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低分子肝素對宮頸癌細胞增殖及凋亡的影響

發(fā)布時間:2022-10-05 23:17
  目的研究低分子肝素(LMWH)對宮頸癌細胞增殖、凋亡的影響及其對微小RNA-409-3p(miR-409-3p)/核糖核苷酸還原酶調(diào)節(jié)亞基M2(RRM2)分子軸的調(diào)控作用。方法體外培養(yǎng)宮頸癌細胞HCC94,實驗分為對照組(正常培養(yǎng)細胞)和低、中、高劑量實驗組(LMWH-L,LMWH-M,LMWH-H組,LMWH濃度為25,50,100 U·mL-1)、miR-NC組(轉(zhuǎn)染陰性對照)、miR-409-3p組(轉(zhuǎn)染miR-409-3p mimics)、LMWH+anti-miR-NC組(轉(zhuǎn)染anti-miR-NC,LMWH濃度為100 U·mL-1)、LMWH+anti-miR-409-3p組(轉(zhuǎn)染anti-miR-409-3p,LMWH濃度為100 U·mL-1)。以噻唑藍(MTT)法檢測細胞增殖情況;以流式細胞術檢測細胞凋亡率;以實時熒光定量聚合酶鏈反應(qRT-PCR)與蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)分別檢測miR-409-3p、RRM2的表達量;以雙熒光素酶報告實驗驗證miR-409-3p與RRM2的靶向關... 

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料與試劑
    2 方法
        2.1 實驗分組與細胞培養(yǎng)[4]
        2.2 主要觀察指標
            2.2.1 以MTT檢測細胞增殖情況[5]
            2.2.2 以流式細胞術檢測細胞凋亡率[6]
            2.2.3 以實時熒光定量聚合酶鏈反應(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)檢測細胞中miR-409-3p、RRM2 mRNA的表達水平[7]
        2.3 次要觀察指標
            2.3.1 雙熒光素酶報告基因檢測miR-409-3p的靶基因[8]
            2.3.2 以蛋白質(zhì)印跡(Western blot)法檢測RRM2、Ki-67、PCNA、Bcl-2、Bax蛋白表達[9]
    3 統(tǒng)計學處理
結(jié) 果
    1 LMWH對HCC94細胞增殖的影響
    2 LMWH對HCC94細胞凋亡的影響
    3 LMWH對HCC94細胞中miR-409-3p、RRM2 mRNA表達量的影響
    4 miR-409-3p過表達對HCC94細胞增殖及凋亡的影響
    5 miR-409-3p靶向調(diào)控RRM2
    6 干擾miR-409-3p可減弱LMWH對HCC94細胞增殖及凋亡的作用
討 論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]miR-142-3p通過調(diào)控ELAVL1表達影響過氧化氫誘導的心肌細胞損傷的分子機制[J]. 邴森,袁博,王昌育,萬毅,王利,鄒金國.  中華細胞與干細胞雜志(電子版). 2019(03)
[2]MTT法檢測鈦酸鋇涂層對小鼠成纖維細胞L929增殖率的影響[J]. 郭曉瑨,吳文慧,劉靜亞,胡大艷,陳乃玲.  實用口腔醫(yī)學雜志. 2016(05)
[3]姜黃素對肝星狀細胞MyD88蛋白表達及細胞凋亡的影響[J]. 宋慧東,葉國榮,羅國彪,歐陽鵬,舒建昌.  中國臨床研究. 2016(09)
[4]Nfic基因3′UTR雙熒光素酶報告質(zhì)粒的構(gòu)建及其與miR-20a靶向關系的驗證[J]. 王珊,李曉霞,周杰,王寶利.  天津醫(yī)藥. 2016(09)
[5]膀胱癌相關蛋白對宮頸癌細胞的影響及其在細胞周期信號傳導網(wǎng)絡中的作用[J]. 謝秋嫻,鄭曼佳,謝昭雄,陳嬋玉,丁淼.  廣東醫(yī)學. 2016(01)
[6]低分子肝素對人乳腺癌細胞MCF-7侵襲抑制實驗研究[J]. 龐新,王鵬.  河北醫(yī)科大學學報. 2013 (06)
[7]低分子肝素對A431細胞株生物學行為的干預研究[J]. 馮新,曹一鑫,王建力,陳莉.  中華皮膚科雜志. 2012 (08)
[8]低分子肝素對種植性乳腺癌生長和轉(zhuǎn)移的抑制作用[J]. 劉飛,李漢軍,李介秋,湯恢煥,劉庚勛,葛健君,孔屏.  中華實驗外科雜志. 2010 (01)



本文編號:3686689

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