發(fā)布時間：2022-09-27 19:40

　　乳腺癌是嚴重威脅全球女性健康的常見惡性腫瘤之一。在美國女性癌癥中是除了皮膚癌之外的最普遍的癌癥,占接近三分之一。美國癌癥協(xié)會2018年最新數(shù)據(jù)表明,乳腺癌在預(yù)計新發(fā)人數(shù)上位居第一,預(yù)計死亡人數(shù)上排名第二（僅次于肺及支氣管癌）。目前,乳腺癌治療存在很多難點,特別是一些患者在接受治療時發(fā)生耐藥及術(shù)后放化療后腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。近些年來,有研究表明,自噬在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展以及治療過程中發(fā)揮著重要的作用。如何改善乳腺癌的治療效果已成為研究熱點。自噬是一種廣泛存在于真核生物的細胞中高度保守的一種依賴溶酶體的降解途徑,是通過清除自身衰老、受損的細胞器,或通過降解蛋白質(zhì)、脂類等生物大分子供細胞再次利用,以維持細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。自噬常作為一種細胞在特殊情況下的保護自我的一種機制,例如在機體出現(xiàn)損傷、缺氧、應(yīng)激等病理生理情況后一種調(diào)控細胞代謝活動的過程,可被認為是與化療失敗的重要耐藥機制之一。本課題選用廣譜抗癌藥多西他賽（DTX）和自噬抑制ATG7siRNA（siATG7）,通過硫辛酸修飾的固有無序多肽形成的多肽膠束加以介導(dǎo),并載入化療藥多西他賽,從體內(nèi)和體外對其抗乳腺癌的作用機制進行研究。本課題分為三個部分... 

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 共載多西他賽和 siATG7的硫辛酸多肽膠束構(gòu)建及表征
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
    2 實驗方法
        2.1 多肽載體合成
        2.2 硫辛酸修飾的多肽載體的表征
        2.3 臨界膠束濃度考察
        2.4 共載多西他賽和siATG7硫辛酸多肽膠束構(gòu)建
    3 結(jié)果
        3.1 LA-CL的純度鑒定結(jié)果
        3.2 多肽LA-CLss聚合物的1H-NMR鑒定結(jié)果
        3.3 臨界膠束濃度考察結(jié)果
        3.4 共載多西他賽和siATG7硫辛酸多肽膠束粒徑和電位
        3.5 載藥量和包封率
        3.6 瓊脂糖凝膠電泳考察結(jié)果
        3.7 多西他賽體外釋放
    4 討論
    5 小結(jié)
第二章 共載多西他賽和siATG7的硫辛酸多肽膠束抗乳腺癌作用體外評價
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
    2 實驗方法
        2.1 實驗細胞培養(yǎng)
        2.2 不同乳腺癌細胞系中體外抗增殖作用考察
        2.3 不同乳腺癌細胞系中促凋亡作用考察
        2.4 細胞攝取考察
        2.5 胞內(nèi)分布考察
        2.6 周期阻滯考察
        2.7 流式細胞術(shù)檢測細胞自噬
        2.8 激光共聚焦實驗觀察自噬流
        2.9 透射電鏡觀察自噬泡
        2.10 實時熒光定量PCR實驗
        2.11 Westernblot實驗
        2.12 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 不同乳腺癌細胞系中體外抗增殖作用考察結(jié)果
        3.2 不同乳腺癌細胞系中促凋亡作用考察結(jié)果
        3.3 細胞攝取考察結(jié)果
        3.4 胞內(nèi)分布考察結(jié)果
        3.5 周期阻滯考察結(jié)果
        3.6 流式細胞術(shù)檢測細胞自噬結(jié)果
        3.7 激光共聚焦實驗觀察自噬流結(jié)果
        3.8 透射電鏡觀察自噬泡結(jié)果
        3.9 實時熒光定量PCR實驗結(jié)果
        3.10 Westernblot實驗結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
第三章 共載多西他賽和siATG7的多肽膠束抗乳腺癌作用體內(nèi)評價
    1 儀器和材料
        1.1 儀器
        1.2 試劑和材料
        1.3 實驗動物
    2 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2 人乳腺癌細胞皮下裸鼠移植瘤模型的構(gòu)建
        2.3 共載多西他賽和siATG7多肽膠束的體內(nèi)分布情況
        2.4 共載多西他賽和siATG7多肽膠束體內(nèi)藥效考察
        2.5 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計方法
    3 結(jié)果
        3.1 裸鼠移植瘤造模結(jié)果
        3.2 多肽膠束體內(nèi)分布實驗考察結(jié)果
        3.3 腫瘤生長抑制及生存期考察結(jié)果
        3.4 組織學及免疫組化考察結(jié)果
    4 討論
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻
特色與創(chuàng)新之處
綜述
    1 引言
    2 CPPS分類
    3 CPPS穿膜機制
    4 CPPS在靶向治療腫瘤中的應(yīng)用
    5 結(jié)語與展望
    參考文獻
科研工作簡介
致謝



本文編號：3681498