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含釩多金屬氧酸鹽抗乳腺癌MCF-7細(xì)胞作用研究

發(fā)布時間:2017-04-20 15:17

  本文關(guān)鍵詞:含釩多金屬氧酸鹽抗乳腺癌MCF-7細(xì)胞作用研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:惡性腫瘤是嚴(yán)重危害人類健康的重大疾病。A Cancer Journal for Clinicians雜志中《2015中國癌癥統(tǒng)計》報告了我國癌癥的發(fā)病率、死亡率以及生存率的預(yù)估值。女性五種常見腫瘤為乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)直腸癌和食管癌,其中乳腺癌堪稱女性殺手,死亡率達(dá)到15%,并呈現(xiàn)逐年遞增趨勢。因此,加強對乳腺癌治療的研究一直是我國政府亟待解決的問題之一;瘜W(xué)治療是腫瘤治療的重點,研發(fā)高效、低毒、特異的抗腫瘤藥物是腫瘤藥物治療的熱點和難點。多酸是一類在分子水平上可設(shè)計的、結(jié)構(gòu)明確的、性質(zhì)可調(diào)控的、納米尺度的簇合物,具有抗病毒、抗菌、抗腫瘤的生物活性。本課題的主要研究內(nèi)容是合成系列含釩多金屬氧酸鹽,并研究其抗乳腺癌作用及其機制。方法:1.根據(jù)文獻(xiàn)中報道方法合成6種含釩多金屬氧酸鹽,采用紅外光譜、紫外光譜、元素分析的方法對6種含釩多金屬氧酸鹽進(jìn)行表征;2.根據(jù)美國NCI抗癌化合物體外篩選方法進(jìn)行含釩多金屬氧酸鹽的濃度梯度設(shè)定,采用MTT法檢測含釩多金屬氧酸鹽的抗乳腺癌MCF-7細(xì)胞作用活性;3.采用紫外光譜、熒光光譜法研究含釩多金屬氧酸鹽與ct DNA之間的相互作用;4.采用紫外光譜、熒光光譜、同步熒光法檢測含釩多金屬氧酸鹽與BSA之間相互作用;5.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測含釩多金屬氧酸鹽對細(xì)胞周期的影響;6.采用流式細(xì)胞術(shù)檢測含釩多金屬氧酸鹽的誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用;7.采用Hoechst33342/PI染色激光共聚焦顯微鏡觀察MCF-7細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果:1.合成6種含釩多金屬氧酸鹽;2.與對照組相比,三種多酸鹽PW9V3、PMo10V2、V18O42對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞均具有顯著的生長抑制作用(p0.05)。并且隨著多酸鹽藥物濃度(7.812,15.625,31.25,62.5,125,250,500μM)的逐漸增加,其抑制作用逐漸增強,在三種多酸鹽PW9V3、PMo10V2、V18O42作用48h后,三種多酸鹽在500μM時的抑制率高達(dá)73.61%,90.08%和80.24%。3.PW9V3、PMo10V2、V18O42與ct DNA的相互作用方式為靜電作用或者溝槽作用,并且PW9V3、PMo10V2、V18O42與BSA之間存在相互作用,能夠更好的與酪氨酸殘基相結(jié)合,改變BSA的構(gòu)像。4.PW9V3、PMo10V2、V18O42能夠?qū)⒓?xì)胞周期阻滯在G2/M和S期,并具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。結(jié)論:1.含釩多金屬氧酸鹽PW9V3、PMo10V2、V18O42具有較好的抗乳腺癌作用活性;2.三種含釩多金屬氧酸鹽的抗乳腺癌MCF-7細(xì)胞活性作用V18O42PMo10V2PW9V3;3.PW9V3、PMo10V2、V18O42與ct DNA之間存在一定的相互作用;4.PW9V3、PMo10V2、V18O42與BSA之間存在一定的相互作用;5.PW9V3、PMo10V2、V18O42具有抑制細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。
【關(guān)鍵詞】:多金屬氧酸鹽 乳腺癌 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 ct DNA相互作用 BSA相互作用
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R96
【目錄】:
  • 中文摘要4-6
  • Abstract6-12
  • 第1章 前言12-23
  • 1.1 多金屬氧酸鹽的概述及其抗腫瘤作用研究進(jìn)展12-18
  • 1.1.1 多金屬氧酸鹽概述12
  • 1.1.2 多金屬氧酸鹽抗腫瘤作用研究進(jìn)展12-18
  • 1.2 腫瘤的治療方法及抗腫瘤機制研究18-21
  • 1.2.1 腫瘤的概述18
  • 1.2.2 腫瘤的治療方法18-20
  • 1.2.3 抗腫瘤作用的機制研究20-21
  • 1.3 本課題研究的目的和意義21-23
  • 第2章 材料與方法23-30
  • 2.1 主要儀器與試劑23-24
  • 2.1.1 主要儀器23
  • 2.1.2 主要試劑23-24
  • 2.2 6種含釩多金屬氧酸鹽的合成與表征24-25
  • 2.2.1 α-Na_(10)[PW_(11)V(H_2O)O_(37)]·16H_2O的合成與表征24
  • 2.2.2 α-Na_(10)[PW_9V_3(H_2O)O_(37)]·16H_2O的合成與表征24
  • 2.2.3 α-K_5[SiW_(11)VO_(40)] 的合成與表征24
  • 2.2.4 α-1,, 2, 3, - K_6H[SiW_9V_3O_(40)] 的合成與表征24
  • 2.2.5 K_5PMo_(100V_2O_(40)的合成與表征24-25
  • 2.2.6 K_(13)[V_(18)O_(42)(Cl)]·16H_2O的合成的合成與表征25
  • 2.3 細(xì)胞培養(yǎng)25
  • 2.3.1 細(xì)胞株25
  • 2.3.2 細(xì)胞培養(yǎng)25
  • 2.4 MTT法檢測細(xì)胞生長抑制作用25-26
  • 2.5 細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測26
  • 2.6 含釩多金屬氧酸鹽與ctDNA相互作用26-27
  • 2.6.1 紫外光譜法26
  • 2.6.2 熒光光譜法26-27
  • 2.6.3 含釩多金屬氧酸鹽對DNA-EB熒光光譜的影響27
  • 2.7 含釩多金屬氧酸鹽與BSA相互作用27-28
  • 2.7.1 紫外光譜法27
  • 2.7.2 熒光光譜法27
  • 2.7.3 同步熒光法27-28
  • 2.8 細(xì)胞周期檢測28
  • 2.9 細(xì)胞凋亡檢測28-29
  • 2.9.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡28
  • 2.9.2 Hoechst33342/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡28-29
  • 2.10 統(tǒng)計學(xué)分析29-30
  • 第3章 實驗結(jié)果30-56
  • 3.1 含釩多金屬氧酸鹽的表征30-33
  • 3.1.1 含釩多金屬氧酸鹽的紅外光譜30-31
  • 3.1.2 含釩多金屬氧酸鹽的紫外光譜31-33
  • 3.1.3 含釩多金屬氧酸鹽的元素分析33
  • 3.2 含釩多金屬氧酸鹽對MCF-7 細(xì)胞的生長抑制作用33-37
  • 3.3 含釩多金屬氧酸鹽與ctDNA相互作用37-43
  • 3.3.1 紫外光譜法37-39
  • 3.3.2 熒光光譜法39-43
  • 3.4 含釩多金屬氧酸鹽與BSA相互作用43-50
  • 3.4.1 紫外光譜法43-45
  • 3.4.2 熒光光譜法45-50
  • 3.5 含釩多金屬氧酸鹽對細(xì)胞周期的影響50-53
  • 3.6 含釩多金屬氧酸鹽對細(xì)胞凋亡的影響53-56
  • 3.6.1 Hoechst33342/PI雙染檢測53-55
  • 3.6.2 Annexin V/PI檢測細(xì)胞凋亡55-56
  • 第4章 討論56-61
  • 4.1 含釩多金屬氧酸鹽的抗乳腺癌MCF-7 細(xì)胞活性56-57
  • 4.2 含釩多金屬氧酸鹽與ctDNA之間相互作用57-58
  • 4.3 含釩多金屬氧酸鹽與BSA之間的相互作用58
  • 4.4 含釩多金屬氧酸鹽對細(xì)胞周期的影響58-59
  • 4.5 含釩多金屬氧酸鹽對細(xì)胞凋亡的影響59-61
  • 第5章 結(jié)論61-62
  • 參考文獻(xiàn)62-70
  • 在學(xué)期間所取得的科研成果70-71
  • 致謝71

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