目的研究敏感受體（CaSR）在高糖誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）中的表達及其與內(nèi)質網(wǎng)應激的關系。方法將HUVEC細胞分為正常糖對照組（NG組）、高糖組（HG組）、正常糖+CaSR激動劑組（NG+GdCl₃組）、高糖+CaSR拮抗劑組（HG+NPS-2390組）,以不同條件孵育72 h。用CCK-8法檢測細胞存活率,用試劑盒檢測乳酸脫氫酶、一氧化氮、脂質過氧化物、活性氧和細胞內(nèi)鈣離子的水平。用Western blot法檢測CaSR和細胞內(nèi)質網(wǎng)應激標志性蛋白的表達水平。結果 HG組和NG+GdCl₃組的細胞存活率下降,LDH漏出增多,細胞內(nèi)鈣離子濃度升高,CaSR蛋白表達增多,氧化應激反應增強,內(nèi)質網(wǎng)應激標志蛋白GRP78、p-PERK、p-IRE1α蛋白表達水平增高,說明高糖和CaSR激活會導致HUVEC細胞損傷,發(fā)生內(nèi)質網(wǎng)應激。HG+NPS-2390組細胞損傷、氧化應激和內(nèi)質網(wǎng)應激明顯減輕。結論 CaSR參與了高糖導致的HUVEC細胞損傷和內(nèi)質網(wǎng)應激,抑制CaSR,可減輕高糖導致的內(nèi)皮細胞損傷。 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞
        1.1.2 藥品與試劑
        1.1.3 實驗儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)與分組
        1.2.2 細胞損傷與毒性的檢測
        1.2.3 細胞氧化應激的檢測
        1.2.4 細胞內(nèi)鈣離子濃度的檢測
        1.2.5 Western blot檢測相關蛋白的表達
        1.2.6 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 高糖及CaSR導致HUVEC細胞的損傷情況
    2.2 高糖對HUVEC細胞鈣離子濃度和CaSR蛋白表達的影響
    2.3 高糖及CaSR對HUVEC細胞氧化應激的影響
    2.4 高糖及CaSR對HUVEC細胞內(nèi)質網(wǎng)應激的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]白楊素對高糖損傷血管內(nèi)皮的影響[J]. 張夏麗,韓斯嘉,羅樂,陳敏,李潔,田晴晴,高雪梅,張軒萍.  中國藥理學通報. 2017(05)



本文編號：3646448