目的:本論文以二硫鍵異構(gòu)酶ERp57作為一種新的潛在的抗血栓治療靶點,篩選其小分子抑制劑。首次從傳統(tǒng)的活血化瘀中藥丹參以及商業(yè)化的化合物庫中運用虛擬篩選技術(shù)、固相酶法、傳統(tǒng)的小分子抑制劑篩選方法,得到潛在具有抑制ERp57活性的化合物,再結(jié)合相關(guān)的抗血小板活性檢測,同時探討其中的作用機制。方法:1丹參中ERp57小分子抑制劑的篩選及其抗血小板作用研究對丹參提取物進行體外抗血小板實驗和抑制ERp57還原活性檢測,同時測定丹參提取物對血小板三磷酸腺苷(ATP)釋放的影響;以ERp57為潛在的抗血栓治療靶點,運用虛擬篩選技術(shù)和傳統(tǒng)小分子抑制劑篩選方法從丹參中篩選出ERp57的小分子抑制劑,并將篩選得到的活性化合物進行驗證:體外抑制ERp57活性的測定和抗血小板檢測;測定丹參中的活性化合物迷迭香酸對血小板ATP釋放、大鼠斷尾后的流血時間和大鼠頸總動脈上由三氯化鐵誘導(dǎo)形成血栓的影響。2運用固相酶法篩選中藥提取物中ERp57小分子抑制劑及抗血小板作用研究對丹參提取物運用固相酶法篩選ERp57小分子抑制劑,將所得產(chǎn)物運用LC-MS,HPLC進行成分鑒定,再進行相關(guān)驗證:體外抑制ERp57活性測定以及...

【文章頁數(shù)】：105 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1ERp57晶體結(jié)構(gòu)

學位論文作用外，其與血小板的聚集和血栓的形成相關(guān)，在血小板[14-16]。從敲除小鼠抗體介導(dǎo)的ERp57的研究中顯示，E進作用[14,17]；同時我們前臨床研究表明，丹參衍生物A活性，同時可以減弱急性缺血性心肌梗塞，抑制大鼠體內(nèi)巴胺能神經(jīng)元受損，因此，提出具有抑制ER....

圖1丹參提取物對血小板LDH釋放的影響

圖1丹參提取物對血小板LDH釋放的影響Fig.1EffectofDSEonLDHreleasefromplatelets提取物抑制體外血小板的聚集中運用AA、ADP和膠原這三種誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)體外血小板聚集，測定。如所期望的那樣，利用阿司匹林和硫酸氯吡格雷....

圖2丹參提取物對體外血小板聚集的抑制作用Fig.2InhibitoryeffectofDSEonplateletaggregationinvitroNote:AA(A,B);ADP(C,D);collagen(E,F);*P<0.05vsvehiclegroup;CB:clopidogrelbisulphate3.3丹參提取物對血小板中ATP釋放影響

27圖2丹參提取物對體外血小板聚集的抑制作用Fig.2InhibitoryeffectofDSEonplateletaggregationinvitroNote:AA(A,B);ADP(C,D);collagen(E,F);*P<0.05....

圖3丹參提取物對血小板ATP釋放的影響

士學位論文定。在實驗中分析丹參提取物是否對ATP釋放產(chǎn)生影響。實驗粒釋放ATP。結(jié)果顯示由誘導(dǎo)劑ADP刺激實驗組與血小板釋放量明顯增多；不同濃度丹參提取物（15、50、150、450和物硫酸氯吡格雷（42μg/mL）組ATP釋放量都有明顯降低（丹參提取物....

本文編號：3964600