目的:建立分析重組人1型單純皰疹病毒(r HSV-1)樣品感染滴度和生物學(xué)活性的方法。方法:采用噬斑法檢測(cè)重組人1型單純皰疹病毒的感染滴度,采用選擇性增殖活性檢測(cè)法和腫瘤細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)法檢測(cè)樣品的生物學(xué)活性,分別對(duì)上述方法進(jìn)行重復(fù)性和精密度性能驗(yàn)證,并用上述方法對(duì)6批樣品中的感染滴度和生物學(xué)活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:經(jīng)驗(yàn)證,上述3種方法均有較好的重復(fù)性和精密度,精密度RSD分別為5.3%、3.9%和19.4%;6批測(cè)試樣品中,感染滴度為(3.06±0.37)×10⁷ PFU·mL^-1,選擇性增殖活性為(1.58±0.63)×10⁵,腫瘤細(xì)胞殺傷活性為0.027 8±0.015 9。結(jié)論:經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證,噬斑法、選擇性增殖活性檢測(cè)法和腫瘤細(xì)胞殺傷活性檢測(cè)法可分別用于重組人1型單純皰疹病毒的感染滴度和生物學(xué)活性的檢測(cè)。

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圖1病毒感染細(xì)胞培養(yǎng)不同天數(shù)的噬斑圖

將rHSV-1病毒進(jìn)行稀釋，感染12孔細(xì)胞板中U-2OS細(xì)胞，每孔0.4mL，放入37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中吸附18h，加入2mL含2%甲基纖維素溶液后，于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，接種后培養(yǎng)的第2、3、4和5天，各固定、染色1塊感染滴度檢測(cè)板，肉眼觀察噬斑的大小、噬斑分散情....

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