人急性髓性白血�。ˋML）的發(fā)生與發(fā)展都與線粒體功能異常和線粒體DNA（mtDNA）突變有關(guān)。1,4-萘醌衍生物是一類(lèi)重要的抗癌分子,其在細(xì)胞內(nèi)的主要作用靶點(diǎn)是核DNA。然而,它們對(duì)mtDNA的作用還很少被研究。我們前期研究發(fā)現(xiàn)2-氯-1,4-萘醌具有顯著的抗白血病活性。因此,本論文以2-氯-1,4-萘醌為先導(dǎo)結(jié)構(gòu),研究?jī)?nèi)容如下:1.目標(biāo)化合物的合成:在先導(dǎo)結(jié)構(gòu)的C-3位引入烷基側(cè)鏈和氮烷基側(cè)鏈,苯環(huán)引入連三甲氧基,我們合成了6個(gè)衍生物。2.目標(biāo)化合物抗細(xì)胞增殖活性評(píng)價(jià)（MTT法）:我們測(cè)定了目標(biāo)化合物對(duì)HL-60細(xì)胞（急性髓性白血病細(xì)胞）和正常細(xì)胞WI-38（人胚肺成纖維細(xì)胞）的抗細(xì)胞增殖活性。結(jié)果表明,化合物18活性最好(IC₅₀=2.85μM)和選擇性指數(shù)（SI=8.07）較高。3.化合物18誘導(dǎo)mt DNA損傷和線粒體功能障礙:18引發(fā)HL-60細(xì)胞的S期明顯阻滯和G2/M期的輕度阻滯,結(jié)果提示細(xì)胞可能存在mtDNA損傷。WB結(jié)果表明,18降低mtDNA轉(zhuǎn)錄因子A和mtDNA特異性聚合酶γ的蛋白表達(dá)量,證實(shí)了mtDNA損傷的存在。18對(duì)于HL-60ρ

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Graphical abstract
Abstract
第一章 綜述
    1.1 引言
    1.2 1,4-萘醌類(lèi)化合物抗腫瘤活性研究
        1.2.1 胡桃醌的抗腫瘤活性
        1.2.2 白花丹素的抗腫瘤活性
        1.2.3 拉帕醌的抗腫瘤活性
        1.2.4 指甲花醌的抗腫瘤活性
        1.2.5 甲萘醌 (維生素k)的抗腫瘤活性
    1.3 線粒體與急性髓性白血病的關(guān)系
        1.3.1 線粒體氧化磷酸化與急性髓性白血病的關(guān)系
        1.3.2 線粒體能量代謝與急性髓性白血病的關(guān)系
        1.3.3 細(xì)胞應(yīng)激與線粒體物質(zhì)代謝對(duì)急性髓性白血病的影響
        1.3.4 線粒體作為抗急性髓性白血病藥物的新靶點(diǎn)
    1.4 抗急性髓性白血病藥物的研究進(jìn)展
        1.4.1 阿糖胞苷
        1.4.2 全反式維甲酸和三氧化二砷
        1.4.3 米哚妥林
        1.4.4 恩西地平
        1.4.5 CPX-351和吉妥單抗奧佐米星
第二章 實(shí)驗(yàn)部分
    2.1 試劑和儀器
        2.1.1 試劑
        2.1.2 儀器
    2.2 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物的合成
        2.2.1 合成路線
        2.2.2 合成方法
    2.3 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物的細(xì)胞毒活性測(cè)定
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.3.2 抗細(xì)胞增殖活性的測(cè)定
    2.4 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物誘導(dǎo)mtDNA損傷的測(cè)定
        2.4.1 細(xì)胞周期
        2.4.2 Westernblot檢測(cè)mt-TFA和DNApoly-γ蛋白表達(dá)
        2.4.3 mtDNA損傷細(xì)胞的構(gòu)建與鑒定
    2.5 2-氯-3烷基-1,4-萘醌衍生物誘導(dǎo)線粒體損傷的測(cè)定
        2.5.1 線粒體膜電位測(cè)定
        2.5.2 細(xì)胞內(nèi)ATP水平檢測(cè)
    2.6 2-氯-3-烷基-1,4-萘醌衍生物誘導(dǎo)谷胱甘肽耗竭(GSH)的測(cè)定
        2.6.1 GSH和GSSG含量測(cè)定
        2.6.2 活性氧（ROS）檢測(cè)
        2.6.3 GSH含量對(duì)ROS和細(xì)胞毒活性的影響
        2.6.4 化合物18與GSH反應(yīng)的紫外檢測(cè)
        2.6.5 化合物18與谷胱甘肽加合物的的合成與HRMS測(cè)定
    2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
    3.1 引言
    3.2 化學(xué)合成
    3.3 抗增殖活性評(píng)估
    3.4 化合物18誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯及線粒體DNA損傷
    3.5 化合物18誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞線粒體功能障礙
    3.6 化合物18誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽耗竭
    3.7 實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論
第四章 結(jié)論
    4.1 主要結(jié)論
    4.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間工作與研究成果
致謝
附錄



本文編號(hào)：3735821