惡性腫瘤目前已經(jīng)成為威脅人類健康與生命的最嚴(yán)重的疾病之一,其發(fā)病率與死亡率仍處于上升趨勢(shì),合理且有效的藥物應(yīng)用是治療惡性腫瘤的有效手段,這就使得抗腫瘤藥物研發(fā)成為了工業(yè)界和學(xué)術(shù)界藥物研發(fā)的熱點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)表觀遺傳學(xué)中的表觀遺傳修飾及調(diào)控細(xì)胞死亡的細(xì)胞自噬在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。表觀遺傳學(xué)是指在不改變DNA序列的情況下,研究可遺傳基因表達(dá)或細(xì)胞表型變化,這種變化能夠隨著個(gè)體發(fā)育和細(xì)胞增殖穩(wěn)定遺傳下去。表觀遺傳修飾相關(guān)的基因的異常表達(dá)往往伴隨著疾病的發(fā)生:如癌癥、糖尿病以及阿爾茨海默癥等。細(xì)胞自噬是控制細(xì)胞命運(yùn)走向的關(guān)鍵機(jī)制,在腫瘤發(fā)展過程中表現(xiàn)出兩面性:在腫瘤發(fā)生的早期,自噬能夠清除胞內(nèi)的不利因素以抑制腫瘤的發(fā)展;但是腫瘤一旦形成自噬就成為腫瘤細(xì)胞抵制不利環(huán)境的有力武器。除癌癥外,自噬功能的紊亂與人類心力衰竭、神經(jīng)退行性疾病以及炎癥等其他疾病也密切相關(guān)。蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5(PRMT5)是表觀遺傳修飾相關(guān)的酶,它能夠催化組蛋白或者非組蛋白的甲基化修飾過程,其在多種人類惡性腫瘤中的均過表達(dá),是潛在的抗腫瘤靶標(biāo),目前已經(jīng)有兩種PRMT5的抑制劑處于臨床I期研究階段。本文第一...

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
術(shù)語與符號(hào)說明
摘要
abstract
第一章 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5(PRMT5)新型小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)研究
    1.1 前言
        1.1.1 表觀遺傳學(xué)概念及內(nèi)容
        1.1.2 組蛋白修飾概念及內(nèi)容
        1.1.3 蛋白質(zhì)精氨酸的甲基化過程
        1.1.4 蛋白精氨酸的甲基轉(zhuǎn)移酶的底物及生物學(xué)功能
        1.1.5 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5(PRMT5)的概述
        1.1.6 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5(PRMT5)與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系
        1.1.7 蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶5(PRMT5)抑制劑的研究進(jìn)展
        1.1.8 總結(jié)
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與主要儀器設(shè)備
        1.2.1 細(xì)胞株
        1.2.2 試劑及耗材
        1.2.3 主要儀器設(shè)備
        1.2.4 主要溶液及試劑配方
    1.3 5-甲基苯并惡唑類PRMT5 小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)研究
        1.3.1 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        1.3.3 總結(jié)
    1.4 5-芐基-2-苯基硫氮酮類PRMT5 小分子抑制劑的發(fā)現(xiàn)研究
        1.4.1 實(shí)驗(yàn)方法
        1.4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        1.4.3 總結(jié)
第二章 吲哚生物堿11-MT誘導(dǎo)人肺癌細(xì)胞程序性死亡的機(jī)制研究
    2.1 前言
        2.1.1 天然產(chǎn)物抗腫瘤研究概述
        2.1.2 細(xì)胞程序性死亡方式
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        2.2.1 細(xì)胞株與生物堿小分子來源
        2.2.2 材料與試劑
        2.2.3 抗體
        2.2.4 儀器設(shè)備
        2.2.5 試劑及配方
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.3.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        2.3.3 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率的測(cè)定
        2.3.4 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
        2.3.5 細(xì)胞總蛋白提取
        2.3.6 蛋白濃度測(cè)定
        2.3.7 免疫印跡(Western Blot)實(shí)驗(yàn)
        2.3.8 免疫沉淀(IP)實(shí)驗(yàn)
        2.3.9 乳酸脫氫酶(LDH)含量檢測(cè)
        2.3.10 吖啶橙法檢測(cè)自噬現(xiàn)象
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 11-MT抑制人NSCLC細(xì)胞增殖
        2.4.2 11-MT誘導(dǎo)人NSCLC細(xì)胞發(fā)生非凋亡性死亡
        2.4.3 11-MT誘導(dǎo)人NSCLC細(xì)胞發(fā)生程序性壞死(necroptosis)
        2.4.4 11-MT誘導(dǎo)人NSCLC細(xì)胞發(fā)生自噬
        2.4.5 11-MT通過誘導(dǎo)自噬來抑制人NSCLC細(xì)胞的程序性壞死
        2.4.6 11-MT通過AMPK-mTOR信號(hào)通路調(diào)節(jié)自噬
        2.4.7 JNK參與調(diào)控11-MT誘導(dǎo)的自噬過程
    2.5 討論
第三章 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄



本文編號(hào)：3760692