU)的敏感性變化及機(jī)制。方法用MTT法分別檢測(cè)CQ和5-FU作用24 h和48 h對(duì)LOVO細(xì)胞的增殖抑制作用。實(shí)驗(yàn)分為4組:空白對(duì)照組、CQ組、5-FU組和聯(lián)合作用組。CQ、5-FU及兩者聯(lián)合作用于LOVO細(xì)胞后,通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell分別檢測(cè)細(xì)胞遷移和侵襲的變化,采用流式細(xì)胞術(shù)和TUNEL方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,采用Western blot檢測(cè)細(xì)胞自噬及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果在不同濃度CQ、5-FU作用下LOVO細(xì)胞增殖受到抑制,且呈現(xiàn)劑量依賴性,48 h時(shí)CQ和5-FU的IC₅₀分別為11.8μg/ml和2.5μmol/L。與空白對(duì)照組相比,CQ、5-FU作用后細(xì)胞遷移率和細(xì)胞侵襲能力顯著降低,且兩藥聯(lián)用組的抑制效應(yīng)更顯著。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)顯示,CQ組、5-FU組細(xì)胞凋亡率分別為(17.85±1.04)%、(17.36±0.96)%,顯著高于空白對(duì)照組(4.11±0.23)%,兩藥聯(lián)用組凋亡率為(25.03±2.27)%,兩藥聯(lián)用組與CQ、5-FU單用組相比,細(xì)胞凋亡率更...

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圖1氯喹和5-FU抑制LOVO細(xì)胞的增殖

MTT檢測(cè)顯示,在不同濃度CQ作用后LOVO細(xì)胞增殖受到抑制(圖1A),CQ作用24h時(shí)IC50為19.6μg/ml,48h時(shí)IC50為11.8μg/ml。在不同濃度5-FU作用下細(xì)胞增殖也呈現(xiàn)出抑制作用(圖1B),作用24h時(shí)最高濃度80μmol/L的抑制率未達(dá)到5....

圖2氯喹和5-FU抑制LOVO細(xì)胞的遷移

Transwell結(jié)果顯示,48h后空白對(duì)照組侵襲的細(xì)胞較多,CQ組和5-FU組侵襲細(xì)胞減少,聯(lián)合作用組的侵襲細(xì)胞減少更顯著(圖3)。表明CQ和5-FU均能影響LOVO細(xì)胞的侵襲能力,兩藥聯(lián)合使用時(shí)抑制作用更強(qiáng)。圖3CQ和5-FU抑制LOVO細(xì)胞的侵襲力

圖3CQ和5-FU抑制LOVO細(xì)胞的侵襲力

圖2氯喹和5-FU抑制LOVO細(xì)胞的遷移4CQ組和5-FU對(duì)細(xì)胞凋亡的影響

圖4CQ和5-FU促進(jìn)LOVO細(xì)胞凋亡

CQ、5-FU及兩藥聯(lián)用48h后,流式檢測(cè)空白對(duì)照組LOVO細(xì)胞凋亡率為4.11%±0.23%,CQ和5-FU組細(xì)胞凋亡率分別為17.85%±1.04%和17.36%±0.96%,兩藥聯(lián)用組細(xì)胞凋亡率為25.03%±2.27%。藥物組與空白對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(CQ組與....

本文編號(hào)：3986496