惡性腫瘤目前已經成為威脅人類健康與生命的最嚴重的疾病之一,其發(fā)病率與死亡率仍處于上升趨勢,合理且有效的藥物應用是治療惡性腫瘤的有效手段,這就使得抗腫瘤藥物研發(fā)成為了工業(yè)界和學術界藥物研發(fā)的熱點。研究發(fā)現表觀遺傳學中的表觀遺傳修飾及調控細胞死亡的細胞自噬在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著至關重要的作用。表觀遺傳學是指在不改變DNA序列的情況下,研究可遺傳基因表達或細胞表型變化,這種變化能夠隨著個體發(fā)育和細胞增殖穩(wěn)定遺傳下去。表觀遺傳修飾相關的基因的異常表達往往伴隨著疾病的發(fā)生:如癌癥、糖尿病以及阿爾茨海默癥等。細胞自噬是控制細胞命運走向的關鍵機制,在腫瘤發(fā)展過程中表現出兩面性:在腫瘤發(fā)生的早期,自噬能夠清除胞內的不利因素以抑制腫瘤的發(fā)展;但是腫瘤一旦形成自噬就成為腫瘤細胞抵制不利環(huán)境的有力武器。除癌癥外,自噬功能的紊亂與人類心力衰竭、神經退行性疾病以及炎癥等其他疾病也密切相關。蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)是表觀遺傳修飾相關的酶,它能夠催化組蛋白或者非組蛋白的甲基化修飾過程,其在多種人類惡性腫瘤中的均過表達,是潛在的抗腫瘤靶標,目前已經有兩種PRMT5的抑制劑處于臨床I期研究階段。本文第一...

【文章頁數】：90 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
術語與符號說明
摘要
abstract
第一章 蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)新型小分子抑制劑的發(fā)現研究
    1.1 前言
        1.1.1 表觀遺傳學概念及內容
        1.1.2 組蛋白修飾概念及內容
        1.1.3 蛋白質精氨酸的甲基化過程
        1.1.4 蛋白精氨酸的甲基轉移酶的底物及生物學功能
        1.1.5 蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)的概述
        1.1.6 蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關系
        1.1.7 蛋白精氨酸甲基轉移酶5(PRMT5)抑制劑的研究進展
        1.1.8 總結
    1.2 實驗材料、試劑與主要儀器設備
        1.2.1 細胞株
        1.2.2 試劑及耗材
        1.2.3 主要儀器設備
        1.2.4 主要溶液及試劑配方
    1.3 5-甲基苯并惡唑類PRMT5 小分子抑制劑的發(fā)現研究
        1.3.1 實驗方法
        1.3.2 實驗結果與討論
        1.3.3 總結
    1.4 5-芐基-2-苯基硫氮酮類PRMT5 小分子抑制劑的發(fā)現研究
        1.4.1 實驗方法
        1.4.2 實驗結果與討論
        1.4.3 總結
第二章 吲哚生物堿11-MT誘導人肺癌細胞程序性死亡的機制研究
    2.1 前言
        2.1.1 天然產物抗腫瘤研究概述
        2.1.2 細胞程序性死亡方式
    2.2 實驗材料與試劑
        2.2.1 細胞株與生物堿小分子來源
        2.2.2 材料與試劑
        2.2.3 抗體
        2.2.4 儀器設備
        2.2.5 試劑及配方
    2.3 實驗方法
        2.3.1 細胞復蘇
        2.3.2 細胞形態(tài)學觀察
        2.3.3 細胞生長抑制率的測定
        2.3.4 細胞凋亡檢測
        2.3.5 細胞總蛋白提取
        2.3.6 蛋白濃度測定
        2.3.7 免疫印跡(Western Blot)實驗
        2.3.8 免疫沉淀(IP)實驗
        2.3.9 乳酸脫氫酶(LDH)含量檢測
        2.3.10 吖啶橙法檢測自噬現象
    2.4 實驗結果
        2.4.1 11-MT抑制人NSCLC細胞增殖
        2.4.2 11-MT誘導人NSCLC細胞發(fā)生非凋亡性死亡
        2.4.3 11-MT誘導人NSCLC細胞發(fā)生程序性壞死(necroptosis)
        2.4.4 11-MT誘導人NSCLC細胞發(fā)生自噬
        2.4.5 11-MT通過誘導自噬來抑制人NSCLC細胞的程序性壞死
        2.4.6 11-MT通過AMPK-mTOR信號通路調節(jié)自噬
        2.4.7 JNK參與調控11-MT誘導的自噬過程
    2.5 討論
第三章 總結
參考文獻
致謝
附錄



本文編號：3760692