本文關鍵詞：四氯四碘熒光素與聚谷氨酸鍵合物納米顆粒的制備及抗腫瘤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：四氯四碘熒光素(Rose Bengal, RB)是熒光素的鹵化衍生物,作為一種良好的光敏劑,它可以將吸收的光能高效地轉化為活性氧,對多種疾病進行光動力學治療。最近的研究表明,RB在沒有光照時也具有化療藥物的功效,其作為抗腫瘤藥物正在皮膚癌、乳腺癌和肝癌上進行臨床試驗。臨床試驗發(fā)現(xiàn),RB不僅能殺死腫瘤細胞,還能激活免疫系統(tǒng),對腫瘤進行免疫治療。例如,給體內(nèi)部分黑素瘤注射RB,體內(nèi)的其他黑素瘤也會受到抑制�？梢�,RB是一種非常有研究價值和臨床應用前景的新型抗腫瘤藥物。然而,臨床試驗中使用的藥物形式為四氯四碘熒光素鈉,作為一種陰離子的小分子化合物難以跨膜進入細胞,而且其血漿清除速率過快,只能進行局部注射治療,因此其臨床應用受到限制。本論文提出將RB與生物相容性好的高分子載體聚谷氨酸鍵合,形成兩親性高分子藥物鍵合物,在水中組裝成納米尺寸的藥物,增加藥物的血液循環(huán)時間和腫瘤靶向性,解決RB不能通過靜脈給藥的問題,并提高其抗腫瘤效率。論文首先合成了一種帶氨基的RB衍生物,通過其氨基與聚谷氨酸中的羧基鍵合,合成得到了聚谷氨酸-四氯四碘熒光素鍵合物(PGA-RB)藥物,經(jīng)測定其鍵合率為8%。動態(tài)光散射和電鏡表明其在水溶液中可以自組裝為平均粒徑為160nm的納米顆粒,其Zeta電位為-30 mV。體外抗腫瘤實驗表明,在沒有光照的條件下PGA-RB具有與RB相當?shù)募毎拘?但是在光照下PGA-RB具有大幅提高的腫瘤細胞毒性,其對Bcap37. A549和HepG2的光毒性指數(shù)分別是RB的27.8、5.8和4.8倍。本研究利用流式細胞儀測試了藥物在細胞中的攝取和活性氧產(chǎn)生情況,發(fā)現(xiàn)鍵合后的藥物在腫瘤細胞內(nèi)濃度大幅增加,產(chǎn)生的活性氧也更多。另外,還利用激光共聚焦顯微鏡上觀測了兩種PGA-RB和RB的亞細胞分布,發(fā)現(xiàn)RB在鍵合前非常均勻地分布在整個細胞,而且信號強度非常弱,而鍵合后PGA-RB選擇性地富集在細胞核附近,熒光信號很強,表明PGA-RB具有比RB大幅提高的細胞攝取和活性氧產(chǎn)生能力,導致了其大幅提高的光毒性。同時,鍵合后PGA-RB的體內(nèi)的血液循環(huán)時間顯著延長,本文還以人乳腺癌(Bcap-37)裸鼠移植瘤為模型,通過靜脈給藥研究了PGA-RB和RB在光照條件下的體內(nèi)抗腫瘤性能,發(fā)現(xiàn)PGA-RB確實具有更高的抗腫瘤效率。最后,本文通過PGA-RB與熒光素酶交聯(lián),希望利用熒光素酶催化熒光素氧化發(fā)出的熒光激發(fā)PGA-RB產(chǎn)生活性氧治療腫瘤,建立一種無需外部光源的光動力學治療方法。本研究控制交聯(lián)程度成功地制備了PGA-RB與熒光素酶復合納米顆粒,測試了其在加入底物后的發(fā)光強度,發(fā)現(xiàn)與沒有交聯(lián)的熒光素酶相比,其發(fā)光強度稍有下降,但仍然維持了較高的發(fā)光比例,而且復合納米顆粒能夠進入細胞。但是細胞毒性實驗發(fā)現(xiàn),其毒性與未鍵合熒光素酶的PGA-RB內(nèi)米顆粒類似,并未產(chǎn)生額外的光毒性,表明熒光素酶催化熒光素氧化發(fā)出的光強不足以激發(fā)光敏劑,產(chǎn)生足夠的活性氧殺死腫瘤細胞。
【關鍵詞】：四氯四碘熒光素 聚谷氨酸 抗腫瘤藥物 藥物輸送 光動力學治療
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R943;R96
【目錄】：

• 致謝4-5
• 摘要5-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 文獻綜述12-34
• 1.1 引言12-17
• 1.1.1 抗腫瘤治療與藥物研發(fā)現(xiàn)狀12-13
• 1.1.2 新型納米抗腫瘤藥物研究進展13-15
• 1.1.3 光動力學治療在腫瘤治療中的應用15-17
• 1.2 四氯四碘熒光素類抗腫瘤藥物的研究進展17-24
• 1.2.1 四氯四碘熒光素類抗腫瘤藥物的光動治療和化療效果18-21
• 1.2.2 四氯四碘熒光素鈉抗腫瘤活性的臨床試驗進展21-22
• 1.2.3 四氯四碘熒光素類藥物在抗腫瘤中的免疫治療作用22-24
• 1.3 利用熒光素酶的光動力學治療的研究進展24-27
• 1.4 聚谷氨酸鍵合抗腫瘤藥物的研究進展27-32
• 1.5 課題的提出和研究內(nèi)容32-34
• 第二章 聚谷氨酸-四氯四碘熒光素鍵合物的合成與表征34-48
• 2.1 引言34-35
• 2.2 實驗部分35-39
• 2.2.1 實驗材料35
• 2.2.2 實驗儀器35-36
• 2.2.3 聚谷氨酸的合成36-37
• 2.2.4 四氯四碘熒光素-乙基胺的合成37
• 2.2.5 PGA-RB的合成37-38
• 2.2.6 PGA-RB吸收光譜和鍵合率測定方法38
• 2.2.7 PGA-RB納米顆粒的制備與表征方法38
• 2.2.8 光照條件下活性氧產(chǎn)生的測定方法38-39
• 2.3 結果與討論39-47
• 2.3.1 聚L-谷氨酸載體的合成與表征39-41
• 2.3.2 四氯四碘熒光素-乙基胺的合成與表征41
• 2.3.3 PGA-RB的合成與表征41-43
• 2.3.4 PGA-RB納米顆粒的結構表征43-45
• 2.3.5 PGA-RB納米顆粒的光學和光化學性質表征45-47
• 2.4 本章小結47-48
• 第三章 聚谷氨酸-四氯四碘熒光素的抗腫瘤活性研究48-63
• 3.1 引言48
• 3.2 實驗部分48-51
• 3.2.1 實驗材料48-49
• 3.2.2 實驗儀器49
• 3.2.3 細胞培養(yǎng)條件49
• 3.2.4 動物實驗條件49-50
• 3.2.5 藥物體外毒性實驗50
• 3.2.6 藥物細胞吞噬和活性氧產(chǎn)生測定實驗50
• 3.2.7 激光共聚焦顯微鏡觀測藥物細胞內(nèi)分布實驗50-51
• 3.2.8 藥物體內(nèi)血漿清除實驗51
• 3.2.9 人乳腺癌裸鼠移植瘤模型的抗腫瘤活性實驗51
• 3.3 結果與討論51-62
• 3.3.1 體外細胞毒性研究51-54
• 3.3.2 體外細胞吞噬和活性氧產(chǎn)生研究54-56
• 3.3.3 藥物的亞細胞分布研究56-59
• 3.3.4 藥物的血漿清除研究59-60
• 3.3.5 體內(nèi)抗腫瘤活性研究60-62
• 3.4 本章小結62-63
• 第四章 聚谷氨酸-四氯四碘熒光素鍵合熒光素酶的光動力學治療研究63-71
• 4.1 引言63-64
• 4.2 實驗部分64-67
• 4.2.1 實驗材料64-65
• 4.2.2 實驗儀器65
• 4.2.3 PGA-RB-LUC復合納米顆粒的制備65-66
• 4.2.4 體外化學發(fā)光測試66
• 4.2.5 熒光素參與的光動力學體外毒性實驗66
• 4.2.6 藥物的亞細胞分布研究66-67
• 4.3 結果與討論67-70
• 4.3.1 PGA-RB-LUC納米顆粒的制備與表征67-68
• 4.3.2 PGA-RB-LUC納米顆粒的化學發(fā)光研究68
• 4.3.3 熒光素參與的光動力學體外毒性68-69
• 4.3.4 PGA-RB-LUC復合納米顆粒的亞細胞分布69-70
• 4.4 本章小結70-71
• 第五章 結論與展望71-73
• 參考文獻73-81
• 作者簡歷與科研成果81

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2 于克乾,劉英俊;~(131)Ⅰ標記用四氯四碘熒光素鈉鹽的合成[J];精細化工;1993年04期

3 劉朋軍,王文韻;四氯四碘熒光素鑭系絡合物的制備與性質[J];應用化學;1990年02期

4 景烈,馬改榮;玫瑰紅-~(131)I制劑的紙上色層分析[J];核化學與放射化學;1980年01期

5 ;[J];;年期

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1 王天宇;四氯四碘熒光素與聚谷氨酸鍵合物納米顆粒的制備及抗腫瘤研究[D];浙江大學;2015年

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