本文關鍵詞：新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽破損耐甲氧西林金黃色葡萄球菌細胞膜的機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽破損臨床分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的機制,為臨床應用天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對抗MRSA的感染奠定基礎。方法1采用微量肉湯稀釋法測定天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對MRSA的最小抑菌濃度(MIC);2通過電位測定儀測定天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細菌細胞膜表面電位的變化;通過十六烷吸附試驗計算細菌吸附率來判斷雜合肽對細菌細胞膜表面疏水性的影響;3采用薄膜水化法制備磷脂模擬細菌細胞膜后與天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用;通過熒光/化學發(fā)光分析儀檢測天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用后脂質(zhì)體內(nèi)熒光素的泄露率;通過加入空白脂質(zhì)體前后異硫氰酸熒光素(FITC)標記肽的熒光光譜的變化來觀察FITC-肽是否能夠使脂質(zhì)體破裂;使用熒光/化學發(fā)光分析儀檢測FITC-肽與熒光淬滅劑丙烯酰胺溶液相互作用后熒光強度的變化來判斷脂質(zhì)體是否能保護雜合肽免受熒光淬滅劑的淬滅;4通過聯(lián)合藥敏實驗觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對細菌細胞外膜滲透性的影響;5通過β-半乳糖苷酶實驗觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對細胞質(zhì)膜滲透性的影響;6采用原子吸收光譜儀檢測天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對細菌細胞外K+的濃度的影響;7通過透射電子顯微鏡觀察天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細菌細胞膜的變化;8流式細胞儀分析天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細菌細胞膜完整性的變化。.結(jié)果1天蠶素A-馬蓋寧肽對MRSA的最小抑菌濃度為64μg/m L;2天蠶素A-馬蓋寧雜合肽與帶負電的MRSA相互作用使其細胞表面電位由-0.95增加到-0.50;MRSA細胞表面吸附率由2.97%增加到9.22%;3天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用脂質(zhì)體后,隨著該雜合肽作用濃度的增強,脂質(zhì)體熒光素的泄漏率增加;當加入空白脂質(zhì)體后,FITC基團最大熒光強度的波長從550.4nm變?yōu)?36.2nm,同時熒光強度增強;熒光淬滅劑作用于FITC-肽時,加入空白脂質(zhì)體之后,FITC-肽的熒光強度降低被抑制;4天蠶素A-馬蓋寧雜合肽分別與利福平、紅霉素,米諾環(huán)素的分級抑制指數(shù)均0.5,表現(xiàn)為協(xié)同作用;5隨著天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用時間的延長,MRSA菌液的OD405吸光值升高;6天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用于MRSA后細胞外的K+濃度升高;7隨著天蠶素A-馬蓋寧雜合肽作用時間的延長MRSA細胞膜破裂,MRSA細胞內(nèi)的物質(zhì)滲出到細胞外,甚至引起擬核消失;8天蠶素A-馬蓋寧雜合肽引起熒光染料碘化丙啶(PI)流入MRSA細胞內(nèi),PI著染陽性細胞比率增高。結(jié)論通過實驗研究得出新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽對MRSA細胞膜有一定的滲透作用,最終導致細胞膜的破損。
【關鍵詞】：天蠶素A-馬蓋寧雜合肽 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌 表面特性 脂質(zhì)體 滲透性 透射電子顯微鏡 鉀離子 流式細胞儀 作用機制
【學位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 中英文縮略詞表9-12
• 前言12-16
• 材料與方法16-28
• 實驗結(jié)果28-35
• 討論35-41
• 結(jié)論41-42
• 參考文獻42-48
• 綜述48-56
• 綜述參考文獻53-56
• 致謝56-57
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文目錄57-58
• 個人簡歷58

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

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中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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  本文關鍵詞：新型天蠶素A-馬蓋寧雜合肽破損耐甲氧西林金黃色葡萄球菌細胞膜的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：378105