安莎霉素是一類結(jié)構(gòu)獨特、生物活性多樣的大環(huán)內(nèi)酰胺類抗生素,主要存在于放線菌和少數(shù)的植物�；蚪M測序和生物信息學(xué)分析結(jié)果表明,放線菌蘊藏著巨大的次級代謝潛能。對放線菌的基因進(jìn)行遺傳操作,獲得基因簇過表達(dá)突變株,即可能獲得目標(biāo)化合物,這將對新藥的發(fā)現(xiàn)有重要貢獻(xiàn)。本論文研究以AHBA合酶基因陽性菌株疣孢菌（Verrucosispora sp.NS0172）和鏈霉菌（Sreptomyces sp.S035）的過表達(dá)突變株為實驗材料,進(jìn)行了次級代謝產(chǎn)物的分離純化,共獲得了30個化合物,通過MS、NMR等方法確定了它們的結(jié)構(gòu),其中20個為新化合物,包括1個開環(huán)三酮安莎霉素和12個開環(huán)四酮安莎霉素類化合物。Verrucosispora sp.NS0172菌株分離自廈門潮間帶,PCR實驗結(jié)果表明它是一株AHBA合酶基因陽性菌,有產(chǎn)生安莎霉素類化合物的潛力。本課題組的李穩(wěn)碩士過表達(dá)vas10和vas12基因,分別構(gòu)建了NS0172-OELAL和NS0172-SARP突變株。作者從NS0172-OELAL突變株的YMG瓊脂培養(yǎng)基產(chǎn)物中分離得到了 1個已知化合物;從NS0172-SARP突變株的YMG瓊脂培... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．３化合物Ａｌ?（１）的ＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ相關(guān)信號??

體平板小批量發(fā)酵對照菌株ＮＳ０１７２和突變株ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ，常規(guī)處理后將其??粗體物進(jìn)行ＨＰＬＣ檢測（洗脫條件見表３．２），發(fā)現(xiàn)保留時間１２－１５?ｍｉｎ含有差異峰??（圖３．４）。因此對突變株０１７２－ＳＡＲＰ的次級代謝產(chǎn)物進(jìn)行了研究。??１３??

?Ｐ９?（１０）?Ｐ１０（１１）??圖３．６分離自突變菌株ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ的化合物的結(jié)構(gòu)??（見電子版文件夾ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ）??３．３．４．１化合物Ｐ１?（２）的結(jié)構(gòu)解析??化合物Ｐ１為淺黃色油狀物，易溶于ＭｅＯＨ，將其溶于ｍｅｔｈａｎｏｌ－山中進(jìn)行??ＮＭＲ測定。??高分辨質(zhì)譜測得化合物Ｐ１的準(zhǔn)分子離子峰為ｍ／ｚ?３２２．１６５７?［Ｍ?＋?Ｈ］＋，推測??其分子量為３２１０＆，分子式為（：１７１１２辦０５，不飽和度為７。１１？＾［１１、１３（：－１＾１??和ＨＳＱＣ信號（表３．４）顯示化合物Ｐ１含有１７個碳原子，包括２個甲基，３個??亞甲基，７個次甲基（包括１個氧取代的次甲基和５個烯碳），５個季碳（包括??２個羰基碳）。根據(jù)１ＨＪＨＣＯＳＹ相關(guān)信號（表３．３）可以確定Ｃ－７－Ｃ－１３片段。??Ｈ－３?與?Ｃ－１?和?Ｃ－５，?Ｈ－１?與?Ｃ－３、Ｃ－５?和?Ｃ－７?以及?Ｈ－５?與?Ｃ－ｌ、Ｃ－３?和?Ｃ－７?之間存??在的ＨＭＢＣ信號（表３．４），表明化合物含有一個三取代的苯環(huán)單元，然后再根??據(jù)Ｈ－１３與Ｃ－１４之間存在ＨＭＢＣ信號

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]海洋真菌次級代謝產(chǎn)物化學(xué)成分及生物活性的研究進(jìn)展[J]. 楊加庚,梅益勤,裴月湖.  沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2013(01)
[2]產(chǎn)紫青霉中的活性成分[J]. 王濤,張祎,齊秀蘭,裴月湖.  沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2001(05)

碩士論文
[1]三株土壤放線菌次級代謝產(chǎn)物的研究[D]. 尉飛飛.山東大學(xué) 2018



本文編號：3610214