為拓展蒲公英抗菌肽在抗菌類新藥領(lǐng)域的開發(fā)應(yīng)用,利用酶解法制備蒲公英抗菌肽對比蒲公英蛋白大于10 k D組分、3～10 kD組分、1～3 kD組分、小于1 kD組分的抑菌活性,根據(jù)篩選結(jié)果對抑菌活性較強(qiáng)的組分使用LC-MS技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析來分析藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。結(jié)果表明:各組分對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的生長抑制活性順序?yàn)槊附怆?gt;小于1 kD組分>1～3 kD組分>3～10 kD組分>大于10 kD組分>空白對照。推斷分析小于1 kD組分結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)3個(gè)寡肽:PGYGT-T1的結(jié)構(gòu)為NH₂-Asp-Val-COOH,PGYGT-T2的結(jié)構(gòu)為NH₂-Asn-Glu-COOH,PGYGT-T3的結(jié)構(gòu)為NH₂-Val-Arg-COOH;推斷分析酶解肽結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)3個(gè)寡肽:PGYGT-M1的結(jié)構(gòu)為NH₂-PHe-Lys-COOH或NH₂-PHe-Gln-COOH,PGYGT-M2的結(jié)構(gòu)為NH₂-His-Cys-COOH,PGYGT-M3的結(jié)構(gòu)為NH...

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【部分圖文】：

圖1蒲公英不同蛋白組分及酶解肽對大腸桿菌的抑制

利用超濾分級(jí)法制備蒲公英蛋白不同分子量組分和酶解法(酶解大于10kD蛋白組分并過1kD膜)制備蒲公英抗菌肽組分，通過各組分對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑制活性分析，結(jié)果顯示(表1;圖1;圖2)，各組分對兩種細(xì)菌的抑制活性強(qiáng)弱順序?yàn)槊附怆慕M分>小于1kD組分>1～3kD組分>....

圖2蒲公英不同蛋白組分及酶解肽對金黃色葡萄球菌的抑制

圖1蒲公英不同蛋白組分及酶解肽對大腸桿菌的抑制根據(jù)以上結(jié)果，發(fā)現(xiàn)蒲公英酶解肽與小于1kD組分都表現(xiàn)出相對較好的抑菌活性，由于兩者分子量均小于1kD，初步分析兩組分抑菌藥效物質(zhì)基礎(chǔ)為寡肽類成分。為了深入對蒲公英抗菌肽的研究，本研究進(jìn)一步應(yīng)用LC-MS技術(shù)對比蒲公英小于1kD....

圖3小于1kD總離子流

根據(jù)結(jié)果可知(圖4A)，一級(jí)質(zhì)譜圖中m/z233為(M+H)+離子峰，則分子量為232，推測其可能為二肽。二級(jí)質(zhì)譜中可以看出在電子碰撞解離過程中，肽鍵斷裂后電荷保留于C-端形成的y碎片離子y1(m/z100.3),y1為C-端脫一分子羥基形成的碎片離子，初步計(jì)算出C-端分子量....

圖4蒲公英寡肽PGYGT-T1(A),PGYGT-T2(B),PGYGT-T3(C)的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜

根據(jù)結(jié)果可知(圖4C)，一級(jí)質(zhì)譜圖中m/z274.3為(M+H)+離子峰，則分子量為273，推測其可能為二肽。二級(jí)質(zhì)譜中可以看出在電子碰撞解離過程中，肽鍵斷裂后電荷保留于C-端形成的y碎片離子y1(m/z157),y1為C-端脫一分子羥基形成的碎片離子，初步計(jì)算出C-端分子量....

本文編號(hào)：3964380