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GFP標記臍帶間充質(zhì)干細胞治療mdx小鼠的藥代動力學(xué)研究

發(fā)布時間:2022-02-24 00:50
  目的應(yīng)用小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞(mUCMSC)示蹤方法和mdx小鼠研究細胞藥物的藥代動力學(xué)。方法 GFP轉(zhuǎn)染標記m UCMSC,局部注射0. 4 m L(5×106個GFP-mUCMSC)細胞懸液到腓腸肌和膈肌損傷的mdx小鼠腹腔,在1 h、3 h、5 h、24 h、1周等5個時間點用活體成像系統(tǒng)觀察小鼠體內(nèi)的熒光信號,觀察結(jié)束后處死小鼠,采集膈肌制作冰凍切片并在熒光顯微鏡下觀察熒光信號。結(jié)果 m UCMSC與MOI為150的病毒載體共培養(yǎng)72 h可以成功標記GFP。局部腹腔注射0. 4 mL(5×106個GFP-mUCMSC)后1 h,用活體成像系統(tǒng)觀察到mdx小鼠腹壁下注射細胞的部位有明亮的綠色熒光集中分布,隨著時間延長,熒光面積逐漸減小,24 h后熒光強度明顯變?nèi)?熒光面積大幅縮小,一周后熒光信號幾乎消失;此時,在熒光顯微鏡下仍可觀察到mdx小鼠膈肌內(nèi)存在熒光信號,與未注射細胞的對照組有顯著差異(P﹤0. 05)。結(jié)論注射到腹腔的臍帶間充質(zhì)干細胞可以進入損傷的膈肌,其GFP熒光信號1周內(nèi)逐漸消失,活體成像系統(tǒng)是監(jiān)測干細胞體內(nèi)動態(tài)分布和清除率的有效工具。 

【文章來源】:中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2020,30(02)北大核心

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 m UCMSC的GFP轉(zhuǎn)染標記
        1.3.2 腹腔注射及活體成像觀察
        1.3.3 膈肌組織學(xué)鏡檢觀察
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 GFP轉(zhuǎn)染標記的m UCMSC
    2.2 體內(nèi)m UCMSC的分布和降解
    2.3 鏡檢觀察膈肌內(nèi)m UCMSC的分布
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]細胞的命運:間充質(zhì)干細胞的藥代動力學(xué)[J]. 韓立,惠利健,潘國宇.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2018(06)
[2]綠色熒光蛋白標記的Lewis肺癌小鼠原位模型的建立及鑒定[J]. 王鋒,田小麗,馬詩靜,龔龑,謝叢華.  武漢大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2018(05)
[3]應(yīng)用小動物活體成像追蹤觀察EGFP標記的間充質(zhì)干細胞[J]. 王偉,陳超,劉延明,張男,呂麗燕,宋現(xiàn)讓,韓發(fā)彬.  中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2016(02)
[4]小鼠臍帶間充質(zhì)干細胞的體外誘導(dǎo)分化[J]. 朱慧,葉莉,何潔,余璞,王金祥,王強,趙晶,龐榮清,白杰英.  中國實驗動物學(xué)報. 2015(06)



本文編號:3641633

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