目的1明確小豆蔻明(cardamonin,CAR)抑制mTOR抑制劑[雷帕霉素(Rapamycin,RAP)或(AZD8055,AZD)]耐藥HeLa細胞及MCF-7細胞增殖的作用。2探討CAR抑制RAP或AZD耐藥細胞增殖的作用機制。方法1藥物濃度遞增法構(gòu)建耐RAP或AZD的HeLa細胞和MCF-7細胞采用藥物濃度遞增法,在體外對HeLa及MCF-7細胞進行誘導篩選,構(gòu)建RAP耐藥細胞(HeLa/RAP、MCF-7/RAP)或AZD耐藥細胞(HeLa/AZD、MCF-7/AZD),經(jīng)RAP與AZD細胞毒性試驗及Western blot鑒定耐藥程度。2有限稀釋法獲取單細胞源性子代細胞亞克隆3細胞培養(yǎng)在常規(guī)培養(yǎng)條件下(37℃、5%CO₂、10%胎牛血清、100μg·mL^-1鏈霉素及100 U·mL^-1青霉素),1640培養(yǎng)液培養(yǎng)HeLa系列細胞(HeLa、HeLa/RAP、HeLa/AZD),High-glucose DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)MCF-7系列細胞(MCF-7、MCF-7/RAP、MCF-7/AZD)。保持細胞單層貼...

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【學位級別】：碩士

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英文縮略詞對照表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1 實驗材料
        1.1 細胞
        1.2 主要試劑
        1.3 主要溶液配制
        1.4 主要儀器
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 構(gòu)建RAP或AZD耐藥的HeLa細胞和MCF-7細胞
        2.3 細胞形態(tài)觀察
        2.4 細胞計數(shù)
        2.5 有限稀釋法獲取單克隆
        2.6 MTT法測定細胞增殖
        2.7 MTT法測定細胞生長曲線
        2.8 克隆及含藥單克隆形成實驗測定細胞增殖
        2.9 細胞遷移實驗
        2.10 Western blot檢測蛋白表達
        2.11 統(tǒng)計學分析
結(jié)果
    1 成功構(gòu)建RAP或AZD耐藥的HeLa細胞和MCF-7細胞
        1.1 RAP或AZD耐藥的HeLa細胞(HeLa/RAP、HeLa/AZD)
        1.2 RAP或AZD耐藥的MCF-7細胞(MCF-7/RAP、MCF-7/AZD)
    2 CAR抑制RAP或AZD耐藥細胞增殖的作用
        2.1 CAR抑制耐藥細胞的增殖
        2.2 CAR抑制耐藥細胞的克隆形成
    3 CAR抑制RAP或AZD耐藥細胞遷移及β-catenin蛋白表達的作用
    4 CAR抑制RAP或AZD耐藥細胞的mTOR信號通路活性
    5 CAR抑制RAP或AZD耐藥細胞ABC跨膜轉(zhuǎn)運蛋白MDR1表達
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
致謝



本文編號：3760187