迄今為止,癌癥仍然是人類最大的挑戰(zhàn)之一,據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)稱,癌癥是全球第二大死亡誘因。美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準的抗癌藥物大多數(shù)是有機分子,而金屬藥物非常稀缺。第一個金屬抗癌藥物順鉑由于非癌細胞毒性、腫瘤細胞耐藥性和嚴重的不良反應等缺點,從而限制其臨床應用。在設計新的金屬抗癌藥物中,釕配合物引起人們極大的興趣。最近,許多金屬釕(Ⅱ)配合物被設計和開發(fā)成抗癌藥物,芳烴釕(Ⅱ)配合物以及多吡啶釕(Ⅱ)配合物由于較好的抗腫瘤活性而得到廣泛的關注。本論文成功合成得到了一個芳烴釕(Ⅱ)配合物和四個多吡啶釕(Ⅱ)配合物,分別篩選出活性較好的抗腫瘤釕(Ⅱ)配合物,并探討其抗腫瘤的作用機制。本論文的主要研究如下:(1)成功合成了一個芳烴釕(Ⅱ)配合物RAP07。采用MTT法研究RAP07對不同腫瘤株和正常細胞株的抑制作用,發(fā)現(xiàn)其對乳腺癌MDA-MB-231細胞株具有高度敏感性。通過腫瘤斑馬魚模型實驗,研究表明RAP07可以抑制MDA-MB-231細胞的增殖、侵襲和轉移。流式細胞術檢測RAP07對細胞周期和凋亡的影響,結果表明,低濃度時,細胞發(fā)生S期阻滯,高濃度時,細胞發(fā)生凋亡。彗星實...

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 金屬釕配合物
        1.2.1 芳烴釕(Ⅱ)配合物
        1.2.2 多吡啶釕(Ⅱ)配合物
    1.3 芳烴釕(Ⅱ)配合物抗腫瘤細胞侵襲和轉移機制研究
        1.3.1 腫瘤細胞的微環(huán)境
        1.3.2 腫瘤細胞的侵襲性偽足促進腫瘤細胞發(fā)生侵襲和轉移
        1.3.3 芳烴釕(Ⅱ)配合物具有抗血管生成和抗腫瘤侵襲轉移雙功能特性
    1.4 多吡啶釕(Ⅱ)配合物促進腫瘤細胞發(fā)生凋亡的機制研究
        1.4.1 腫瘤細胞凋亡途徑
        1.4.2 DNA損傷介導的凋亡
        1.4.3 多吡啶釕(Ⅱ)配合物通過線粒體途徑介導的腫瘤細胞凋亡
    1.5 本論文的研究思路
    1.6 本文研究的創(chuàng)新點
第二章 芳烴釕(Ⅱ)配合物通過調(diào)控配合物通過調(diào)控VEGF的表達阻滯血管生成抑制MDA-MB-231細胞的侵襲轉移
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗試劑及材料
        2.2.2 實驗儀器
        2.2.3 芳烴釕(Ⅱ)配合物RAP07 的合成
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞培養(yǎng)技術
        2.3.2 MTT法評價RAP07 的抗腫瘤活性
        2.3.3 RAP07對MDA-MB-231 乳腺癌細胞異種移植斑馬魚模型的生長和轉移的抑制
        2.3.4 流式細胞術分析細胞周期和凋亡
        2.3.5 RAP07 誘導細胞發(fā)生DNA損傷
        2.3.6 芳烴釕(Ⅱ)配合物RAP07 阻滯新生血管的生成
        2.3.7 芳烴釕(Ⅱ)配合物調(diào)節(jié)VEGF的表達
        2.3.8 芳烴釕(Ⅱ)配合物抑制侵襲性偽足的形成
        2.3.9 毒性評價
        2.3.10 芳烴釕(Ⅱ)配合物與VEGF G4 DNA的相互作用
        2.3.11 Western Blot
    2.4 結果與討論
        2.4.1 芳烴釕(Ⅱ)配合物RAP07 的合成
        2.4.2 RAP07 對細胞的毒性評價
        2.4.3 RAP07對MDA-MB-231 乳腺癌細胞異種移植斑馬魚模型的生長和轉移的抑制
        2.4.4 RAP07 誘導細胞發(fā)生S期阻滯和凋亡
        2.4.5 Western Blot檢測MDA-MB-231 細胞周期和凋亡通路相關蛋白的表達
        2.4.6 RAP07 誘導細胞發(fā)生DNA損傷抑制細胞增殖
        2.4.7 Western Blot檢測MDA-MB-231 細胞DNA損傷相關蛋白的表達
        2.4.8 芳烴釕(Ⅱ)配合物阻滯新生血管的生成
        2.4.9 芳烴釕(Ⅱ)配合物調(diào)控VEGF的表達
        2.4.10 芳烴釕(Ⅱ)配合物抑制MDA-MB-231 細胞的遷移和侵襲
        2.4.11 Western Blot檢測MDA-MB-231 細胞遷移和侵襲相關蛋白的表達
        2.4.12 毒性評價
        2.4.13 RAP07與VEGF G4 DNA相互作用
    2.5 小結
第三章 多吡啶釕(Ⅱ)配合物誘導線粒體膜電位耗散激活DNA損傷介導的細胞凋亡以抑制肝癌
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗試劑及原料
        3.2.2 實驗儀器
        3.2.3 多吡啶釕(Ⅱ)配合物的合成
    3.3 實驗方法
        3.3.2 MTT法檢測體外細胞活力
        3.3.3 多吡啶釕(Ⅱ)配合物通過線粒體依賴的途徑誘導細胞凋亡
        3.3.4 多吡啶釕(Ⅱ)配合物誘導細胞發(fā)生DNA損傷
        3.3.5 1對肝癌異種移植斑馬魚模型的生長抑制
        3.3.6 體外毒性評價
    3.4 結果與討論
        3.4.1 多吡啶釕(Ⅱ)配合物1-4 的合成
        3.4.2 多吡啶釕(Ⅱ)配合物1-4 及順鉑對不同腫瘤細胞的抑制作用
        3.4.3 1對HepG2 細胞在斑馬魚體內(nèi)增殖的影響
        3.4.4 多吡啶釕(Ⅱ)配合物通過線粒體依賴的途徑誘導細胞凋亡
        3.4.5 DNA損傷
        3.4.6 毒性評價
    3.5 小結
第四章 結論與展望
    4.1 結論
    4.2 展望
參考文獻
附錄1 配合物的ESI-MS圖譜
附錄2 配合物的¹H NMR圖譜
附錄3 配合物的¹³C NMR圖譜
附錄4 配合物的單晶數(shù)據(jù)
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文



本文編號：3820762