發(fā)布時間：2022-09-27 20:37

　　在現(xiàn)在的社會發(fā)展中,由于環(huán)境的污染和人們高節(jié)奏的生活習(xí)慣,以及不合理的飲食習(xí)慣,癌癥和腫瘤的病發(fā)率每年處于不斷提高。而對于目前治療癌癥的主要手段就是手術(shù)切除、放療和化療,再加上治療癌癥需要的費用很高,容易對患者造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此,如何尋找一種使患者恢復(fù)快,有效并且無毒的藥物對癌癥和腫瘤的臨床治療具有重要意義�；碧侵且环N由非致病性的酵母菌次級代謝發(fā)酵產(chǎn)生的一種胞外多糖類的生物表面活性劑,從槐糖脂的研究發(fā)現(xiàn)來看不僅具有優(yōu)良的理化特性,而且無毒,不會造成環(huán)境污染,并且具有良好的抗腫瘤活性。近年來研究發(fā)現(xiàn)槐糖脂在醫(yī)藥領(lǐng)域有了進(jìn)一步的發(fā)展,越來越多的研究者開始不斷探索槐糖脂的抗腫瘤活性,本文首先研究了以不同碳源為底物發(fā)酵生產(chǎn)的槐糖脂,其次探討了槐糖脂的pH溶解性與抗腫瘤活性的關(guān)系,然后研究并比較不同碳源底物的槐糖脂抗腫瘤活性,最后討論了槐糖脂與阿霉素聯(lián)合作用的抗腫瘤作用以及機(jī)理研究,為槐糖脂在今后能成為一種新型藥物提供了理論基礎(chǔ)。本文主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:1.不同碳源為底物發(fā)酵生產(chǎn)槐糖脂的研究,本文在實驗室中分別以油酸、菜籽油、等量的油酸和甘油混合物為底物的槐糖脂進(jìn)行理化性質(zhì)的比較,以... 

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 槐糖脂
        1.1.1 槐糖脂的簡介
        1.1.2 槐糖脂的產(chǎn)生菌
        1.1.3 槐糖脂生物發(fā)酵合成的方法
        1.1.4 槐糖脂發(fā)酵底物的多樣性
    1.2 槐糖脂醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用
    1.3 本課題的研究目的和意義
第2章 不同碳源為底物生產(chǎn)槐糖脂的研究
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗所用菌株
        2.1.2 實驗所用的試劑
        2.1.3 實驗所用儀器
        2.1.4 生產(chǎn)槐糖脂培養(yǎng)基的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 槐糖脂發(fā)酵液的pH
        2.2.2 菌體干重的測定
        2.2.3 殘?zhí)菧y定
        2.2.4 槐糖脂含量的測定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 不同碳源底物發(fā)酵液的各項檢測
        2.3.2 不同碳源底物發(fā)酵生產(chǎn)槐糖脂的影響
    2.4 討論
    2.5 本章小結(jié)
第3章 槐糖脂的pH溶解性對細(xì)胞抗腫瘤活性影響的研究
    3.1 實驗材料
        3.1.1 實驗所用菌株
        3.1.2 實驗所用的細(xì)胞株
        3.1.3 實驗樣品
        3.1.4 實驗所用的試劑
        3.1.5 實驗所用儀器
        3.1.6 生產(chǎn)槐糖脂培養(yǎng)基的配制
        3.1.7 細(xì)胞的完全培養(yǎng)基配制
        3.1.8 細(xì)胞用液的配制
        3.1.9 pH調(diào)整液的配制
    3.2 實驗方法
        3.2.1 內(nèi)酯型雙乙�；碧侵闹苽�
        3.2.2 細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
        3.2.3 樣品的pH處理
        3.2.4 MTT法分析細(xì)胞存活率
        3.2.5 數(shù)據(jù)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 Hela細(xì)胞在內(nèi)酯型槐糖脂不同濃度下的最佳pH值
        3.3.2 Hep G2 細(xì)胞在內(nèi)酯型槐糖脂不同濃度下的最佳pH值
    3.4 討論
    3.5 本章小結(jié)
第4章 不同碳源條件下的槐糖脂對抗腫瘤活性的比較研究
    4.1 實驗材料
        4.1.1 菌株
        4.1.2 細(xì)胞
        4.1.3 試劑
        4.1.4 實驗儀器
        4.1.5 培養(yǎng)基的配制
        4.1.6 細(xì)胞培養(yǎng)基以及細(xì)胞用液的配制
    4.2 實驗方法
        4.2.1 內(nèi)酯型雙乙�；碧侵闹苽�
        4.2.2 樣品的pH處理
        4.2.3 MTT法分析細(xì)胞存活率
        4.2.4 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 不同底物發(fā)酵生產(chǎn)內(nèi)酯型槐糖脂的抗腫瘤效果的研究
        4.3.2 不同底物生產(chǎn)的內(nèi)酯型槐糖脂對細(xì)胞抗腫瘤作用比較的研究
    4.4 討論
    4.5 本章小結(jié)
第5章 槐糖脂和阿霉素聯(lián)合作用抗腫瘤效果的研究以及作用機(jī)理
    5.1 實驗材料
        5.1.1 菌株
        5.1.2 細(xì)胞
        5.1.3 樣品
        5.1.4 實驗試劑
        5.1.5 實驗器材
        5.1.6 細(xì)胞培養(yǎng)基以及細(xì)胞用液的配制
    5.2 實驗方法
        5.2.1 鹽酸阿霉素溶液和內(nèi)酯型槐糖脂溶液的配制
        5.2.2 確定內(nèi)酯型槐糖脂和鹽酸阿霉素作用于腫瘤細(xì)胞的IC_(50)的濃度
        5.2.3 確定內(nèi)酯型槐糖脂和鹽酸阿霉素作用于腫瘤細(xì)胞的最小抑制濃度MIC
        5.2.4 內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于腫瘤細(xì)胞的研究
        5.2.5 Giemsa染色試劑的配制和AO-EB染色試劑的配制
        5.2.6 Giemsa染色樣品作用后的細(xì)胞形態(tài)變化
        5.2.7 AO-EB染色樣品作用后的細(xì)胞核形態(tài)變化
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 鹽酸阿霉素作用于兩種腫瘤細(xì)胞的IC50濃度和MIC
        5.3.2 以油酸為底物生產(chǎn)的內(nèi)酯型槐糖脂作用于兩種腫瘤細(xì)胞的IC_(50)濃度和MIC
        5.3.3 以菜籽油為底物生產(chǎn)的內(nèi)酯型槐糖脂作用于兩種腫瘤細(xì)胞的IC_(50)濃度和MIC
    5.4 內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于腫瘤細(xì)胞的研究
        5.4.1 以菜籽油為底物的內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于Hela細(xì)胞的研究
        5.4.2 以油酸為底物的內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于Hela細(xì)胞的研究
        5.4.3 以菜籽油為底物的內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于Hep G2細(xì)胞的研究
        5.4.4 以油酸為底物的內(nèi)酯型槐糖脂與鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于Hep G2細(xì)胞的研究
    5.5 內(nèi)酯型槐糖脂和鹽酸阿霉素聯(lián)合作用于兩種腫瘤細(xì)胞的機(jī)理研究
        5.5.1 Giemsa染色觀察兩種樣品作用后Hela細(xì)胞和Hep G2 細(xì)胞形態(tài)的變化
        5.5.2 AO-EB染色觀察兩種樣品作用后Hela和 Hep G2 的細(xì)胞核在熒光顯微鏡下的變化
        5.5.3 AO-EB染色觀察兩種樣品作用后Hela和 Hep G2 的細(xì)胞核在激光共聚焦顯微鏡下變化
    5.6 討論
    5.7 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
    結(jié)論
    創(chuàng)新點
    展望
參考文獻(xiàn)
致謝
研究生期間主要科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]探討毛細(xì)式液基細(xì)胞學(xué)薄層染色技術(shù)對宮頸癌篩查應(yīng)用價值研究[J]. 劉新梅.  中外醫(yī)療. 2016(01)
[2]槐糖脂的生物合成[J]. 李慧,馬曉靜,郭偉,李加山,宋欣.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(17)
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博士論文
[1]槐糖脂產(chǎn)生菌擬威克酵母的誘變育種、遺傳改造及槐糖脂體內(nèi)和體外抗腫瘤機(jī)制研究[D]. 李慧.山東大學(xué) 2013
[2]槐糖脂補料發(fā)酵及抗真菌、抗腫瘤活性的研究[D]. 邵凌健.山東大學(xué) 2010
[3]槐糖脂產(chǎn)生菌的篩選及槐糖脂抑菌和抗腫瘤作用的研究[D]. 陳靜.山東大學(xué) 2006

碩士論文
[1]金屬離子對擬威克酵母槐糖脂產(chǎn)量和組成的調(diào)控作用及機(jī)理研究[D]. 張紅蕊.齊魯工業(yè)大學(xué) 2014
[2]槐糖脂對作物病原真菌的抗菌作用及其新型生物殺菌劑的開發(fā)[D]. 伏圣秘.齊魯工業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3681581